| 致谢 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 主要缩略词表 | 第12-13页 |
| 目录 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 1 MIR-27A对MG63细胞的MAP2K4靶向调控鉴定 | 第17-43页 |
| 1.1 实验材料和仪器设备 | 第17-19页 |
| 1.1.1 细胞株 | 第17页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
| 1.1.3 试剂配制 | 第18页 |
| 1.1.4 主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 1.2 实验方法 | 第19-35页 |
| 1.2.1 MG63细胞的复苏及培养 | 第19-20页 |
| 1.2.2 生物信息学分析 | 第20页 |
| 1.2.3 miR-27a前体和抑制剂序列的合成 | 第20-21页 |
| 1.2.4 MG63细胞瞬时转染 | 第21页 |
| 1.2.5 荧光定量PCR检测MG63细胞中miR-27a的表达 | 第21-24页 |
| 1.2.6 Western blot检测MAP2K4的表达 | 第24-28页 |
| 1.2.7 双荧光检测靶基因 | 第28-35页 |
| 1.2.8 统计分析 | 第35页 |
| 1.3 结果 | 第35-39页 |
| 1.3.1 荧光定量PCR检测miR-27a水平的表达 | 第35-36页 |
| 1.3.2 抑制miR-27a的表达对MAP2K4蛋白表达的影响 | 第36-37页 |
| 1.3.3 MAP2K4是miR-27a的直接靶基因 | 第37-39页 |
| 1.4 讨论 | 第39-43页 |
| 2 MIR-27A对MG63细胞增殖和侵袭转移的影响 | 第43-59页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第43-45页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第43页 |
| 2.1.2 试剂配制 | 第43-44页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第44-45页 |
| 2.2 实验方法 | 第45-50页 |
| 2.2.1 应用MTT法检测不同处理后MG63细胞的增殖情况 | 第45页 |
| 2.2.2 MG63细胞的克隆形成 | 第45页 |
| 2.2.3 Transwell检测MG63细胞的侵袭迁移情况 | 第45-46页 |
| 2.2.4 Western blot检测phospho-JNK1、phospho-p38的表达 | 第46-50页 |
| 2.2.5 统计分析 | 第50页 |
| 2.3 结果 | 第50-55页 |
| 2.3.1 miR-27a对骨肉瘤细胞MG63增殖活性的影响 | 第50-52页 |
| 2.3.2 miR-27a对骨肉瘤细胞MG63迁移和侵袭能力的影响 | 第52-54页 |
| 2.3.3 miR-27a在MG63中通过JNK/p38信号通路发挥调节作用 | 第54-55页 |
| 2.4 讨论 | 第55-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 综述 | 第65-94页 |
| References | 第80-94页 |
| 附录 | 第94-108页 |
| 作者简介 | 第108页 |
