| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 文献回顾 | 第15-27页 |
| 第一部分 AChR 的提取 | 第27-33页 |
| 1 材料 | 第27-28页 |
| 1.1 主要试剂 | 第27页 |
| 1.2 主要试剂的配制 | 第27-28页 |
| 1.3 实验材料准备 | 第28页 |
| 1.4 主要仪器 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-30页 |
| 2.1 大鼠的去神经支配术 | 第28-29页 |
| 2.2 大鼠 AChR 的粗提 | 第29页 |
| 2.3 人 AChR 的粗提 | 第29-30页 |
| 2.4 BCA 法检测大鼠及人 AChR 粗提物的浓度 | 第30页 |
| 3 结果 | 第30-32页 |
| 3.1 去神经支配术后大鼠的临床表现 | 第30-31页 |
| 3.2 乙酰胆碱受体的浓度 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-33页 |
| 第二部 抗 AChR 抗体检测方法的建立 | 第33-39页 |
| 1 材料 | 第33-34页 |
| 1.1 主要试剂 | 第33页 |
| 1.2 主要试剂的配制 | 第33页 |
| 1.3 实验材料准备 | 第33-34页 |
| 2 方法 | 第34-36页 |
| 2.1 兔抗人 IgG 抗体的制备 | 第34-35页 |
| 2.2 放射免疫法检测抗 AChR 抗体方法的建立 | 第35页 |
| 2.3 放射免疫法检测患者血清中 AChR 抗体 | 第35-36页 |
| 3 结果 | 第36-38页 |
| 3.1 免疫双扩实验结果 | 第36页 |
| 3.2 放射免疫实验方法的建立 | 第36-37页 |
| 3.3 放射免疫法检测患者血清中 AChR 抗体 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-39页 |
| 第三部分 真核重组表达人 nAChRα1 亚单位胞外域 | 第39-50页 |
| 1 材料 | 第39-41页 |
| 1.1 载体质粒、菌株及细胞 | 第39页 |
| 1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 1.3 主要试剂的配制 | 第39-40页 |
| 1.4 主要仪器 | 第40-41页 |
| 2 方法 | 第41-46页 |
| 2.1 人 AChR α1 亚单位胞外域基因的合成 | 第41-42页 |
| 2.2 pcDNA3.1-ECD 载体构建 | 第42-44页 |
| 2.3 CHO-k1 细胞的转染 | 第44-45页 |
| 2.4 荧光实时定量 PCR 法检测目的基因的表达 | 第45页 |
| 2.5 放射免疫沉淀法检测蛋白的表达 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-48页 |
| 3.1 真核表达载体 pcDNA3.1-ECD 的鉴定 | 第46页 |
| 3.2 转染细胞的 RNA 逆转录结果 | 第46-47页 |
| 3.3 荧光实时定量 PCR 结果 | 第47-48页 |
| 3.4 放射免疫法检测 ECD 蛋白表达量及蛋白的生物学活性 | 第48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 第四部分 原核重组表达三个碱基突变的 nAChRα1 胞外域蛋白 | 第50-63页 |
| 1 材料 | 第50-53页 |
| 1.1 载体质粒及菌株 | 第50页 |
| 1.2 主要试剂 | 第50-51页 |
| 1.3 主要试剂的配制 | 第51-53页 |
| 1.4 主要仪器 | 第53页 |
| 2 方法 | 第53-59页 |
| 2.1 pET22b-mα1tmECD 载体的构建 | 第53-56页 |
| 2.2 pET22b-mα1tmECD 的原核表达 | 第56-57页 |
| 2.3 pET22b-mα1tmECD 蛋白的纯化与复性 | 第57-59页 |
| 3 结果 | 第59-61页 |
| 3.1 pET22b-mα1tmECD 重组质粒鉴定 | 第59-60页 |
| 3.2 SDS-PAGE 鉴定 mα1tmECD 蛋白的表达 | 第60页 |
| 3.3 蛋白复性条件的优化 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| 小结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 个人简历和研究成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
