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pre-B细胞中CTCF介导沉默子Sis和增强子Ei相互作用并抑制VJ重排

中文摘要第4-5页
Abstract第5页
缩略语表第8-9页
前言第9-12页
    研究现状、成果第9-11页
    研究目的、方法第11-12页
1 对象和方法第12-36页
    1.1 染色质构象捕获技术对象和方法第12-20页
        1.1.1 实验材料第12-15页
        1.1.2 实验原理第15-16页
        1.1.3 技术流程第16-19页
        1.1.4 对照实验的设立第19-20页
    1.2 染色体免疫共沉淀技术对象和方法第20-26页
        1.2.1 染色体免疫共沉淀技术实验材料第20-22页
        1.2.2 染色体免疫共沉淀技术实验原理第22-23页
        1.2.3 染色体免疫共沉淀(Chip)技术流程第23-26页
    1.3 shRNA下调CTCF表达技术对象和方法第26-32页
        1.3.1 ShRNA下调CTCF表达技术实验材料第26-29页
        1.3.2 shRNA质粒的构建第29-31页
        1.3.3 iCTCF-shRNA慢病毒产生和70Z/3细胞的感染第31-32页
        1.3.4 Western Blot检测CTCF的基因沉默水平第32页
    1.4 Igκ基因重排实验对象和方法第32-36页
        1.4.1 lgx互基因重排实验材料第32-34页
        1.4.2 细胞总RNA的提取及Real-time PCR检测第34-35页
        1.4.3 PCR检测V_κ的重排第35-36页
2 结果第36-43页
    2.1 Sis和Ei仅在pre-B细胞中存在相互作用第36-39页
        2.1.1 3C对照实验的设立第36-37页
        2.1.2 pro-B细胞38B9中Sis和Ei不存在相互作用第37-38页
        2.1.3 pre-B细胞70Z/3中Sis和Ei存在相互作用第38-39页
    2.2 在70Z/3细胞中CTCF结合于Sis片段第39页
    2.3 shRNA质粒的构建第39-41页
        2.3.1 pSPR-iCTCF质粒的鉴定第39-40页
        2.3.2 277-iCTCF质粒的鉴定第40-41页
    2.4 70Z/3细胞中CTCF下调后Sis与Ei相互作用消失第41-42页
    2.5 CTCF通过抑制Igκ基因germline的转录从而抑制VJ重排第42-43页
3 讨论第43-45页
结论第45-46页
参考文献第46-50页
发表论文和参加科研情况说明第50-51页
综述第51-63页
    综述参考文献第58-63页
致谢第63页

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