中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
缩略语表 | 第8-9页 |
前言 | 第9-12页 |
研究现状、成果 | 第9-11页 |
研究目的、方法 | 第11-12页 |
1 对象和方法 | 第12-36页 |
1.1 染色质构象捕获技术对象和方法 | 第12-20页 |
1.1.1 实验材料 | 第12-15页 |
1.1.2 实验原理 | 第15-16页 |
1.1.3 技术流程 | 第16-19页 |
1.1.4 对照实验的设立 | 第19-20页 |
1.2 染色体免疫共沉淀技术对象和方法 | 第20-26页 |
1.2.1 染色体免疫共沉淀技术实验材料 | 第20-22页 |
1.2.2 染色体免疫共沉淀技术实验原理 | 第22-23页 |
1.2.3 染色体免疫共沉淀(Chip)技术流程 | 第23-26页 |
1.3 shRNA下调CTCF表达技术对象和方法 | 第26-32页 |
1.3.1 ShRNA下调CTCF表达技术实验材料 | 第26-29页 |
1.3.2 shRNA质粒的构建 | 第29-31页 |
1.3.3 iCTCF-shRNA慢病毒产生和70Z/3细胞的感染 | 第31-32页 |
1.3.4 Western Blot检测CTCF的基因沉默水平 | 第32页 |
1.4 Igκ基因重排实验对象和方法 | 第32-36页 |
1.4.1 lgx互基因重排实验材料 | 第32-34页 |
1.4.2 细胞总RNA的提取及Real-time PCR检测 | 第34-35页 |
1.4.3 PCR检测V_κ的重排 | 第35-36页 |
2 结果 | 第36-43页 |
2.1 Sis和Ei仅在pre-B细胞中存在相互作用 | 第36-39页 |
2.1.1 3C对照实验的设立 | 第36-37页 |
2.1.2 pro-B细胞38B9中Sis和Ei不存在相互作用 | 第37-38页 |
2.1.3 pre-B细胞70Z/3中Sis和Ei存在相互作用 | 第38-39页 |
2.2 在70Z/3细胞中CTCF结合于Sis片段 | 第39页 |
2.3 shRNA质粒的构建 | 第39-41页 |
2.3.1 pSPR-iCTCF质粒的鉴定 | 第39-40页 |
2.3.2 277-iCTCF质粒的鉴定 | 第40-41页 |
2.4 70Z/3细胞中CTCF下调后Sis与Ei相互作用消失 | 第41-42页 |
2.5 CTCF通过抑制Igκ基因germline的转录从而抑制VJ重排 | 第42-43页 |
3 讨论 | 第43-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第50-51页 |
综述 | 第51-63页 |
综述参考文献 | 第58-63页 |
致谢 | 第63页 |