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猪源乙脑病毒株CSF.XZ-2D的分离鉴定及细胞传代分析

摘要第4-5页
Abstract第5页
1 引言第8-23页
    1.1 流行性乙型脑炎第8页
    1.2 乙脑的流行病学及危害第8-11页
        1.2.1 乙脑的流行概况第8-10页
        1.2.2 乙脑的危害第10-11页
    1.3 JEV 的生物学特性第11-14页
        1.3.1 JEV 的基因组结构第11-12页
        1.3.2 JEV 的免疫原性第12-13页
        1.3.3 JEV 的基因分型第13-14页
        1.3.4 敏感动物及常用敏感细胞第14页
    1.4 JEV 的理化特性第14页
    1.5 乙脑的发病机理第14-15页
    1.6 乙脑的诊断方法研究进展第15-18页
        1.6.1 JEV 的分离鉴定第15-16页
        1.6.2 JEV 的血清学诊断第16-17页
        1.6.3 JEV 的分子生物学诊断第17-18页
    1.7 乙脑的防控与疫苗第18-21页
        1.7.1 乙脑的防控第18页
        1.7.2 乙脑疫苗第18-21页
    1.8 本研究的目的和意义第21-23页
2 材料与方法第23-29页
    2.1 试验材料第23页
        2.1.1 病料、病毒株、细胞系第23页
        2.1.2 试验动物第23页
        2.1.3 试剂第23页
        2.1.4 仪器设备第23页
    2.2 试验方法第23-29页
        2.2.1 病毒盲传分离第23-24页
        2.2.2 引物设计第24页
        2.2.3 RNA 的提取及反转录第24页
        2.2.4 PCR 扩增第24页
        2.2.5 2%琼脂糖凝胶电泳及割胶回收目的片段第24-25页
        2.2.6 基因克隆及测序第25页
        2.2.7 系统进化树构建第25-26页
        2.2.8 乳鼠感染实验第26页
        2.2.9 间接免疫荧光试验(IFA)第26页
        2.2.10 设计引物第26页
        2.2.11 病毒传代培养第26-27页
        2.2.12 病毒 RNA 提取及 RT-PCR第27页
        2.2.13 基因克隆及测序第27页
        2.2.14 E 基因序列分析及系统进化树构建第27-29页
3 结果第29-36页
    3.1 猪流产胎儿脑脊液细胞盲传结果第29页
    3.2 RT-PCR 扩增 JEV C/prM、E 基因及序列分析第29-30页
    3.3 分离株 CSF.XZ-2D 的基因分型及进化树分析第30页
    3.4 CSF.XZ-2D 对乳鼠的致病性试验结果第30-31页
    3.5 CSF.XZ-2D 感染 BHK-21 细胞的 IFA 鉴定第31-32页
    3.6 CSF.XZ-2D 的传代培养第32-33页
    3.7 E 基因 RT-PCR 结果第33页
    3.8 E 基因序列分析结果第33页
    3.9 E 基因氨基酸位点差异分析第33-34页
    3.10 E 基因系统进化分析第34-36页
4 讨论第36-38页
5 结论第38-39页
参考文献第39-45页
作者简历第45-46页
致谢第46-47页

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