摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
缩写简词表 | 第12-13页 |
前言 | 第13-17页 |
第一章 材料和方法 | 第17-30页 |
1.1 实验材料 | 第17-22页 |
1.1.1 细胞系 | 第17页 |
1.1.2 质粒 | 第17页 |
1.1.3 主要试剂 | 第17-18页 |
1.1.4 主要耗材 | 第18页 |
1.1.5 主要仪器 | 第18-19页 |
1.1.6 主要试剂配制 | 第19-22页 |
1.2 实验方法 | 第22-30页 |
1.2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
1.2.2 确定最优嘌呤霉素筛选浓度 | 第23页 |
1.2.3 建立稳定转染细胞系 | 第23-24页 |
1.2.4 细胞总蛋白的抽提和浓度测定 | 第24-25页 |
1.2.5 Western blot实验 | 第25-26页 |
1.2.6 MTT法检测细胞增殖 | 第26页 |
1.2.7 流式细胞仪分析细胞周期 | 第26-27页 |
1.2.8 划痕实验 | 第27页 |
1.2.9 实时荧光定量PCR(Real-time qPCR) | 第27-29页 |
1.2.10 统计学分析 | 第29-30页 |
第二章 结果 | 第30-42页 |
2.1 WESTERN BLOTTING验证结果 | 第30-31页 |
2.1.1 EGFR和p-EGFR在鼻咽癌细胞5-8F和6-10B细胞中的表达 | 第30页 |
2.1.2 EphA2和磷酸化EphA2 S897在鼻咽癌细胞5-8F和6-10B中的表达 | 第30-31页 |
2.2 实时荧光定量PCR(REAL-TIME QPCR) | 第31-33页 |
2.3 信号通路研究 | 第33-34页 |
2.4 建立稳定转染细胞系 | 第34-36页 |
2.4.1 建立突变型EphA2载体和空载体稳定转染的5-8F细胞系 | 第34-35页 |
2.4.2 建立野生型EphA2载体和空载体稳定转染的6-10B细胞系 | 第35-36页 |
2.5 MTT检测细胞增殖 | 第36-38页 |
2.5.1 EphA2 S897位点突变对5-8F细胞增殖的影响 | 第36-37页 |
2.5.2 EphA2过表达对6-10B细胞增殖的影响 | 第37-38页 |
2.6 流式细胞仪分析 | 第38-40页 |
2.7 伤口愈合实验检测细胞的迁移能力 | 第40-42页 |
2.7.1 EphA2 S897位点突变对5-8F细胞迁移能力的影响 | 第40页 |
2.7.2 EphA2过表达对6-10B细胞迁移能力的影响 | 第40-42页 |
第三章 讨论 | 第42-45页 |
第四章 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
综述 | 第49-60页 |
参考文献 | 第55-60页 |
攻读硕士学位期间主要的研究成果 | 第60-62页 |
致谢 | 第62-63页 |