摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
缩略词 | 第12-13页 |
第一章 绪论 | 第13-28页 |
1.1 氧化应激在神经系统疾病中的病理机制及意义 | 第13页 |
1.2 机体抗氧化防御体系中的关键酶和抗氧化物质 | 第13-14页 |
1.3 氧化应激与细胞凋亡 | 第14-19页 |
1.3.1 活性氧介导的细胞凋亡 | 第14-15页 |
1.3.2 线粒体介导的细胞凋亡 | 第15-16页 |
1.3.3 钙离子超载介导的细胞凋亡 | 第16页 |
1.3.4 凋亡蛋白表达异常 | 第16-19页 |
1.4 具有神经保护作用的中药研究概况 | 第19-23页 |
1.4.1 单体研究概况 | 第19-20页 |
1.4.2 单味中药研究概况 | 第20-22页 |
1.4.3 复方中药研究概况 | 第22-23页 |
1.5 两种姜黄属植物研究概况 | 第23-26页 |
1.5.1 中药莪术研究概况 | 第23-25页 |
1.5.2 中药郁金研究概况 | 第25-26页 |
1.6 本研究的立题依据、意义和主要研究路线 | 第26-28页 |
1.6.1 立题依据与意义 | 第26页 |
1.6.2 论文研究路线 | 第26-28页 |
第二章 H_2O_2氧化损伤PC12细胞模型的建立 | 第28-43页 |
2.1 主要仪器 | 第28页 |
2.2 实验材料 | 第28页 |
2.3 实验试剂 | 第28页 |
2.4 溶液配制 | 第28-30页 |
2.5 实验方法 | 第30-33页 |
2.5.1 实验分组 | 第30-31页 |
2.5.2 MTT法检测H_2O_2对PC12细胞损伤作用 | 第31页 |
2.5.3 倒置显微镜下观察H2O2对PC12细胞的形态学变化 | 第31-32页 |
2.5.4 Hoechst 33342染色观察H_2O_2对PC12细胞的影响 | 第32页 |
2.5.5 细胞内ROS含量的检测 | 第32页 |
2.5.6 Western blot检测Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达 | 第32-33页 |
2.6 统计学分析 | 第33-34页 |
2.7 实验结果 | 第34-41页 |
2.7.1 H_2O_2对PC12细胞存活率的影响 | 第34-36页 |
2.7.2 H_2O_2对PC12细胞形态学影响 | 第36-37页 |
2.7.3 H_2O_2干预后PC12细胞凋亡形态学影响 | 第37-38页 |
2.7.4 H_2O_2对PC12细胞内ROS含量的影响 | 第38-39页 |
2.7.5 蛋白表达 | 第39-41页 |
2.8 结论与讨论 | 第41-43页 |
第三章 莪术提取物对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用及其作用机制初步研究 | 第43-71页 |
3.1 主要仪器 | 第43页 |
3.2 实验材料 | 第43页 |
3.3 实验试剂 | 第43页 |
3.4 溶液配制 | 第43页 |
3.5 实验方法 | 第43-51页 |
3.5.1 受试样品的制备 | 第43-44页 |
3.5.2 实验分组 | 第44-45页 |
3.5.3 实验方法 | 第45-51页 |
3.5.3.0 MTT法检测细胞存活率 | 第45页 |
3.5.3.1 细胞的形态学观察 | 第45页 |
3.5.5.2 荧光显微镜形态学检测细胞凋亡 | 第45页 |
3.5.3.3 荧光酶标仪检测细胞内ROS含量 | 第45-46页 |
3.5.3.4 细胞培养基中LDH、SOD、CAT活性及GSH含量测定 | 第46-47页 |
3.5.3.5 流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第47-48页 |
3.5.3.6 流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位(MMP) | 第48页 |
3.5.3.7 荧光酶标仪检测细胞内钙离子浓度([Ca~(2+)]_i) | 第48-49页 |
3.5.3.8 Western blot检测Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达 | 第49-51页 |
3.6 统计学分析 | 第51页 |
3.7 实验结果 | 第51-68页 |
3.7.1 莪术提取物对正常PC12细胞存活率的影响 | 第51-52页 |
3.7.2 莪术提取物对H_2O_2诱导PC12细胞存活率的影响 | 第52-53页 |
3.7.3 莪术提取物对H_2O_2诱导的PC12细胞形态学变化 | 第53-54页 |
3.7.4 Hoechst 33342染色检测细胞凋亡结果 | 第54-55页 |
3.7.5 药物处理后H_2O_2诱导的PC12细胞相应生化指标的变化 | 第55-60页 |
3.7.6 细胞胞浆活性氧ROS测定 | 第60-62页 |
3.7.7 药物处理后PC12细胞凋亡率的变化 | 第62页 |
3.7.8 各组细胞线粒体膜电位的变化 | 第62-63页 |
3.7.9 药物处理后PC12细胞细胞内钙离子检测结果 | 第63-65页 |
3.7.10 莪术提取物对H_2O_2诱导的PC12细胞作用主成分分析 | 第65-66页 |
3.7.11 莪术提取物对PC12细胞Bcl-2,Bax,Caspase-3蛋白表达的影响 | 第66-68页 |
3.8 结论 | 第68-69页 |
3.9 讨论 | 第69-71页 |
第四章 郁金提取物对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用及其作用机制初步研究 | 第71-91页 |
4.0 实验材料及试剂 | 第71页 |
4.1 郁金不同提取物的制备 | 第71页 |
4.2 实验分组 | 第71页 |
4.3 实验方法 | 第71-72页 |
4.4 统计学分析 | 第72页 |
4.5 实验结果 | 第72-89页 |
4.5.1 郁金提取物对正常PC12细胞存活率的影响 | 第72-73页 |
4.5.2 郁金提取物对H_2O_2诱导PC12细胞存活率的影响 | 第73-74页 |
4.5.3 郁金提取物对H_2O_2诱导的PC12细胞形态学变化 | 第74-75页 |
4.5.4 Hoechst 33342染色检测细胞凋亡结果 | 第75-76页 |
4.5.5 药物处理后H_2O_2诱导PC12细胞相应生化指标的变化 | 第76-81页 |
4.5.6 细胞胞浆活性氧ROS测定 | 第81-82页 |
4.5.7 药物处理后PC12细胞凋亡率的变化 | 第82-83页 |
4.5.8 各组细胞线粒体膜电位的变化 | 第83-84页 |
4.5.9 药物处理后PC12细胞钙离子浓度的变化 | 第84-85页 |
4.5.10 主成分分析结果 | 第85-86页 |
4.5.11 Western blotting检测各组PC12细胞Bel-2,Bax,Caspase-3蛋白表达的变化 | 第86-89页 |
4.6 结论 | 第89-90页 |
4.7 讨论 | 第90-91页 |
第五章 结论与展望 | 第91-95页 |
5.1 结语 | 第91-93页 |
5.2 展望 | 第93-95页 |
参考文献 | 第95-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
在学期间已发表论文 | 第112页 |