英文缩略词 | 第9-10页 |
摘要 | 第10-13页 |
ABSTRACT | 第13-15页 |
第一章 导论 | 第16-27页 |
1. 吸烟与肺癌发生的相关性研究 | 第17-20页 |
2. 小鼠吸烟模型在肺癌研究中应用 | 第20-23页 |
3. 肺癌相关分子网络的系统生物学研究 | 第23-24页 |
4. OLC1研究概况 | 第24-26页 |
5. 本课题的研究目的和研究策略 | 第26-27页 |
第二章 OLC1基因在非小细胞肺癌中异常表达 | 第27-37页 |
一、实验结果 | 第27-32页 |
1. OLC1蛋白在非小细胞肺癌组织中异常高表达 | 第27-29页 |
2. OLC1高表达在非小细胞肺癌中的临床意义 | 第29-32页 |
二、讨论 | 第32-37页 |
1. OLC1基因的基本信息 | 第32-33页 |
2. OLC1在恶性肿瘤中的异常表达 | 第33-34页 |
3. OLC1在非小细胞肺癌中的异常高表达 | 第34-37页 |
第三章 OLC1和CSC对肺癌细胞系mRNA表达谱的影响 | 第37-77页 |
一、实验结果 | 第37-67页 |
1. CSC制备及其细胞毒性实验 | 第37-38页 |
2. CSC处理对OLC1蛋白表达水平的影响 | 第38页 |
3. NNK、MCA、B[a]P处理对OLC1蛋白表达水平无影响 | 第38-39页 |
4. CSC处理对肺癌细胞系mRNA表达谱的影响 | 第39-46页 |
5. 稳定过表达OLC1的肺癌细胞株的建立及其mRNA表达谱分析 | 第46-52页 |
6. OLC1过表达肺癌细胞系再经CSC处理后的mRNA表达谱分析 | 第52-59页 |
7. A549及A549/OLC1细胞经CSC处理后的mRNA表达谱整合分析 | 第59-67页 |
二、讨论 | 第67-77页 |
1. CSC处理致使肺癌细胞的OLC1蛋白水平上升 | 第67页 |
2. NNK、MCA、B[a]P对OLC1蛋白水平无影响 | 第67-68页 |
3. CSC刺激对肺癌细胞基因表达谱影响及其生物学意义 | 第68-69页 |
4. OLC1过表达对肺癌细胞mRNA表达谱影响及其生物学意义 | 第69-70页 |
5. CSC处理对过表达OLC1肺癌细胞的mRNA表达谱的影响及其生物学意义 | 第70-71页 |
6. A549及A549/OLC1细胞经CSC处理后的mRNA表达谱整合分析的提示 | 第71-77页 |
第四章 OLC1基因和香烟烟雾暴露对于小鼠肺组织mRNA表达谱的影响 | 第77-118页 |
一、实验结果 | 第77-112页 |
1. OLC1基因工程小鼠的鉴定 | 第77-78页 |
2. OLC1基因工程小鼠肺组织mRNA表达谱分析 | 第78-84页 |
2.1. C57BL/6J/OLC1小鼠肺组织mRNA表达谱表达特征 | 第78-81页 |
2.2. C57BL/6J/OLC1si小鼠肺组织mRNA表达谱表达特征 | 第81-84页 |
3. OLC1基因工程小鼠吸烟模型的构建 | 第84-85页 |
4. 小鼠短期香烟烟雾暴露后肺组织mRNA表达谱分析 | 第85-94页 |
4.1. 野生型小鼠短期香烟烟雾暴露后肺组织mRNA表达谱特征 | 第85-88页 |
4.2. C57BL/6J/OLC1小鼠短期香烟烟雾暴露后肺组织mRNA表达谱特征 | 第88-91页 |
4.3. C57BL/6J/OLC1si小鼠短期香烟烟雾暴露后肺组织mRNA表达谱特征 | 第91-94页 |
5. 小鼠长期香烟烟雾暴露后肺组织mRNA表达谱分析 | 第94-103页 |
5.1. 野生型小鼠长期香烟烟雾暴露后肺组织mRNA表达谱特征 | 第94-97页 |
5.2. C57BL/6J/OLC1小鼠长期香烟烟雾暴露后肺组织mRNA表达谱特征 | 第97-100页 |
5.3. C57BL/6J/OLC1si小鼠长期香烟烟雾暴露后肺组织mRNA表达谱特征 | 第100-103页 |
6. 香烟烟雾暴露两个时长的小鼠肺组织mRNA表达谱的整合分析 | 第103-112页 |
二、讨论 | 第112-118页 |
1. OLC1基因工程小鼠肺组织差异表达基因及其生物学意义 | 第112-113页 |
2. OLC1基因工程小鼠短期香烟暴露后肺组织差异表达基因及其生物学意义 | 第113-114页 |
3. OLC1基因工程小鼠长期香烟暴露后肺组织差异表达基因及其生物学意义 | 第114-115页 |
4.香烟烟雾暴露两个时长的小鼠肺组织mRNA表达谱的整合分析 | 第115-118页 |
第五章 材料与方法 | 第118-142页 |
一、实验材料 | 第118-129页 |
1. 细胞系 | 第118页 |
2. 肺癌患者组织标本及其相关信息 | 第118-119页 |
3. 菌株及质粒载体 | 第119页 |
4. mRNA表达谱样本 | 第119-120页 |
5. PCR引物序列 | 第120-121页 |
6. 抗体 | 第121页 |
7. 主要试剂 | 第121-125页 |
8. 常用试剂的配制 | 第125-127页 |
9. 细胞培养基 | 第127-128页 |
10. 主要仪器和耗材 | 第128-129页 |
11. RNA质量控制、生物信息学分析及绘图软件 | 第129页 |
二、实验方法 | 第129-142页 |
1. 香烟烟雾凝集物(CSC)制备 | 第129页 |
2. 小鼠香烟暴露及样本收集 | 第129-130页 |
3. 总RNA样品的制备与鉴定 | 第130-131页 |
4. 基因芯片检测mRNA表达谱 | 第131-134页 |
5. 芯片数据分析 | 第134页 |
6. 实时荧光定量PCR分析 | 第134-136页 |
7. 分子生物学实验方法 | 第136-139页 |
8. 细胞生物学方法 | 第139-141页 |
9. 免疫组织化学分析 | 第141-142页 |
全文总结 | 第142-144页 |
参考文献 | 第144-152页 |
本学位研究课题受以下基金资助 | 第152-153页 |
致谢 | 第153-154页 |