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G3BP1通过cGAS调控抗病毒天然免疫的作用机制研究

缩略词表第5-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-11页
前言第12-17页
材料与方法第17-29页
    1 材料及来源第17-20页
        1.1 质粒及CRISPR /Cas9引导序列第17页
        1.2 细胞、病毒、菌株第17页
        1.3 常用试剂第17-19页
        1.4 主要仪器设备第19页
        1.5 常用溶液配方第19-20页
    2 实验方法第20-29页
        2.1 细胞培养第20页
        2.2 免疫沉淀第20-21页
        2.3 Western Blot第21页
        2.4 CRISPR/Cas9构建基因敲除细胞第21-22页
        2.5 核酸类分子刺激细胞第22页
        2.6 实时荧光定量PCR(Q-PCR)第22-24页
        2.7 cGAMP检测第24-25页
        2.8 DNA结合实验第25-26页
        2.9 HSV病毒扩增及滴度测定第26页
        2.10 数据处理第26-29页
实验结果第29-45页
    1 cGAS相互作用蛋白质的鉴定第29页
    2 G3BP1与cGAS发生相互作用第29-31页
    3 G3BP1稳定敲除细胞系的构建第31页
    4 G3BP1缺失特异性抑制胞浆DNA诱导的I型干扰素产生第31-39页
        4.1 G3BP1缺失抑制胞浆DNA诱导的I型干扰素表达第32页
        4.2 G3BP1缺失抑制胞浆DNA诱导的I型干扰素转录第32-34页
        4.3 G3BP1缺失抑制胞浆DNA诱导的干扰素通路激活第34-37页
        4.4 G3BP1缺失不影响cGAMP诱导的干扰素信号通路激活第37-38页
        4.5 G3BP1缺失抑制cGAS酶活性第38-39页
    5 G3BP1调控cGAS与胞浆DNA的结合第39-41页
        5.1 G3BP1缺失影响cGAS与胞浆DNA的结合能力第39-41页
        5.2 G3BP1缺失降低细胞对胞浆DNA刺激的敏感性第41页
    6 G3BP1增强细胞对DNA病毒的免疫能力第41-45页
        6.1 G3BP1缺失抑制DNA病毒HSV1诱导的I型干扰素产生第41-42页
        6.2 G3BP1缺失促进HSV1的复制和分泌第42-45页
讨论第45-47页
结论第47-49页
参考文献第49-53页
附表第53-57页
个人简历第57-59页
致谢第59页

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