| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-29页 |
| 1.1 CRISPR/Cas9介导的基因组定点编辑技术研究进展 | 第14-22页 |
| 1.1.1 CRISPR编辑系统的优势 | 第14页 |
| 1.1.2 CRISPR系统的结构及作用原理 | 第14-16页 |
| 1.1.3 CRISPR/Cas9的应用及在植物研究中的进展 | 第16-19页 |
| 1.1.4 CRISPR/Cas9在大豆中的研究进展 | 第19-22页 |
| 1.2 发根农杆菌介导的遗传转化研究进展 | 第22-27页 |
| 1.2.1 发根农杆菌Ri质粒的分类、结构和功能 | 第22-23页 |
| 1.2.2 发根农杆菌介导遗传转化的优点 | 第23页 |
| 1.2.3 发根农杆菌在植物研究中的应用 | 第23-27页 |
| 1.3 FEI和SHR基因的研究进展 | 第27-29页 |
| 1.3.1 纤维素合酶基因FEI的研究进展 | 第27页 |
| 1.3.2 根的辐射形态相关基因SHR的研究进展 | 第27-29页 |
| 第二章 GmFEI和GmSHR基因的克隆 | 第29-35页 |
| 2.1 材料与方法 | 第29-31页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第29-31页 |
| 2.2 结果与分析 | 第31-35页 |
| 第三章 CRISPR/Cas9在大豆基因组定点敲除中的应用 | 第35-51页 |
| 3.1 材料与方法 | 第35-39页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第35页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第35-39页 |
| 3.2 结果与分析 | 第39-49页 |
| 3.2.1 靶点选择及SgRNA:Cas9表达载体构建 | 第39-40页 |
| 3.2.2 CRISPR/Cas9介导的外源基因bar的定点敲除 | 第40-42页 |
| 3.2.3 CRISPR/Cas9介导的大豆内源基因的定点敲除 | 第42页 |
| 3.2.4 CRISPR/Cas9介导的GmFEI1和GmFEI2同时敲除 | 第42-49页 |
| 3.3 小结及讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 基因敲入和基因片段替换的尝试 | 第51-56页 |
| 4.1 材料与方法 | 第51-53页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第51页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第51-53页 |
| 4.2 结果与分析 | 第53-55页 |
| 4.2.1 敲入和替换供体载体构建及双载体在发状根中共转化 | 第53页 |
| 4.2.2 GmSHR-SP3靶点处敲入酶切位点XbaI和KpnI | 第53-54页 |
| 4.2.3 GmFEI2-SP2靶点处敲入DsRed2的表达盒 | 第54-55页 |
| 4.3 小结及讨论 | 第55-56页 |
| 第五章 全文结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 附录 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简历 | 第70页 |
