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核蛋白PCNP对小鼠DC细胞迁移与增殖能力的影响

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-10页
缩略词表第13-15页
1 引言第15-17页
2 材料第17-25页
    2.1 使用的主要试剂第17-19页
        2.1.1 细胞培养相关试剂第17页
        2.1.2 蛋白和RNA相关试剂第17-18页
        2.1.3 相关抗体第18-19页
    2.2 主要仪器设备第19-20页
    2.3 主要溶剂的配制和方法第20-25页
3 方法第25-35页
    3.1 免疫荧光实验(鉴定DC2.4 细胞)第25页
    3.2 引物设计第25-26页
    3.3 Ecoli DH5α 感受态细胞的制备第26-27页
    3.4 转化第27页
    3.5 挑取阳性克隆第27-28页
    3.6 PCMV-C-Flag及所用质粒的提取第28页
    3.7 质粒的验证第28页
    3.8 DC2.4 细胞培养与转染第28-29页
    3.9 DC2.4 细胞m RNA的提取及反转录第29-30页
    3.10 RT-PCR第30-31页
    3.11 DC2.4 细胞蛋白质的提取和浓度测定(BCA法)第31页
    3.12 免疫印迹杂交法第31-33页
    3.13 流式细胞术对DC2.4 细胞膜表面表达分子及表面共刺激的分子的检测(直接标记法)第33页
    3.14 DC2.4 细胞划痕实验第33页
    3.15 DC2.4 细胞小室实验第33-34页
    3.16 DC2.4 细胞平板克隆实验第34页
    3.17 统计学分析第34-35页
4 结果第35-51页
    4.1 DC2.4 细胞鉴定第35-37页
    4.2 PCNP片断和CDS区全长第37-38页
    4.3 成功建立PCNP过表达及沉默稳定株(RT-PCR验证)第38页
    4.4 成功构建PCNP过表达及沉默稳定株(Western Blot验证)第38-40页
    4.5 PCNP过表达与沉默对DC2.4 细胞形态的影响第40-41页
    4.6 PCNP 过表达与沉默对 DC 表面分子 MHCII 及表面共刺激分子CD80、CD86 的影响第41-42页
    4.7 PCNP过表达与沉默对DC细胞迁移的影响(细胞划痕实验)第42-43页
    4.8 PCNP过表达与沉默对DC细胞迁移的影响(T实验)第43-44页
    4.9 PCNP过表达与沉默对DC细胞克隆形成能力的影响(平板克隆实验)第44-45页
    4.10 分别用LPS和MG-132 处理DC2.4 细胞的PCNP基因沉默和过表达稳定株,检测处理后DC2.4 细胞形态的变化第45-46页
    4.11 PCNP沉默和过表达后的DC2.4 细胞再分别用LPS和MG-132 处理,检测对DC细胞迁移的影响第46-47页
    4.12 DC2.4 细胞经PCNP沉默和过表达后分别用LPS和MG-132 处理,观察对DC细胞克隆形成能力的影响第47-49页
    4.13 PCNP 沉默和过表达后再分别用 LPS 和 MG-132 处理对 DC2.4细胞 TNF-α 表达的影响第49-51页
小结第51-53页
讨论第53-59页
结论第59-61页
参考文献第61-65页
综述第65-87页
    参考文献第82-87页
致谢第87-89页
在读期间参加的学术会议及研究成果第89-90页

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