中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
序言 | 第10-12页 |
文献综述 | 第12-25页 |
1.胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)概述 | 第12-14页 |
1.1 IGF-Ⅰ的生物学功能 | 第13页 |
1.2 IGF-Ⅰ对骨骼肌的作用 | 第13-14页 |
2.腺相关病毒概述 | 第14-16页 |
3.间充质干细胞概述 | 第16-20页 |
3.1 间充质干细胞的发现 | 第16-17页 |
3.2 MSC的临床应用前景 | 第17-19页 |
3.3 间充质干细胞治疗骨骼肌损伤 | 第19-20页 |
4 骨骼肌损伤概述 | 第20-25页 |
4.1 骨骼肌损伤的分类 | 第20-21页 |
4.2 急性骨骼肌损伤的造模方法 | 第21-22页 |
4.3 骨骼肌损伤的治疗方法 | 第22-25页 |
1 材料与方法 | 第25-42页 |
1.1 实验动物与分组 | 第25页 |
1.2 小鼠腓肠肌急性钝挫伤模型的建立 | 第25页 |
1.3 携带人IGF-Ⅰ基因的重组腺相关病毒载体(rAAV2-IGF-Ⅰ)包装及鉴定 | 第25-35页 |
1.3.1 pTR-iRFP713-IRES-IGF-Ⅰ质粒构建 | 第25-31页 |
1.3.2 pAAV-iRFP713-IRES-IGF-Ⅰ、PDG质粒的大量制备 | 第31页 |
1.3.3 rAAV2-IGF-Ⅰ病毒包装 | 第31-32页 |
1.3.4 rAAV2-IGF-Ⅰ的分离和纯化 | 第32-33页 |
1.3.5 rAAV2-IGF-Ⅰ滴度测定 | 第33-34页 |
1.3.6 重组病毒鉴定 | 第34-35页 |
1.4 小鼠肌肉注射细胞、病毒 | 第35-36页 |
1.5 取材与指标检测 | 第36-40页 |
1.5.1 血液、肌肉取材 | 第36页 |
1.5.2 HE染色 | 第36页 |
1.5.3 IGF-Ⅰ 免疫组化及图像分析 | 第36-37页 |
1.5.4 小鼠腓肠肌Collagen-ⅠmRNA、Collagen-Ⅲ mRNA含量测定 | 第37-39页 |
1.5.5 小鼠血清肌酸激酶(CK)酶联免疫分析 | 第39-40页 |
1.6 主要实验仪器和试剂 | 第40-41页 |
1.6.1 实验主要仪器 | 第40-41页 |
1.7 数据统计处理 | 第41-42页 |
2 实验结果 | 第42-56页 |
2.1 RAAV2 –IGF-Ⅰ病毒包装结果及其在细胞内IRFP713报告基因的表达 | 第42-47页 |
2.1.1 pTR-EGFP-IRES-IGF-Ⅰ质粒鉴定结果 | 第42页 |
2.1.2 pTR-iRFP713-IRES-IGF-Ⅰ质粒鉴定结果 | 第42-43页 |
2.1.3 pAAV-IRFP713-IRES-IGF-Ⅰ质粒鉴定结果 | 第43-44页 |
2.1.4 rAAV2-IGF-Ⅰ腺相关病毒包装、鉴定及病毒滴度测定 | 第44-46页 |
2.1.5 rAAV2 –IGF-Ⅰ腺相关病毒感染细胞及功能基因IGF-Ⅰwestern-blot鉴定 | 第46-47页 |
2.2 肌肉注射rAAV2-IGF-Ⅰ、rAAV2-IGF-Ⅰ-MSC后iRFP报告基因表达比较 | 第47页 |
2.3 各组小鼠肌肉组织HE染色光镜结果观察比较 | 第47-50页 |
2.4 各组小鼠肌肉组织IGF-Ⅰ免疫组化结果比较 | 第50-52页 |
2.5 不同治疗方法对急性骨骼肌钝挫伤小鼠腓肠肌Collagen-Ⅰ、Ⅲ mRNA表达的影响 | 第52-54页 |
2.6 不同治疗方法对急性骨骼肌钝挫伤小鼠血清CK含量的影响 | 第54-56页 |
3 分析与讨论 | 第56-61页 |
3.1 腺相关病毒作为骨骼肌损伤基因治疗表达载体的可行性 | 第56页 |
3.2 骨骼肌急性损伤后各组别的自然愈合过程 | 第56-57页 |
3.3 骨骼肌损伤后各组别Collagen-Ⅰ、Ⅲ mRNA的表达 | 第57-59页 |
3.4 骨骼肌损伤后各组别血清CK浓度变化 | 第59-61页 |
4 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-69页 |
攻读硕士期间公开发表的论文 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |