| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 前言 | 第10-16页 |
| 1.1 肿瘤的治疗现状 | 第10-11页 |
| 1.2 ADC药物治疗 | 第11-13页 |
| 1.3 肿瘤内皮细胞标志分子 1（TEM1）研究现状 | 第13-14页 |
| 1.4 凋亡诱导因子 (APOPTOSIS-INDUCING FACTOR，AIF)研究现状 | 第14-16页 |
| 第2章 材料与方法 | 第16-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 试剂及试剂盒 | 第16-17页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第17页 |
| 2.1.3 实验所用细胞株和质粒 | 第17页 |
| 2.2 实验所用溶液的配制 | 第17-19页 |
| 2.3 实验方法 | 第19-35页 |
| 2.3.1 TEM1的原核表达 | 第19-23页 |
| 2.3.2 重组质粒p IRES-TEM1-EGFP的构建 | 第23-28页 |
| 2.3.3 MS1-TEM1细胞系的构建 | 第28-29页 |
| 2.3.4 p ET302-Aif-T18与p ET302-Aif重组质粒的构建 | 第29页 |
| 2.3.5 p ET302-Aif-T18与p ET302-Aif蛋白的表达及纯化 | 第29-31页 |
| 2.3.6 流式细胞技术检测重组蛋白对细胞的结合能力 | 第31-33页 |
| 2.3.7 MTT技术检测重组蛋白对细胞的毒力 | 第33-35页 |
| 第3章 结果与分析 | 第35-42页 |
| 3.1 TEM1原核表达结果 | 第35-36页 |
| 3.2 TEM1阳性细胞的构建及验证 | 第36-38页 |
| 3.2.1 p CMV6-XL4与p GEM? -3Zf(-)双酶切结果 | 第36页 |
| 3.2.2 p GEM-3ZF-TEM1与PIRES-EGFP双酶切结果 | 第36-37页 |
| 3.2.3 MS1-TEM1荧光显微镜图 | 第37-38页 |
| 3.2.4 p IRES-TEM1-EGFP转染MS1和MS1-TEM1细胞Western Blot验证 | 第38页 |
| 3.3 Aif-T18融合蛋白与Aif蛋白的构建及验证 | 第38-42页 |
| 3.3.1 p ET302-Aif-T18与p ET302-Aif重组质粒的构建 | 第38-39页 |
| 3.3.2 Aif-T18融合蛋白与Aif蛋白表达、纯化及验证 | 第39-40页 |
| 3.3.3 Aif-T18融合蛋白，Aif蛋白与细胞的结合能力 | 第40-41页 |
| 3.3.4 Aif-T18融合蛋白，Aif蛋白对细胞的杀伤力 | 第41-42页 |
| 第4章 讨论 | 第42-44页 |
| 第5章 结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第49-50页 |
| 综述 | 第50-57页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
