| 提要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 引言 | 第15-17页 |
| 第一部分 肺纤维化氧化应激与中医肺系功能失调的相关性探讨 | 第17-25页 |
| 1. 肺纤维化氧化应激机制 | 第17-18页 |
| 2. 中医肺系的概念及功能 | 第18-19页 |
| 2.1 中医肺系概念 | 第18页 |
| 2.2 中医肺系的功能 | 第18-19页 |
| 3. 肺纤维化氧化应激与中医肺系功能失调关系 | 第19-22页 |
| 3.1 中医肺系与外界相通的生理特点易出现氧化应激损伤 | 第19页 |
| 3.2 中医肺系卫外功能失司易出现氧化/抗氧化失衡 | 第19-20页 |
| 3.3 中医肺系气络与肺纤维化氧化应激信号转导通路相关性 | 第20-22页 |
| 4. 结语 | 第22-23页 |
| 参考文献 | 第23-25页 |
| 第二部分 氧化应激在肺纤维化的作用及机制研究 | 第25-41页 |
| 1. 氧化应激 | 第25-27页 |
| 1.1 自由基( free radical,FR) | 第25页 |
| 1.2 活性氧(reactive oxygen species,ROS) | 第25-26页 |
| 1.3 抗氧化系统 | 第26-27页 |
| 2 氧化应激与肺纤维化 | 第27-31页 |
| 2.1 氧化应激导致肺泡上皮细胞损伤 | 第27-28页 |
| 2.2 氧化应激诱导肺泡上皮细胞凋亡 | 第28-29页 |
| 2.3 氧化应激与炎性损伤 | 第29页 |
| 2.4 氧化应激与细胞因子网络失衡 | 第29-30页 |
| 2.5 氧化应激与上皮间质转化 | 第30页 |
| 2.6 氧化应激与蛋白酶/抗蛋白酶失衡 | 第30-31页 |
| 3 肺纤维化的抗氧化药物治疗 | 第31-33页 |
| 3.1 非酶类抗氧化剂 | 第31-32页 |
| 3.2 酶类抗氧化剂 | 第32页 |
| 3.3 中草药 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-41页 |
| 第三部分 核转录因子NRF2与肺纤维化研究进展 | 第41-57页 |
| 1 NRF2-KEAP1-ARE信号通路的分子基础 | 第41-43页 |
| 1.1 Nrf2 | 第41-42页 |
| 1.2 Keap1的基本结构 | 第42-43页 |
| 1.3 ARE的基本结构 | 第43页 |
| 2 NRF2-KEAP1-ARE信号通路的激活 | 第43-46页 |
| 2.1 Nrf2的激活机制 | 第43-44页 |
| 2.2 Nrf2跨核膜转运机制 | 第44-45页 |
| 2.3 Nrf2-Keap1-ARE信号通路调节的下游抗氧化蛋白基因 | 第45-46页 |
| 2.3.1 血红素氧合酶1(HO-1) | 第45页 |
| 2.3.2 GSH | 第45-46页 |
| 2.3.3 SOD | 第46页 |
| 2.3.4 调控NAD (P)H醌氧化还原酶1 | 第46页 |
| 3 NRF2诱导剂 | 第46-47页 |
| 3.1 植物来源Nrf2诱导剂 | 第46-47页 |
| 3.2 化学合成Nrf2诱导剂 | 第47页 |
| 4 NRF2/ARE信号通路调控肺纤维化机制研究作用 | 第47-48页 |
| 4.1 抗应激作用 | 第47-48页 |
| 4.2 抗凋亡作用 | 第48页 |
| 4.3 抗炎症作用 | 第48页 |
| 5 中药激活NRF2/ARE通路治疗肺纤维化的研究现状 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 第四部分 MRC-5细胞氧化应激模型的构建及海藻多糖最佳作用浓度选择 | 第57-75页 |
| 1. 材料 | 第57-59页 |
| 1.1 细胞信息 | 第57页 |
| 1.2 主要耗材、试剂 | 第57-58页 |
| 1.3 主要仪器与设备 | 第58-59页 |
| 2 实验方法 | 第59-67页 |
| 2.1 细胞培养 | 第59页 |
| 2.2 细胞传代 | 第59页 |
| 2.3 细胞冻存 | 第59-60页 |
| 2.4 MTT法检测细胞增殖 | 第60页 |
| 2.5 Real-time PCR法检测基因表达 | 第60-62页 |
| 2.6 生化法检测ROS含量 | 第62-64页 |
| 2.7 IF法检测蛋白表达 | 第64页 |
| 2.8 Western Blotting检测蛋白表达 | 第64-67页 |
| 3 统计学分析 | 第67页 |
| 4 实验结果及分析 | 第67-74页 |
| 4.1 不同浓度的H2O2作用于MRC-5细胞不同时间对细胞损伤的影响 | 第67-70页 |
| 4.2 海藻多糖最佳有效药物作用浓度的选择 | 第70-74页 |
| 5. 实验结论 | 第74-75页 |
| 第五部分 海藻多糖对H2O2诱导MRC-5细胞氧化损伤保护作用 | 第75-89页 |
| 1. 材料 | 第75-77页 |
| 1.1 细胞信息 | 第75页 |
| 1.2 主要耗材、试剂 | 第75-76页 |
| 1.3 主要仪器与设备 | 第76-77页 |
| 2 实验方法 | 第77-85页 |
| 2.1 细胞培养 | 第77页 |
| 2.2 细胞传代 | 第77页 |
| 2.3 细胞冻存 | 第77-78页 |
| 2.4 Real-time PCR法检测基因表达 | 第78-80页 |
| 2.5 IF法检测蛋白表达 | 第80页 |
| 2.6 丙二醛(MDA)检测 | 第80-81页 |
| 2.7 超氧化物歧化酶(SOD)检测 | 第81页 |
| 2.8 血清过氧化氢酶(CAT)检测 | 第81-82页 |
| 2.9 微量还原型谷胱甘肽(GSH)检测 | 第82页 |
| 2.10 Western Blotting检测蛋白表达 | 第82-85页 |
| 3. 统计学分析 | 第85页 |
| 4. 实验结果及分析 | 第85-88页 |
| 4.1 细胞生化检测各组SOD、CAT活力和MDA、GSH的表达 | 第85-86页 |
| 4.2 RT-PCR法检测各组CGLC、HO-1、keap1、NQO1、Nrf2的表达 | 第86-87页 |
| 4.3 免疫荧光法检测各组Nrf2的表达 | 第87-88页 |
| 5. 实验结论 | 第88-89页 |
| 第六部分 海藻多糖激活NRF2/ARE信号通路对过氧化氢致MRC-5细胞氧化应激损伤保护作用 | 第89-106页 |
| 1. 材料 | 第89-91页 |
| 1.1 细胞信息 | 第89页 |
| 1.2 主要耗材、试剂 | 第89-90页 |
| 1.3 主要仪器与设备 | 第90-91页 |
| 2 实验方法 | 第91-99页 |
| 2.1 细胞培养 | 第91页 |
| 2.2 细胞传代 | 第91页 |
| 2.3 细胞冻存 | 第91-92页 |
| 2.4. 转染siRNA | 第92页 |
| 2.5 转染质粒 | 第92页 |
| 2.6 Real-time PCR法检测基因表达 | 第92-94页 |
| 2.7 丙二醛(MDA)检测 | 第94-95页 |
| 2.8 超氧化物歧化酶(SOD)检测 | 第95-96页 |
| 2.9 血清过氧化氢酶(CAT)检测 | 第96页 |
| 2.10 微量还原型谷胱甘肽(GSH)检测 | 第96页 |
| 2.11 Western Blotting检测蛋白表达 | 第96-99页 |
| 3. 统计学分析 | 第99页 |
| 4. 实验结果及分析 | 第99-105页 |
| 4.1 靶向沉默Nrf2基因及下游相关指标表达情况 | 第99-103页 |
| 4.2 质粒过表达载体的构建及下游相关指标的表达 | 第103-105页 |
| 5. 实验结论 | 第105-106页 |
| 讨论 | 第106-112页 |
| 参考文献 | 第110-112页 |
| 结论 | 第112-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 查新报告 | 第115-126页 |
| 发表论文 | 第126-132页 |
