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棒孢叶斑病菌胁迫下黄瓜叶片差异蛋白质组学研究

摘要第10-11页
Abstract第11-12页
第一章 前言第13-22页
    1.1 黄瓜棒孢叶斑病概况第13-15页
        1.1.1 黄瓜棒孢叶斑病概况第13页
        1.1.2 棒孢叶斑病的发病规律及症状第13页
        1.1.3 黄瓜棒孢叶斑病的防治第13-14页
        1.1.4 棒孢叶斑病抗性机制的研究第14-15页
    1.2 活性氧与植物抗病性第15-18页
        1.2.1 活性氧的种类与爆发第15-16页
        1.2.2 活性氧的检测方法第16页
        1.2.3 活性氧在植物和微生物互作中的作用第16-18页
    1.3 标记定量蛋白质组学技术第18-20页
    1.4 基于ITRAQ技术的蛋白质组学研究在植物响应生物胁迫方面的应用第20-21页
    1.5 本研究的目的与意义第21-22页
第二章 棒孢叶斑病菌胁迫下黄瓜叶片木质素沉积及活性氧爆发的组织化学研究第22-29页
    2.1 试验材料与方法第22-24页
        2.1.1 试验仪器与试剂第22页
        2.1.2 试剂配制第22-23页
        2.1.3 试验材料第23页
        2.1.4 棒孢叶斑病菌的活化与接种第23页
        2.1.5 木质素组织化学染色第23-24页
        2.1.6 DAB染色第24页
        2.1.7 NBT染色第24页
    2.2 结果与分析第24-28页
        2.2.1 棒孢叶斑病菌接种后植株的发病情况第24-25页
        2.2.2 病原菌处理后黄瓜叶片活性氧含量的变化第25-27页
        2.2.3 棒孢叶斑病菌接种后叶片木质素含量的变化第27-28页
    2.3 讨论与结论第28-29页
第三章 棒孢叶斑病菌胁迫下黄瓜叶片差异蛋白质组学分析第29-50页
    3.1 试验材料与方法第29-35页
        3.1.1 试验仪器与试剂第29页
        3.1.2 试剂配制第29-30页
        3.1.3 试验材料第30页
        3.1.4 黄瓜叶片蛋白质样品的制备第30页
        3.1.5 蛋白浓度测定第30-31页
        3.1.6 SDS-PAGE电泳第31页
        3.1.7 蛋白质的酶解和定量第31-32页
        3.1.8 肽段的标记第32页
        3.1.9 肽段的SCX分级第32-33页
        3.1.10 高效液相色谱分离第33页
        3.1.11 质谱鉴定第33页
        3.1.12 数据分析第33-35页
    3.2 结果与分析第35-40页
        3.2.1 SDS-PAGE电泳第35页
        3.2.2 定量比值直方分布分析第35-36页
        3.2.3 蛋白质鉴定结果第36-37页
        3.2.4 生物信息学分析第37-40页
    3.3 讨论与结论第40-50页
        3.3.1 不同时间点黄瓜叶片蛋白质组的变化情况第40-41页
        3.3.2 防御相关蛋白第41-42页
        3.3.3 信号及胁迫应答相关蛋白第42-44页
        3.3.4 细胞代谢相关蛋白第44-47页
        3.3.5 氧化还原相关蛋白第47-48页
        3.3.6 生物调控及运输相关蛋白第48-49页
        3.3.7 其他蛋白第49-50页
第四章 实时荧光定量PCR检测蛋白质的基因表达情况第50-58页
    4.1 试验材料与方法第50-52页
        4.1.1 试验仪器第50页
        4.1.2 试验材料第50-51页
        4.1.3 黄瓜叶片RNA的提取方法第51页
        4.1.4 反转录合成第一链cDNA第51页
        4.1.5 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第51-52页
    4.2 结果与分析第52-57页
        4.2.1 总RNA琼脂糖凝胶电泳检测第52-53页
        4.2.2 实时荧光定量PCR的特异性第53页
        4.2.3 黄瓜叶片中差异表达蛋白相应基因的表达情况第53-57页
    4.3 讨论与结论第57-58页
参考文献第58-70页
附录第70-94页
致谢第94-95页
攻读硕士学位期间发表文章第95页

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