中文摘要 | 第12-13页 |
英文摘要 | 第13-14页 |
前言 | 第15-24页 |
1 高尿酸血症肾病概述 | 第15-21页 |
1.1 高尿酸血症 | 第15-16页 |
1.2 高尿酸血症肾病的发生机制 | 第16-20页 |
1.3 治疗高尿酸血症肾病现有的方法 | 第20-21页 |
2 牛磺酸概述 | 第21-23页 |
2.1 牛磺酸及其作用 | 第21-22页 |
2.2 牛磺酸与肾脏的关系及研究现状 | 第22-23页 |
3 研究的目的和意义 | 第23-24页 |
1 材料和方法 | 第24-42页 |
1.1 试验材料 | 第24-26页 |
1.1.1 试验动物 | 第24页 |
1.1.2 日粮 | 第24页 |
1.1.3 饲养管理 | 第24页 |
1.1.4 试验药品及试剂 | 第24-25页 |
1.1.5 主要仪器 | 第25-26页 |
1.2 试验方法 | 第26-27页 |
1.2.1 试验设计及动物模型的制备 | 第26-27页 |
1.2.2 样本的采集及制备 | 第27页 |
1.3 基本检测指标与方法 | 第27-30页 |
1.3.1 大鼠临床表现观察 | 第27页 |
1.3.2 肾脏指数的测定 | 第27页 |
1.3.3 肾脏组织学检查 | 第27-30页 |
1.3.4 图像分析 | 第30页 |
1.4 肾脏功能相关的生化指标检测 | 第30-31页 |
1.4.1 尿酸(UA)测定操作步骤 | 第30页 |
1.4.2 尿素氮(BUN)测定操作步骤 | 第30页 |
1.4.3 肌酐(Cr)测定操作步骤 | 第30-31页 |
1.4.4 尿蛋白总量(Urine protein)测定操作步骤 | 第31页 |
1.5 一氧化氮合酶及一氧化氮检测 | 第31-32页 |
1.5.1 一氧化氮合酶(NOS)测定操作步骤 | 第31-32页 |
1.5.2 一氧化氮(NO)测定操作步骤 | 第32页 |
1.6 抗氧化能力检测 | 第32-33页 |
1.6.1 总抗氧化能力(T-AOC)测定操作步骤 | 第32页 |
1.6.2 超氧化物歧化酶(SOD)测定操作步骤 | 第32-33页 |
1.6.3 丙二醛(MDA)测定操作步骤 | 第33页 |
1.7 PCR法检测尿酸排泄相关基因表达 | 第33-36页 |
1.7.1 引物的设计与合成 | 第33页 |
1.7.2 肾脏组织总RNA的提取 | 第33-34页 |
1.7.3 总RNA纯度分析 | 第34页 |
1.7.4 总RNA的反转录 | 第34-35页 |
1.7.5 PCR反应 | 第35页 |
1.7.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第35-36页 |
1.7.7 测序 | 第36页 |
1.8 大鼠URAT1、UAT、MRP4基因表达水平的荧光定量检测与分析 | 第36-37页 |
1.8.1 RT-PCR退火温度的确定 | 第36页 |
1.8.2 RT-PCR检测 | 第36-37页 |
1.9 Western Blot检测大鼠URAT1、MRP4蛋白在肾脏中的表达 | 第37-42页 |
1.9.1 大鼠肾脏总蛋白的提取 | 第37页 |
1.9.2 Bradford法蛋白浓度的测定 | 第37-38页 |
1.9.3 Western Blot检测 | 第38-41页 |
1.9.4 数据处理及统计学分析 | 第41-42页 |
2 结果 | 第42-54页 |
2.1 临床表现观察 | 第42页 |
2.2 肾脏病理解剖学变化 | 第42页 |
2.3 大鼠肾组织光镜检查 | 第42-43页 |
2.4 牛磺酸对大鼠肾脏指数及病变积分的影响 | 第43-45页 |
2.5 牛磺酸对大鼠肾脏功能相关的生化指标的检测 | 第45-46页 |
2.6 牛磺酸对一氧化氮合酶及一氧化氮的影响 | 第46-47页 |
2.7 牛磺酸对抗氧化能力的影响 | 第47-48页 |
2.8 PCR检测结果 | 第48-50页 |
2.8.1 大鼠肾脏中总RNA的提取结果 | 第48-49页 |
2.8.2 URAT1基因测序结果 | 第49页 |
2.8.3 UAT基因测序结果 | 第49-50页 |
2.8.4 MRP4基因测序结果 | 第50页 |
2.9 URAT1、UAT、MRP4基因表达水平的荧光定量检测结果 | 第50-52页 |
2.9.1 大鼠肾脏URAT1、UAT、MRP4实时荧光定量PCR扩增曲线和溶解曲线 | 第50-51页 |
2.9.2 大鼠肾脏URAT1、UAT、MRP4相对表达量 | 第51-52页 |
2.10 牛磺酸对大鼠肾脏尿酸排泄相关蛋白相对表达量的影响 | 第52-54页 |
3 讨论 | 第54-60页 |
3.1 牛磺酸对大鼠高尿酸血症肾病模型肾脏结构和功能的影响 | 第54-55页 |
3.1.1 牛磺酸对大鼠高尿酸血症肾病模型肾脏结构的作用 | 第54页 |
3.1.2 牛磺酸对大鼠高尿酸血症肾病模型肾功能的作用探讨 | 第54-55页 |
3.2 牛磺酸对大鼠高尿酸血症肾病模型一氧化氮水平及抗氧化能力的影响 | 第55-57页 |
3.2.1 牛磺酸对大鼠高尿酸血症肾病模型一氧化氮水平探讨 | 第55-56页 |
3.2.2 牛磺酸对大鼠高尿酸血症肾病模型抗氧化能力及氧化应激探讨 | 第56-57页 |
3.3 牛磺酸对高尿酸血症肾病大鼠模型尿酸排泄相关基因的影响 | 第57-60页 |
3.3.1 牛磺酸对尿酸盐阴离子转运体1(URAT1)的影响 | 第57-58页 |
3.3.2 牛磺酸对尿酸转运蛋白(UAT)的影响 | 第58-59页 |
3.3.3 牛磺酸对多药耐药蛋白4(MRP4)的影响 | 第59-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
附录 | 第65-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
攻读学位论文期间发表文章 | 第68页 |