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红麻UG93细胞质雄性不育相关基因的筛选、克隆及表达分析

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
1 前言第12-18页
    1.1 植物细胞质雄性不育概述第12页
    1.2 线粒体基因组与CMS的关系第12-14页
        1.2.1 线粒体基因组结构第12-13页
        1.2.2 线粒体基因重排与CMS第13-14页
        1.2.3 线粒体基因RNA编辑和CMS关系第14页
    1.3 线粒体能量代谢与CMS第14-15页
    1.4 植物CMS机理研究进展第15-16页
    1.5 红麻细胞质雄性不育机理研究进展第16-17页
    1.6 本研究的目的和意义第17-18页
2 材料与方法第18-31页
    2.1 实验材料第18-19页
        2.1.1 材料第18页
        2.1.2 实验仪器第18页
        2.1.3 实验试剂第18-19页
    2.2 实验方法第19-31页
        2.2.1 红麻DNA的提取第19-20页
        2.2.2 红麻RNA的提取及反转录第20-21页
        2.2.3 DNA和cDNA的PCR扩增、回收第21-24页
        2.2.4 目的片段克隆、测序第24-25页
        2.2.5 线粒体基因RNA编辑频率分析第25页
        2.2.6 线粒体基因相对表达量第25-26页
        2.2.7 Northern Blot分析第26-29页
        2.2.8 红麻ATP含量测定第29页
        2.2.9 红麻线粒体复合体V活性测定第29-31页
3 结果与分析第31-89页
    3.1 DNA、RNA以及cDNA的检测第31-32页
        3.1.1 DNA、RNA样品的质量第31页
        3.1.2 cDNA样品的质量第31-32页
    3.2 红麻UG93细胞质雄性不育相关候选基因的克隆第32-73页
        3.2.1 复合体ⅠNADH脱氢酶基因(nad3、nad4L、nad6、nad9)克隆分析第32-42页
        3.2.2 复合体Ⅱ基因(sdh4)克隆分析第42-45页
        3.2.3 复合体Ⅲ基因(cob)克隆分析第45-48页
        3.2.4 复合体Ⅴ基因(atpl、atp4克隆分析第48-55页
        3.2.5 核糖体蛋白基因(rps12、rps14、rpl5、rpl10)克隆分析第55-64页
        3.2.6 细胞色素C生物起源相关的基因(ccmb、ccmc)及matR的克隆分析第64-73页
    3.3 不育系UG93A及其保持系UG93B RNA编辑比较第73-83页
        3.3.1 nad9基因的RNA编辑分析第73-74页
        3.3.2 cob基因的RNA编辑分析第74-76页
        3.3.3 atp1基因的RNA编辑分析第76-77页
        3.3.4 atp4基因的RNA编辑分析第77-78页
        3.3.5 rpl5基因的RNA编辑分析第78-80页
        3.3.6 rpl10基因的RNA编辑分析第80-81页
        3.3.7 matR基因的RNA编辑分析第81-83页
    3.4 不育系UG93A及其保持系UG93B序列差异基因荧光定量分析第83-87页
        3.4.1 nad9基因荧光定量分析第83-84页
        3.4.2 sdh4基因荧光定量分析第84页
        3.4.3 cob基因荧光定量分析第84-85页
        3.4.4 atp1基因荧光定量分析第85页
        3.4.5 atp4基因荧光定量分析第85页
        3.4.6 rps14基因荧光定量分析第85-86页
        3.4.7 rpl5基因荧光定量分析第86页
        3.4.8 rpl10基因荧光定量分析第86页
        3.4.9 matR基因荧光定量分析第86-87页
    3.5 atp4基因Northern Blot分析第87页
    3.6 复合体V(ATP合成酶)活性测定第87-88页
    3.7 红麻花药ATP含量测定第88-89页
4 结论与讨论第89-94页
    4.1 讨论第89-92页
        4.1.1 红麻线粒体基因CDS区与CMS关系第89页
        4.1.2 红麻RNA编辑特点与CMS关系第89-90页
        4.1.3 不同胞质中红麻线粒体基因的差异表达第90-91页
        4.1.4 线粒体能量代谢基因atp4与红麻CMS的关系第91页
        4.1.5 线粒体能量代谢与红麻CMS的关系第91-92页
    4.2 结论第92页
    4.3 创新点第92页
    4.4 问题与展望第92-94页
参考文献第94-102页
附录第102-104页
致谢第104-105页
攻读学位期间发表论文情况第105页

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