| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 绪论 | 第13-26页 |
| 1.1 聚合物-蛋白质偶联技术的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 聚合物-蛋白质偶联物的制备策略 | 第14-21页 |
| 1.2.1 “Grafting to”策略 | 第15-18页 |
| 1.2.2 “Grafting from”策略 | 第18-21页 |
| 1.3 聚合物对蛋白质的活性调控 | 第21-23页 |
| 1.3.1 PEG类偶联物 | 第21页 |
| 1.3.2 刺激响应性偶联物 | 第21-22页 |
| 1.3.3 仿生型偶联物 | 第22-23页 |
| 1.4 聚合物-蛋白质偶联物的应用 | 第23页 |
| 1.5 课题的提出 | 第23-26页 |
| 1.5.1 研究目的及意义 | 第23-25页 |
| 1.5.2 研究内容及实验方案 | 第25-26页 |
| 第2章 温度响应性聚合物对蛋白质热稳定性的研究 | 第26-41页 |
| 2.1 引言 | 第26-27页 |
| 2.2 实验部分 | 第27-34页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第28-29页 |
| 2.2.3 构建K148C PPase突变体 | 第29-30页 |
| 2.2.4 NIPAM的RAFT聚合 | 第30页 |
| 2.2.5 PNIPAM的吡啶二硫酯功能化 | 第30-31页 |
| 2.2.6 聚合物的表征 | 第31-32页 |
| 2.2.7 PNIPAM-PPase偶联物的制备 | 第32页 |
| 2.2.8 低临界共溶温度（LCST）的测定 | 第32页 |
| 2.2.9 自由巯基密度 | 第32-33页 |
| 2.2.10 PPase及偶联物的活性测定 | 第33-34页 |
| 2.2.11 蛋白质及偶联物的活性温度曲线以及热稳定性的测定 | 第34页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第34-40页 |
| 2.3.1 PNIPAM的合成以及偶联物的制备 | 第34-38页 |
| 2.3.2 偶联物的活性温度曲线 | 第38-39页 |
| 2.3.3 偶联物的热稳定性研究 | 第39-40页 |
| 2.4 本章小结 | 第40-41页 |
| 第3章 偶联物增强的聚合酶链反应 | 第41-48页 |
| 3.1 前言 | 第41-42页 |
| 3.2 实验部分 | 第42-45页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第42页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第42-43页 |
| 3.2.3 PNIPAM-PPase增强PCR | 第43-44页 |
| 3.2.4 PCR扩增 | 第44页 |
| 3.2.5 PNIPAM-PPase在不同扩增条件下的稳定性研究 | 第44-45页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第45-46页 |
| 3.4 本章小结 | 第46-48页 |
| 第4章 糖聚物对蛋白质在复杂环境下的稳定性研究 | 第48-65页 |
| 4.1 前言 | 第48-49页 |
| 4.2 实验部分 | 第49-55页 |
| 4.2.1 材料与试剂 | 第49-50页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第50-51页 |
| 4.2.3 N124C PPase突变体的构建 | 第51页 |
| 4.2.4 甲基丙烯酰胺葡萄糖（MAG）的合成 | 第51页 |
| 4.2.5 MAG的RAFT聚合 | 第51-52页 |
| 4.2.6 PMAG的吡啶二硫酯功能化 | 第52页 |
| 4.2.7 聚合物的表征 | 第52-53页 |
| 4.2.8 PMAG-PPase偶联物的制备 | 第53页 |
| 4.2.9 自由巯基密度 | 第53页 |
| 4.2.10 PPase及偶联物的活性测定 | 第53页 |
| 4.2.11 蛋白质及偶联物稳定性的测定 | 第53-54页 |
| 4.2.12 PMAG-PPase水解焦磷酸钙（CPP）实验 | 第54-55页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第55-64页 |
| 4.3.1 糖聚物的合成以及偶联物的制备 | 第55-58页 |
| 4.3.2 糖聚物的修饰对PPase的活性影响 | 第58-59页 |
| 4.3.3 偶联物在不同p H值下的活性变化 | 第59-60页 |
| 4.3.4 偶联物在高盐溶液中稳定性情况 | 第60-61页 |
| 4.3.5 偶联物抗蛋白酶水解效果的研究 | 第61-62页 |
| 4.3.6 偶联物耐糖苷酶糖解效果的研究 | 第62-63页 |
| 4.3.7 偶联物催化焦磷酸钙（CPP）水解效果的研究 | 第63-64页 |
| 4.4 本章小结 | 第64-65页 |
| 第5章 论文总结与展望 | 第65-68页 |
| 5.1 论文总结 | 第65-66页 |
| 5.2 展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-77页 |
| 硕士论文工作期间科研成果 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
