| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 引言 | 第17-32页 |
| 1.1 研究背景 | 第17-19页 |
| 1.1.1 我国农林害虫发生与防治现状 | 第17页 |
| 1.1.2 实蝇类害虫的危害及其防控技术 | 第17-19页 |
| 1.2 转基因昆虫技术对SIT的改进策略及研究进展 | 第19-28页 |
| 1.2.1 转基因昆虫技术及其应用 | 第19-21页 |
| 1.2.2 传统SIT技术的应用及其限制性 | 第21-22页 |
| 1.2.3 转基因昆虫不育技术对传统SIT的改进策略与研究进展 | 第22-27页 |
| 1.2.4 转基因昆虫的适应性评价 | 第27页 |
| 1.2.5 转基因昆虫的安全性评估及相关法规政策 | 第27-28页 |
| 1.3 桔小实蝇概述 | 第28-29页 |
| 1.4 桔小实蝇遗传控制技术项目的目标、意义和研究策略 | 第29-30页 |
| 1.5 本研究的目的、意义和主要内容 | 第30-32页 |
| 1.5.1 本研究目的及意义 | 第30-31页 |
| 1.5.2 主要研究内容与方法 | 第31-32页 |
| 第二章 桔小实蝇母体效应基因的克隆与分析 | 第32-53页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 2.1.1 供试虫源 | 第32-33页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第33页 |
| 2.1.3 主要仪器及设备 | 第33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-39页 |
| 2.2.1 目的基因中间片段的获取与验证 | 第33-36页 |
| 2.2.2 3’RACE和 5’RACE克隆目的基因 3’端和 5’端cDNA序列 | 第36-38页 |
| 2.2.3 目的基因序列分析 | 第38-39页 |
| 2.3 结果与分析 | 第39-50页 |
| 2.3.1 桔小实蝇nanos基因分析 | 第39-43页 |
| 2.3.2 桔小实蝇vasa基因分析 | 第43-47页 |
| 2.3.3 桔小实蝇hunchback基因分析 | 第47-50页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第50-53页 |
| 2.4.1 各基因的克隆及后续需开展的工作 | 第50-51页 |
| 2.4.2 各基因结构及其在胚胎发育中的作用 | 第51-53页 |
| 第三章 桔小实蝇胚胎致死系统和雄虫不育系统中所需驱动载体的构建 | 第53-62页 |
| 3.1 实验材料 | 第53-54页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第53页 |
| 3.1.2 主要仪器及设备 | 第53-54页 |
| 3.2 实验方法 | 第54-59页 |
| 3.2.1 桔小实蝇nanos和 β2-tubulin基因启动子的克隆及分析 | 第54-56页 |
| 3.2.2 驱动载体的构建策略与步骤 | 第56-59页 |
| 3.3 结果与分析 | 第59-61页 |
| 3.3.1 桔小实蝇 β2-tubulin基因上游调控区的克隆与分析 | 第59-60页 |
| 3.3.2 桔小实蝇nanos基因上游调控区的克隆与分析 | 第60-61页 |
| 3.3.3 驱动载体的构建 | 第61页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第61-62页 |
| 第四章 桔小实蝇条件致死系统所需效应载体的构建 | 第62-68页 |
| 4.1 实验材料 | 第62-63页 |
| 4.1.1 所需质粒 | 第62-63页 |
| 4.1.2 主要试剂与仪器 | 第63页 |
| 4.2 实验方法 | 第63-66页 |
| 4.2.1 桔小实蝇hid基因的磷酸化位点分析及定点突变 | 第63-64页 |
| 4.2.2 效应载体的构建策略与步骤 | 第64-66页 |
| 4.3 结果与分析 | 第66-67页 |
| 4.3.1 桔小实蝇hid基因的磷酸化位点分析及其突变 | 第66-67页 |
| 4.3.2 效应载体的构建 | 第67页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第67-68页 |
| 第五章 桔小实蝇精子荧光标记品系所需载体的构建 | 第68-74页 |
| 5.1 实验材料 | 第68页 |
| 5.1.1 所需质粒 | 第68页 |
| 5.1.2 主要试剂与仪器 | 第68页 |
| 5.2 实验方法 | 第68-73页 |
| 5.2.1 精子红色荧光标记载体的构建 | 第68-71页 |
| 5.2.2 精子绿色荧光标记载体的构建 | 第71-73页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第73-74页 |
| 第六章 桔小实蝇性别决定基因TRANSFORMER和TRANSFORMER-2 的克隆与分析 | 第74-86页 |
| 6.1 实验材料 | 第75页 |
| 6.2 实验方法 | 第75-77页 |
| 6.2.1 目的基因中间片段的获得 | 第75-76页 |
| 6.2.2 目的基因全长cDNA的获得及剪切类型检测 | 第76页 |
| 6.2.3 目的基因内含子的扩增 | 第76-77页 |
| 6.3 结果与分析 | 第77-84页 |
| 6.3.1 桔小实蝇transformer基因的克隆和分析 | 第77-80页 |
| 6.3.2 桔小实蝇transformer-2 基因分析 | 第80-84页 |
| 6.4 小结与讨论 | 第84-86页 |
| 6.4.1 tra和tra-2 基因与转基因昆虫不育技术 | 第84页 |
| 6.4.2 昆虫性别决定机制及tra和tra-2 基因的功能与进化 | 第84-86页 |
| 第七章 地中海实蝇胚胎条件致死品系所需驱动品系的构建 | 第86-93页 |
| 7.1 实验材料 | 第86-87页 |
| 7.1.1 实验昆虫 | 第86页 |
| 7.1.2 实验材料与仪器设备 | 第86-87页 |
| 7.2 实验方法 | 第87-90页 |
| 7.2.1 早期胚胎显微注射及饲养 | 第87-89页 |
| 7.2.2 杂交处理与荧光筛选 | 第89-90页 |
| 7.3 结果与分析 | 第90-91页 |
| 7.3.1 品系构建结果 | 第90页 |
| 7.3.2 AH437载体分析 | 第90-91页 |
| 7.4 小结与讨论 | 第91-93页 |
| 第八章 结论与展望 | 第93-95页 |
| 8.1 结论 | 第93-94页 |
| 8.2 展望 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 作者简历 | 第106-108页 |
