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彩色马铃薯试管薯诱导及遗传转化研究

致谢第6-7页
摘要第7-8页
Abstract第8-9页
目次第11-15页
第一章 引言第15-38页
    1 植物遗传转化的历史及研究现状第16-22页
        1.1 植物转基因方法第16-19页
            1.1.1 直接转化法第17页
            1.1.2 农杆菌介导转化法第17-18页
            1.1.3 基因枪法第18-19页
        1.2 植物转基因技术存在的问题第19-21页
            1.2.1 基因型的依赖性第19页
            1.2.2 宿主范围的限制第19-20页
            1.2.3 转化效率低且可重复性差第20页
            1.2.4 转基因植物的安全性第20-21页
        1.3 植物转基因技术的发展前景第21-22页
    2 马铃薯生物技术研究进展第22-27页
        2.1 组织培养技术第22-23页
            2.1.1 脱毒种苗第22页
            2.1.2 微型种薯生产第22-23页
        2.2 转基因技术在马铃薯产业中的应用第23-27页
            2.2.1 抗真菌、细菌第23-24页
            2.2.2 抗病毒第24-25页
            2.2.3 抗虫第25页
            2.2.4 抗逆性第25页
            2.2.5 品质改良第25-26页
            2.2.6 作为生物反应器第26-27页
    3 西罗血红素研究第27-36页
        3.1 生物体内卟啉类辅助因子的合成第29-31页
        3.2 不同生物体内合成西罗血红素(siroheme)的相关基因第31-35页
            3.2.1 巨大芽孢杆菌第32-33页
            3.2.2 拟南芥第33-34页
            3.2.3 酵母菌第34页
            3.2.4 大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌第34-35页
        3.3 讨论与展望第35-36页
    4 本论文研究的目的及意义第36-38页
第二章 彩色马铃薯试管薯繁育的影响因子研究第38-49页
    1 材料与方法第38-40页
        1.1 实验材料第38页
        1.2 实验方法第38-40页
            1.2.1 外植体消毒第38页
            1.2.2 试管苗壮苗第38-39页
            1.2.3 不同因子对试管薯诱导的影响第39-40页
            1.2.4 试管薯种植第40页
    2 结果与分析第40-46页
        2.1 消毒方式对无菌苗体系建立的影响第40-41页
        2.2 不同壮苗方式对壮苗效果的影响第41-42页
        2.3 不同培养基对试管薯诱导效果的影响第42-43页
        2.4 不同温度对试管薯片诱导效果的比较第43页
        2.5 不同光照对试管薯诱导的影响第43-44页
        2.6 不同催芽方式对试管薯种植的影响第44-46页
    3 讨论第46-49页
        3.1 消毒剂第46页
        3.2 试管苗壮苗情况第46页
        3.3 外源激素第46-47页
        3.4 温度第47页
        3.5 光照第47-48页
        3.6 催芽方式第48-49页
第三章 农杆菌介导的马铃薯遗传转化体系的建立第49-71页
    1 材料与方法第49-57页
        1.1 实验材料第49页
        1.2 实验试剂第49-50页
        1.3 GFP::UPM1融合蛋白基因的构建及洋葱表皮细胞表达第50-51页
            1.3.1 GFP基因目的片段的获得第50页
            1.3.2 UPM1基因目的片段的获得第50页
            1.3.3 GFP::UPM1融合目的片段的获得第50-51页
            1.3.4 GFP::UPM1融合蛋白基因在洋葱表皮细胞的瞬时表达第51页
        1.4 含目的基因的大肠杆菌菌株的获得第51-52页
            1.4.1 DH5α感受态细胞的制备第51-52页
            1.4.2 DH5α感受态细胞的质粒转化第52页
        1.5 含目的基因的农杆菌菌株的获得第52-53页
            1.5.1 EHA105感受态细胞的制备第52页
            1.5.2 EHA105感受态细胞的质粒转化第52-53页
        1.6 质粒DNA的小量提取第53页
        1.7 农杆菌阳性克隆的鉴定第53页
        1.8 根癌农杆菌介导的马铃薯转GFP::UPM1研究第53-56页
            1.8.1 转化受体的获取及激素配比第53-55页
            1.8.2 预培养时间对马铃薯遗传转化的影响第55页
            1.8.3 农杆菌菌液浓度及侵染时间对遗传转化的影响第55页
            1.8.4 共培养时间对遗传转化的影响第55页
            1.8.5 抑菌抗生素浓度的筛选第55页
            1.8.6 马铃薯对潮霉素(Hygromycin B,HmB)的敏感性检测第55-56页
        1.9 转化植株的分子检测第56-57页
            1.9.1 CTAB法提取马铃薯转化植株基因组DNA第56页
            1.9.2 转基因植株PCR检测第56-57页
        1.10 转基因株系共聚焦显微镜观察及统计分析第57页
    2 结果和分析第57-67页
        2.1 GFP::UPM1融合蛋白基因第57-58页
        2.2 阳性克隆EHA105菌株的获得第58-59页
        2.3 不同激素组合对马铃薯再生体系的影响第59-61页
        2.4 预培养时间对转化效率的影响第61-62页
        2.5 农杆菌菌液浓度及侵染时间对遗传转化的影响第62-63页
        2.6 共培养时间对遗传转化的影响第63-64页
        2.7 抑菌抗生素浓度的确定第64-65页
        2.8 马铃薯对潮霉素的本底抗性筛选第65页
        2.9 转基因植株的获得及PCR检测第65-67页
        2.10 转基因株系激光共聚焦显微镜观察及统计分析第67页
    3 讨论第67-71页
第四章 主要结论与展望第71-73页
参考文献第73-81页
个人简历第81页
硕士期间科研成果第81页

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