英文缩略词表 | 第3-4页 |
中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第11-21页 |
1 | 第11-18页 |
1.1 缺氧与高原反应 | 第11页 |
1.2 HIF-α和Nrf2的研究进展 | 第11-13页 |
1.3 初级纤毛的结构 | 第13-14页 |
1.4 初级纤毛的发生与解体 | 第14-15页 |
1.5 影响初级纤毛长度的因素 | 第15-16页 |
1.6 初级纤毛在部分信号通路中的作用 | 第16-17页 |
1.7 初级纤毛与缺氧的相关性 | 第17-18页 |
2 立题依据与技术路线 | 第18-21页 |
2.1 立题依据 | 第18-21页 |
第二章 缺氧对PC12细胞初级纤毛长度及发生率的影响 | 第21-29页 |
2.1 材料与方法 | 第22页 |
2.1.1 实验材料与试剂 | 第22页 |
2.1.2 实验仪器 | 第22页 |
2.2 方法 | 第22-24页 |
2.2.1 PC12细胞培养与形态学观察 | 第22页 |
2.2.2 PC12细胞的物理性缺氧处理 | 第22-23页 |
2.2.3 PC12细胞的氯化钴模拟化学性缺氧处理 | 第23页 |
2.2.4 免疫荧光染色法观察缺氧前后PC12细胞初级纤毛长度及发生率 | 第23页 |
2.2.5 统计学处理 | 第23-24页 |
2.3 结果 | 第24-27页 |
2.3.1 缺氧后PC12细胞的形态变化 | 第24-25页 |
2.3.2 缺氧环境下初级纤毛发生率的变化 | 第25-26页 |
2.3.3 缺氧培养前后初级纤毛长度的变化 | 第26-27页 |
2.4 讨论 | 第27-28页 |
2.5 结论 | 第28-29页 |
第三章 缺氧状态下PC12细胞抗氧化活性的变化 | 第29-40页 |
3.1 材料 | 第30页 |
3.1.1 实验材料 | 第30页 |
3.1.2 试剂与仪器 | 第30页 |
3.2 方法 | 第30-32页 |
3.2.1 免疫荧光染色法观察缺氧前后胞内HIF-1α、HIF-2α及Nrf2核转位情况 | 第30-31页 |
3.2.2 RT-PCR法检测缺氧培养前后PC12细胞内HIF-1α、Nrf2、VEGF及SOD基因表达水平的变化情况 | 第31页 |
3.2.3 WesternBlot法检测缺氧培养前后PC12细胞内HIF-1α、Nrf2、VEGF及SOD蛋白表达水平的变化 | 第31-32页 |
3.2.4 统计学处理 | 第32页 |
3.3 结果 | 第32-39页 |
3.3.1 缺氧前后HIF-1α、HIF-2α及Nrf2发生核转位情况 | 第32-34页 |
3.3.2 缺氧培养对缺氧相关因子基因表达的影响 | 第34-37页 |
3.3.3 缺氧培养对缺氧相关因子蛋白表达的影响 | 第37-39页 |
3.4 讨论 | 第39-40页 |
第四章 初级纤毛对PC12细胞在缺氧状态下抗氧化活性的影响 | 第40-62页 |
4.1 实验材料 | 第41-42页 |
4.1.1 材料及试剂 | 第41页 |
4.1.2 抗体 | 第41-42页 |
4.2 方法 | 第42-44页 |
4.2.1 细胞培养及缺氧培养 | 第42页 |
4.2.2 siRNA法干扰初级纤毛发生。 | 第42页 |
4.2.3 免疫荧光染色 | 第42-43页 |
4.2.4 Real Time PCR法 | 第43页 |
4.2.5 WesternBlot法 | 第43-44页 |
4.2.6 统计学处理 | 第44页 |
4.3 结果 | 第44-60页 |
4.3.1 初级纤毛siRNA干扰方法的建立 | 第44-46页 |
4.3.2 初级纤毛发生被抑制后,纤毛长度及发生率的变化 | 第46-50页 |
4.3.3 缺氧培养对脱纤毛细胞的形态影响 | 第50-51页 |
4.3.4 脱纤毛细胞的HIF-1α、HIF-2α及Nrf2发生核转位情况 | 第51-54页 |
4.3.5 初级纤毛干扰后HIF-1α、Nrf2、VEGF及SOD的基因表达情况 | 第54-56页 |
4.3.6 初级纤毛干扰后HIF-1α、Nrf2、VEGF及SOD蛋白表达情况 | 第56-60页 |
4.4 讨论 | 第60-61页 |
4.5 结论 | 第61-62页 |
第五章 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
硕士期间科研成果 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |