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右旋磷霉素生物转化菌筛选方法的建立与应用

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第1章 绪论第13-21页
    1.1 磷霉素概述第13-16页
        1.1.1 磷霉素简介第13页
        1.1.2 磷霉素理化性质第13页
        1.1.3 磷霉素抗菌机制第13-14页
        1.1.4 磷霉素的生物合成途径第14页
        1.1.5 磷霉素的耐药机制第14-15页
        1.1.6 磷霉素的工业生产第15-16页
    1.2 右旋磷霉素的转化研究进展第16-18页
        1.2.1 物化降解右旋磷霉素第16-17页
        1.2.2 生物降解右旋磷霉素第17页
        1.2.3 化学手性转化右旋磷霉素第17页
        1.2.4 生物手性转化右旋磷霉素第17页
        1.2.5 其他相关转化研究进展第17-18页
        1.2.6 生物转化相关的酶第18页
    1.3 检测方法第18-20页
        1.3.1 旋光法第18页
        1.3.2 高效液相色谱法第18-19页
        1.3.3 质谱法第19页
        1.3.4 茜素分光光度法第19页
        1.3.5 毛细管电泳法第19页
        1.3.6 薄层色谱法第19页
        1.3.7 抗生素微生物检定法第19-20页
        1.3.8 生物自显影法第20页
    1.4 本论文的立题基础和研究目的第20-21页
        1.4.1 立题依据第20页
        1.4.2 研究目的第20-21页
第2章 右旋磷霉素降解菌筛选方法的建立第21-29页
    2.1 实验材料第21页
        2.1.1 实验仪器第21页
        2.1.2 实验试剂第21页
    2.2 实验方法第21-24页
        2.2.1 茚三酮显色右旋磷霉素第21-22页
        2.2.2 全波长扫描第22页
        2.2.3 洗脱次数优化第22页
        2.2.4 显色时间优化第22页
        2.2.5 精密度试验第22-23页
        2.2.6 重复性试验第23页
        2.2.7 利用Z’因子评估检测方法的可靠性第23页
        2.2.8 右旋磷霉素含量标准曲线的绘制第23-24页
    2.3 实验结果第24-28页
        2.3.1 茚三酮显色右(左)旋磷霉素结果第24页
        2.3.2 全波长扫描结果第24-25页
        2.3.3 洗脱次数优化结果第25页
        2.3.4 显色时间优化结果第25-26页
        2.3.5 精密度试验结果第26页
        2.3.6 重复性试验结果第26-27页
        2.3.7 利用Z’因子评估检测方法的可靠性结果第27页
        2.3.8 右旋磷霉素含量标准曲线的绘制第27-28页
    2.4 本章小结第28-29页
第3章 右旋磷霉素手性转化菌筛选方法的建立第29-39页
    3.1 实验材料第29页
        3.1.1 实验仪器第29页
        3.1.2 实验试剂第29页
    3.2 实验方法第29-32页
        3.2.1 α-右旋苯乙胺对右旋磷霉素的溶解作用试验第29-30页
        3.2.2 α-右旋苯乙胺对左旋磷霉素的沉淀作用试验第30页
        3.2.3 α-右旋苯乙胺的薄层层析第30页
        3.2.4 常见有机溶剂漂洗α-右旋苯乙胺试验第30页
        3.2.5 不同培养基对右旋磷霉素溶解的影响试验第30-31页
        3.2.6 培养基中右旋磷霉素溶解性试验第31页
        3.2.7 TLC检测第31页
        3.2.8 混旋培养基溶液中左旋磷霉素含量的精密度试验第31页
        3.2.9 混旋培养基溶液中左旋磷霉素含量的重复性试验第31-32页
        3.2.10 利用Z’因子评估检测模型的可靠性第32页
        3.2.11 混旋培养基中左旋磷霉素含量标准曲线的绘制第32页
    3.3 实验结果第32-38页
        3.3.1 α-右旋苯乙胺对右旋磷霉素溶解作用试验结果第32-33页
        3.3.2 α-右旋苯乙胺对左旋磷霉素沉淀作用试验结果第33页
        3.3.3 α-右旋苯乙胺的薄层色谱检测结果第33-34页
        3.3.4 常见有机溶剂漂洗α-右旋苯乙胺试验结果第34页
        3.3.5 不同培养基对右旋磷霉素溶解的影响试验结果第34-35页
        3.3.6 培养基中右旋磷霉素溶解性试验结果第35页
        3.3.7 TLC检测结果第35-36页
        3.3.8 混旋培养基中左旋磷霉素精密度试验结果第36页
        3.3.9 混旋培养基中左旋磷霉素重复性试验第36-37页
        3.3.10 利用Z’因子评估检测模型的可靠性第37页
        3.3.11 混旋培养基中左旋磷霉素含量标准曲线的绘制结果第37-38页
    3.4 本章小结第38-39页
第4章 右旋磷霉素生物转化菌的筛选第39-46页
    4.1 实验材料第39-40页
        4.1.1 样品来源第39页
        4.1.2 培养基第39-40页
        4.1.3 实验仪器第40页
        4.1.4 实验试剂第40页
    4.2 实验方法第40-43页
        4.2.1 右旋磷霉素耐受菌株的筛选第40-41页
        4.2.2 右旋磷霉素降解菌株的筛选第41-42页
        4.2.3 右旋磷霉素手性转化菌株的筛选第42-43页
    4.3 实验结果第43-45页
        4.3.1 耐受菌株筛选结果第43页
        4.3.2 右旋磷霉素降解菌株筛选结果第43-44页
        4.3.3 右旋磷霉素手性转化菌株筛选结果第44-45页
    4.4 本章小结第45-46页
第5章 右旋磷霉素降解菌的选育第46-52页
    5.1 实验材料第46-47页
        5.1.1 菌株来源第46页
        5.1.2 培养基第46页
        5.1.3 实验仪器第46页
        5.1.4 实验试剂第46-47页
    5.2 实验方法第47-48页
        5.2.1 菌种活化第47页
        5.2.2 生长曲线测定第47页
        5.2.3 紫外诱变第47-48页
        5.2.4 高效菌株的筛选第48页
        5.2.5 菌株遗传稳定性试验第48页
    5.3 实验结果第48-51页
        5.3.1 生长曲线测定结果第48-49页
        5.3.2 紫外诱变致死曲线第49-50页
        5.3.3 高效菌株的筛选第50-51页
        5.3.4 菌株遗传稳定性试验第51页
    5.4 本章小结第51-52页
第6章 右旋磷霉素降解菌的系统发育分析第52-60页
    6.1 实验材料第52-53页
        6.1.1 菌株来源第52页
        6.1.2 培养基第52页
        6.1.3 主要试剂第52页
        6.1.4 主要仪器第52-53页
    6.2 实验方法第53-54页
        6.2.1 收集菌体第53页
        6.2.2 基因组DNA的提取第53页
        6.2.3 16S rDNA的PCR扩增第53-54页
        6.2.4 PCR产物检测第54页
        6.2.5 构建系统发育树第54页
    6.3 实验结果第54-59页
        6.3.1 PCR产物电泳结果第54-55页
        6.3.2 系统发育分析结果第55-59页
    6.4 本章小结第59-60页
第7章 讨论与结论第60-62页
    7.1 讨论第60页
    7.2 结论第60-61页
    7.3 创新点第61-62页
参考文献第62-69页
致谢第69-70页
攻读学位期间取得的科研成果第70页

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