致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词 | 第11-17页 |
绪论 | 第17-22页 |
第一部分 EGFR抑制剂与骨性关节炎 | 第22-48页 |
1 EGFR受体在骨性关节炎中的表达 | 第24-29页 |
1.1 引言 | 第24页 |
1.2 实验试剂与仪器 | 第24-25页 |
1.2.1 材料和试剂 | 第24-25页 |
1.2.2 相关试剂的配制 | 第25页 |
1.3 实验方法 | 第25-27页 |
1.3.1 组织蛋白样本准备 | 第25页 |
1.3.2 Western-Blot | 第25-26页 |
1.3.3 组织免疫荧光 | 第26-27页 |
1.4 实验结果 | 第27-29页 |
2 EGFR抑制剂吉非替尼对软骨细胞的功能和机制研究 | 第29-40页 |
2.1 引言 | 第29页 |
2.2 实验试剂与仪器 | 第29-31页 |
2.2.1 材料和试剂 | 第29-30页 |
2.2.2 质粒、载体及菌株 | 第30页 |
2.2.3 相关试剂配制 | 第30-31页 |
2.3 实验方法 | 第31-37页 |
2.3.1 人软骨细胞的分离和培养 | 第31页 |
2.3.2 细胞冻存 | 第31页 |
2.3.3 细胞复苏 | 第31-32页 |
2.3.4 siRNA转染步骤 | 第32页 |
2.3.5 感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
2.3.6 质粒转化 | 第33页 |
2.3.7 质粒大量抽提 | 第33-34页 |
2.3.8 病毒包装 | 第34-35页 |
2.3.9 病毒感染 | 第35页 |
2.3.10 提取RNA | 第35-36页 |
2.3.11 逆转录合成cDNA | 第36页 |
2.3.12 实时荧光定量PCR(Real time PCR) | 第36-37页 |
2.3.13 细胞蛋白样本准备 | 第37页 |
2.3.14 Western-Blot | 第37页 |
2.4 实验结果 | 第37-40页 |
2.4.1 EGFR受体在软骨细胞中的功能 | 第37-38页 |
2.4.2 吉非替尼在软骨细胞中的功能和机制 | 第38-40页 |
3 EGFR抑制剂吉非替尼在骨性关节炎治疗中的作用和机制研究 | 第40-48页 |
3.1 引言 | 第40页 |
3.2 实验试剂与仪器 | 第40-41页 |
3.2.1 材料和试剂 | 第40页 |
3.2.2 实验仪器及材料 | 第40-41页 |
3.2.3 实验动物 | 第41页 |
3.2.4 相关溶液的配制 | 第41页 |
3.3 实验方法 | 第41-43页 |
3.3.1 壳聚糖微球的制备 | 第41页 |
3.3.2 扫描电镜样本制备 | 第41页 |
3.3.3 微球缓释检测 | 第41-42页 |
3.3.4 小鼠骨性关节炎造模 | 第42页 |
3.3.5 动物实验分组 | 第42页 |
3.3.6 动物给药方式 | 第42页 |
3.3.7 H&E染色 | 第42-43页 |
3.3.8 SO染色 | 第43页 |
3.3.9 免疫组化(IHC)染色 | 第43页 |
3.4 实验结果 | 第43-48页 |
3.4.1 构建吉非替尼壳聚糖缓释微球并评估其表征 | 第43-45页 |
3.4.2 吉非替尼抑制体内骨性关节炎的进展 | 第45-46页 |
3.4.3 吉非替尼抑制体内骨性关节炎的进展的机制 | 第46-48页 |
第二部分 讨论 | 第48-50页 |
第三部分 氯化锂与骨软骨缺损 | 第50-73页 |
4 构建含锂介孔生物活性玻璃支架并评估支架表征的研究 | 第52-56页 |
4.1 引言 | 第52页 |
4.2 实验试剂与仪器 | 第52-53页 |
4.2.1 材料和试剂 | 第52页 |
4.2.2 实验仪器及材料 | 第52-53页 |
4.2.3 相关试剂的配制 | 第53页 |
4.3 实验方法 | 第53-54页 |
4.3.1 介孔生物活性玻璃支架的制备 | 第53页 |
4.3.2 扫描电镜样本制备 | 第53页 |
4.3.3 人BMSCs的分离和培养 | 第53页 |
4.3.4 支架缓解曲线测定 | 第53-54页 |
4.3.5 细胞增殖(CCK-8)测定 | 第54页 |
4.4 实验结果 | 第54-56页 |
4.4.1 构建Li-MBG支架并评估支架的表征 | 第54-56页 |
5 含锂介孔生物活性玻璃支架促进软骨下骨修复的研究 | 第56-61页 |
5.1 引言 | 第56页 |
5.2 实验试剂与仪器 | 第56-57页 |
5.2.1 材料和试剂 | 第56页 |
5.2.2 实验仪器及材料 | 第56页 |
5.2.3 相关试剂的配制 | 第56-57页 |
5.3 实验方法 | 第57-58页 |
5.3.1 兔子骨软骨缺损的建立和支架植入 | 第57页 |
5.3.2 兔子膝关节样本的ICRS评估 | 第57页 |
5.3.3 软骨下骨的Micro-CT | 第57-58页 |
5.4 实验结果 | 第58-61页 |
5.4.1 Li-MBG促进骨软骨缺损再生的研究 | 第58-61页 |
6 含锂介孔生物活性玻璃支架促进软骨下骨修复的机制研究 | 第61-65页 |
6.1 引言 | 第61页 |
6.2 实验试剂与仪器 | 第61-62页 |
6.2.1 材料和试剂 | 第61-62页 |
6.2.2 实验仪器及材料 | 第62页 |
6.2.3 相关试剂的配制 | 第62页 |
6.3 实验方法 | 第62-63页 |
6.3.1 人BMSCs的分离和培养 | 第62页 |
6.3.2 CCK-8检测 | 第62页 |
6.3.3 定向诱导BMSCs向成骨细胞分化 | 第62-63页 |
6.3.4 实时荧光定量PCR | 第63页 |
6.3.5 Western Blot | 第63页 |
6.4 实验结果 | 第63-65页 |
7 含锂介孔生物活性玻璃支架促进软骨修复的效应研究 | 第65-68页 |
7.1 引言 | 第65页 |
7.2 实验试剂与仪器 | 第65页 |
7.2.1 材料和试剂 | 第65页 |
7.2.2 SO染色相关试剂的配制 | 第65页 |
7.3 实验方法 | 第65-66页 |
7.3.1 SO染色 | 第65页 |
7.3.2 ICRS评分 | 第65-66页 |
7.4 实验结果 | 第66-68页 |
8 氯化锂保护软骨的机制研究 | 第68-73页 |
8.1 引言 | 第68页 |
8.2 实验试剂与仪器 | 第68-69页 |
8.2.1 材料和试剂 | 第68-69页 |
8.2.2 相关试剂的配制 | 第69页 |
8.3 实验方法 | 第69页 |
8.3.1 小鼠骨性关节炎造模 | 第69页 |
8.3.2 动物实验分组 | 第69页 |
8.3.3 动物给药方式 | 第69页 |
8.3.4 小鼠软骨细胞的培养 | 第69页 |
8.3.5 病毒包装和感染 | 第69页 |
8.3.6 实时定量PCR | 第69页 |
8.3.7 Western Blot | 第69页 |
8.4 实验结果 | 第69-73页 |
第四部分 讨论 | 第73-79页 |
9 总结 | 第75-79页 |
9.1 关节腔缓释EGFR抑制剂吉非替尼治疗骨性关节炎的研究 | 第75-76页 |
9.2 缓释锂离子介孔生物活性玻璃支架促进骨软骨缺损修复的研究 | 第76-79页 |
参考文献 | 第79-87页 |
综述 | 第87-111页 |
参考文献 | 第100-111页 |
作者简历 | 第111-113页 |