摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 食线虫真菌及捕食器官的研究进展 | 第14-33页 |
1. 植物病原线虫的危害与防治 | 第14-15页 |
2. 食线虫真菌及其在线虫生物防治中的作用 | 第15-16页 |
3. 食线虫真菌侵染线虫的生物学过程 | 第16-18页 |
4. 捕食器官(捕器)的形成、诱导、进化和分子机制研究 | 第18-31页 |
4.1 捕器的形成和诱导 | 第18-24页 |
4.2 捕器的形成和进化 | 第24-27页 |
4.3 捕器的结构特征 | 第27-30页 |
4.4 捕器形成的分子机制 | 第30-31页 |
5 展望 | 第31-32页 |
6 本论文的研究内容和意义 | 第32-33页 |
第二章 氨基酸对寡孢节丛孢捕食器官的诱导 | 第33-50页 |
1 前言 | 第33-34页 |
2 材料与方法 | 第34-37页 |
2.1 实验材料和仪器 | 第34-35页 |
2.1.1 实验菌株 | 第34页 |
2.1.2 实验用培养基 | 第34-35页 |
2.1.3 实验用生化试剂 | 第35页 |
2.1.4 实验用仪器和设备 | 第35页 |
2.2 实验方法 | 第35-37页 |
2.2.1 寡孢节丛孢的活化和孢子培养 | 第35-36页 |
2.2.2 寡孢节丛孢孢子的收集 | 第36页 |
2.2.3 寡孢节丛孢捕食器官的诱导 | 第36-37页 |
3 实验结果与分析 | 第37-49页 |
3.1 寡孢节丛孢孢子的培养和收集 | 第37页 |
3.2 甲硫氨酸(Met)诱导寡孢节丛孢产捕器 | 第37-38页 |
3.3 色氨酸(Trp)诱导寡孢节丛孢产捕器 | 第38-39页 |
3.4 苯丙氨酸(Phe)诱导寡孢节丛孢产捕器 | 第39-40页 |
3.5 缬氨酸(Val)诱导寡孢节丛孢产捕器 | 第40-42页 |
3.6 亮氨酸(Leu)诱导寡孢节丛孢产捕器 | 第42-43页 |
3.7 赖氨酸(Lys)诱导寡孢节丛孢产捕器 | 第43-44页 |
3.8 谷氨酸(Glu)诱导寡孢节丛孢产捕器 | 第44-45页 |
3.9 精氨酸(Arg)诱导寡孢节丛孢产捕器 | 第45-46页 |
3.10 组氨酸(His)诱导寡孢节丛孢产捕器 | 第46-47页 |
3.11 酪氨酸(Tyr)诱导寡孢节丛孢产捕器 | 第47-49页 |
4 小结 | 第49-50页 |
第三章 氨基酸对环捕节丛孢捕食器官的诱导 | 第50-63页 |
1 前言 | 第50页 |
2 材料与方法 | 第50-51页 |
2.1 实验材料和仪器 | 第50-51页 |
2.1.1 实验菌株 | 第50页 |
2.1.2 实验用培养基 | 第50页 |
2.1.3 实验用生化试剂 | 第50页 |
2.1.4 实验用仪器和设备 | 第50-51页 |
2.2 实验方法 | 第51页 |
2.2.1 环捕节丛孢的活化和孢子培养 | 第51页 |
2.2.2 环捕节丛孢孢子的收集 | 第51页 |
2.2.3 环捕节丛孢捕食器官的诱导 | 第51页 |
3 实验结果与分析 | 第51-62页 |
3.1 甲硫氨酸(Met)诱导环捕节丛孢产捕器 | 第51-53页 |
3.2 色氨酸(Trp)诱导环捕节丛孢产捕器 | 第53-54页 |
3.3 苯丙氨酸(Phe)诱导环捕节丛孢产捕器 | 第54-55页 |
3.4 缬氨酸(Val)诱导环捕节丛孢产捕器 | 第55-56页 |
3.5 亮氨酸(Leu)诱导环捕节丛孢产捕器 | 第56-57页 |
3.6 赖氨酸(Lys)诱导环捕节丛孢产捕器 | 第57-58页 |
3.7 谷氨酸(Glu)诱导环捕节丛孢产捕器 | 第58-59页 |
3.8 组氨酸(His)诱导环捕节丛孢产捕器 | 第59-60页 |
3.9 酪氨酸(Tyr)诱导环捕节丛孢产捕器 | 第60-61页 |
3.10 精氨酸(Arg)诱导环捕节丛孢产捕器 | 第61-62页 |
4 小结 | 第62-63页 |
第四章 参与氨基酸调控寡孢节丛孢产生捕食器官的候选基因筛选 | 第63-79页 |
1 前言 | 第63-65页 |
2 实验材料和仪器 | 第65-66页 |
2.1 实验菌株 | 第65页 |
2.2 实验用培养基 | 第65页 |
2.3 实验用生化试剂 | 第65-66页 |
2.4 实验用仪器和设备 | 第66页 |
3 实验方法 | 第66-69页 |
3.1 寡孢节丛孢的活化和孢子培养 | 第66页 |
3.2 寡孢节丛孢孢子的收集 | 第66页 |
3.3 寡孢节丛孢捕食器官的诱导 | 第66-67页 |
3.4 不同诱导时间点菌丝的收集 | 第67页 |
3.5 不同诱导时间点菌丝的总RNA提取 | 第67-68页 |
3.6 逆转录获取cDNA | 第68页 |
3.7 Real-Time PCR(相对定量PCR) | 第68-69页 |
4 实验结果 | 第69-77页 |
4.1 寡孢节丛孢捕器的诱导 | 第69-70页 |
4.2 各时间点样品的相对定量 | 第70-77页 |
5 小结 | 第77-79页 |
第五章 寡孢节丛孢Gcn2和Tor敲除载体的构建、转化和转化子筛选 | 第79-98页 |
1 前言 | 第79页 |
2 实验材料及仪器 | 第79-82页 |
2.1 实验菌株和质粒 | 第79-80页 |
2.2 主要溶液及培养基 | 第80-81页 |
2.3 主要药品及试剂盒 | 第81页 |
2.4 主要仪器及设备 | 第81-82页 |
3 实验方法 | 第82-93页 |
3.1 基因敲除载体的构建思路 | 第82页 |
3.2 基因编号 | 第82-83页 |
3.3 敲除引物设计 | 第83-84页 |
3.4 寡孢节丛孢基因组DNA提取 | 第84页 |
3.5 质粒pCSN44的提取 | 第84-85页 |
3.6 扩增目的片段 | 第85-87页 |
3.7 酵母感受态制备及电转 | 第87-88页 |
3.8 酵母转化子质粒提取 | 第88-90页 |
3.9 敲除载体全长片段扩增及回收 | 第90-91页 |
3.10 寡孢节丛孢原生质体的制备 | 第91-92页 |
3.11 寡孢节丛孢原生质体的转化 | 第92页 |
3.12 寡孢节丛孢敲除转化子基因组提取 | 第92页 |
3.13 敲除转化子的PCR验证 | 第92-93页 |
4 实验结果 | 第93-96页 |
4.1 寡孢节丛孢中Tor,Gcn2基因5’端和3’端同源片段及hph扩增 | 第93-94页 |
4.2 电转化酵母结果 | 第94页 |
4.3 酵母转化子质粒PCR结果 | 第94-95页 |
4.4 转化子PCR验证 | 第95-96页 |
5 讨论 | 第96-97页 |
6 小结 | 第97-98页 |
第六章 Pex5和Pex7敲除菌株与野生型菌株的表型特征比较 | 第98-109页 |
1 前言 | 第98页 |
2 实验材料及仪器 | 第98-99页 |
2.1 实验菌株 | 第98-99页 |
2.2 主要培养基 | 第99页 |
2.3 主要药品 | 第99页 |
2.4 主要仪器及设备 | 第99页 |
3 实验方法 | 第99-101页 |
3.1 生长速率的比较 | 第99-100页 |
3.2 产孢的比较 | 第100页 |
3.3 产捕器(三维菌网)比较 | 第100页 |
3.4 胞外蛋白酶活性比较 | 第100-101页 |
3.5 逆境生长情况比较 | 第101页 |
4 实验结果 | 第101-106页 |
4.1 生长速率比较 | 第101-103页 |
4.2 产孢的比较 | 第103-104页 |
4.3 产捕器(三维菌网)比较 | 第104-105页 |
4.4 胞外蛋白酶活性比较 | 第105-106页 |
4.5 逆境生长测试结果 | 第106页 |
5 讨论 | 第106-108页 |
5.1 生长速率的比较 | 第106-107页 |
5.2 产孢比较 | 第107页 |
5.3 产捕器比较 | 第107页 |
5.4 产胞外蛋白酶比较 | 第107页 |
5.5 抗逆性比较 | 第107-108页 |
6 小结 | 第108-109页 |
全文小结 | 第109-111页 |
参考文献 | 第111-119页 |
附录 | 第119-126页 |
附录1. 论文中使用的缩写及中英文对照 | 第119-120页 |
附录2. 论文中使用的储存液、缓冲液和染色液的配制 | 第120-122页 |
附录3. 论文中定量基因所使用的引物序列 | 第122-124页 |
附录4. 论文中使用的质粒图谱 | 第124-125页 |
附录5. 在读硕士期间(待)发表、撰写的学术论文 | 第125-126页 |
致谢 | 第126页 |