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Alphastatin作用下EC304细胞蛋白质差异表达的实验研究

缩略词索引第1-7页
中文摘要第7-9页
英文摘要第9-11页
前言第11-15页
第一部分 Alphastatin作用下EC304细胞蛋白质差异表达第15-46页
 材料与方法第15-26页
  一、材料第15-17页
   1 试剂第15-17页
   2 细胞来源第17页
   3 主要仪器设备第17页
  二、实验方法第17-26页
   1 试剂配制第18-19页
   2 人脐静脉内皮细胞(EC304)培养及分组对比第19-20页
   3 细胞蛋白提取第20页
   4 蛋白定量第20-21页
   5 双向电泳第21-22页
   ·第一向pH梯度固相等电聚焦第21页
   ·平衡第21页
   ·第二向垂直平板电泳(SDS-PAGE)第21-22页
   6 染色第22-23页
   ·硝酸银染色第22页
   ·质谱兼容的银染第22-23页
   7 二维凝胶电泳图谱及图像分析第23-24页
   8 差异表达蛋白质点的质谱鉴定第24-26页
   ·质谱兼容银染的胶内酶切第24页
   ·纳升超高效液相色谱-电喷雾串联质谱测定蛋白质第24-26页
 结果第26-41页
  一、EC304细胞的增值及管状结构观察第26页
  二、二维凝胶电泳图谱及图像分析第26-30页
  三、差异蛋白质的质谱鉴定第30-41页
   1 NanoUPLC-ESI-MS/MS分析第30-39页
   2 鉴定蛋白质的功能特点第39-41页
 讨论第41-46页
  一、影响双向电泳图谱质量的因素第41页
  二、双向电泳的局限性第41-42页
  三、蛋白质斑点的鉴定第42-43页
  四、关于蛋白质功能的讨论第43-46页
第二部分 差异蛋白在Alphastatin作用下EC304细胞中的表达第46-55页
 材料与方法第46-50页
  一、实验材料第46-48页
   1 主要设备第46-47页
   2 实验材料与试剂第47页
   3 常用实验试剂的配置第47-48页
  二、实验方法第48-50页
   1 Western blot第49页
   2 免疫荧光第49-50页
 结果第50-53页
  一、Western blot结果第50-51页
  二、免疫荧光结果第51-53页
 讨论第53-55页
  一、关于Nm23蛋白在胃癌及血管内皮细胞中表达的意义第53页
  二、关于信号通路的研究和探讨第53-55页
结论第55-56页
参考文献第56-61页
综述第61-79页
 参考文献第71-79页
在学期间发表文章第79-80页
致谢第80页

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