缩略词索引 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
前言 | 第11-15页 |
第一部分 Alphastatin作用下EC304细胞蛋白质差异表达 | 第15-46页 |
材料与方法 | 第15-26页 |
一、材料 | 第15-17页 |
1 试剂 | 第15-17页 |
2 细胞来源 | 第17页 |
3 主要仪器设备 | 第17页 |
二、实验方法 | 第17-26页 |
1 试剂配制 | 第18-19页 |
2 人脐静脉内皮细胞(EC304)培养及分组对比 | 第19-20页 |
3 细胞蛋白提取 | 第20页 |
4 蛋白定量 | 第20-21页 |
5 双向电泳 | 第21-22页 |
·第一向pH梯度固相等电聚焦 | 第21页 |
·平衡 | 第21页 |
·第二向垂直平板电泳(SDS-PAGE) | 第21-22页 |
6 染色 | 第22-23页 |
·硝酸银染色 | 第22页 |
·质谱兼容的银染 | 第22-23页 |
7 二维凝胶电泳图谱及图像分析 | 第23-24页 |
8 差异表达蛋白质点的质谱鉴定 | 第24-26页 |
·质谱兼容银染的胶内酶切 | 第24页 |
·纳升超高效液相色谱-电喷雾串联质谱测定蛋白质 | 第24-26页 |
结果 | 第26-41页 |
一、EC304细胞的增值及管状结构观察 | 第26页 |
二、二维凝胶电泳图谱及图像分析 | 第26-30页 |
三、差异蛋白质的质谱鉴定 | 第30-41页 |
1 NanoUPLC-ESI-MS/MS分析 | 第30-39页 |
2 鉴定蛋白质的功能特点 | 第39-41页 |
讨论 | 第41-46页 |
一、影响双向电泳图谱质量的因素 | 第41页 |
二、双向电泳的局限性 | 第41-42页 |
三、蛋白质斑点的鉴定 | 第42-43页 |
四、关于蛋白质功能的讨论 | 第43-46页 |
第二部分 差异蛋白在Alphastatin作用下EC304细胞中的表达 | 第46-55页 |
材料与方法 | 第46-50页 |
一、实验材料 | 第46-48页 |
1 主要设备 | 第46-47页 |
2 实验材料与试剂 | 第47页 |
3 常用实验试剂的配置 | 第47-48页 |
二、实验方法 | 第48-50页 |
1 Western blot | 第49页 |
2 免疫荧光 | 第49-50页 |
结果 | 第50-53页 |
一、Western blot结果 | 第50-51页 |
二、免疫荧光结果 | 第51-53页 |
讨论 | 第53-55页 |
一、关于Nm23蛋白在胃癌及血管内皮细胞中表达的意义 | 第53页 |
二、关于信号通路的研究和探讨 | 第53-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
综述 | 第61-79页 |
参考文献 | 第71-79页 |
在学期间发表文章 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |