| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1 植物防御反应研究 | 第13-16页 |
| 1.1 植物防御反应中的信号分子 | 第13-14页 |
| 1.2 植物防御反应信号转导途径 | 第14-15页 |
| 1.2.1 依赖于水杨酸的防御信号转导途径 | 第14页 |
| 1.2.2 依赖于茉莉酸和乙烯的防御信号途径 | 第14-15页 |
| 1.3 植物防御反应信号转导途径间的相互作用 | 第15-16页 |
| 2 泛素-蛋白酶体途径及其生物学功能 | 第16-21页 |
| 2.1 泛素/26S蛋白酶体途径的生物学功能 | 第17-19页 |
| 2.2 U-box/ARM蛋白与植物的抗病性 | 第19-20页 |
| 2.3 泛素-蛋白酶体途径阻断研究 | 第20-21页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 Hv-CMPG基因作用机理的初步分析 | 第23-47页 |
| 1 材料和方法 | 第23-31页 |
| 1.1 试验材料 | 第23-25页 |
| 1.2 泛素-蛋白酶体途径阻断实验 | 第25-26页 |
| 1.3 白粉菌诱导处理方法和取样方案 | 第26页 |
| 1.4 非生物胁迫处理方法和取样方案 | 第26页 |
| 1.5 引物设计 | 第26-27页 |
| 1.6 植物总RNA的提取 | 第27-28页 |
| 1.7 半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR(Q-PCR) | 第28-31页 |
| 1.7.1 反转录合成cDNA第一链 | 第28页 |
| 1.7.2 cDNA第一链浓度调整 | 第28-29页 |
| 1.7.3 半定量RT-PCR表达分析 | 第29-30页 |
| 1.7.4 实时荧光定量PCR(Q-PCR) | 第30-31页 |
| 1.8 转基因植株叶片接种白粉菌后的活性氧检测 | 第31页 |
| 1.9 转基因植株叶片接种白粉菌后的细胞壁蛋白交联分析 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-42页 |
| 2.1 泛素-蛋白酶体途径阻断实验 | 第31-34页 |
| 2.2 经白粉菌诱导后簇毛麦根、茎、叶中Hv-CMPG基因的表达特征 | 第34-35页 |
| 2.3 簇毛麦经不同胁迫诱导后的Hv-CMPG基因表达特征分析 | 第35-36页 |
| 2.4 白粉菌处理后转基因植株中的活性氧积累和菌丝发育观察 | 第36-40页 |
| 2.5 白粉菌处理后转基因植株中细胞壁蛋白交联观察 | 第40-42页 |
| 3 讨论 | 第42-47页 |
| 3.1 泛素化途径参与植物抗病过程 | 第42-43页 |
| 3.2 Hv-CMPG基因表达具有组织特异性 | 第43页 |
| 3.3 Hv-CMPG参与水杨酸抗病信号通路 | 第43-45页 |
| 3.4 活性氧的积累和细胞壁蛋白交联在Hv-CMPG参与抗病反应中的作用 | 第45-47页 |
| 第三章 HV-CMPG基因的遗传转化及功能分析 | 第47-67页 |
| 1 材料和方法 | 第47-57页 |
| 1.1 试验材料 | 第47-48页 |
| 1.2 受体材料准备 | 第48-49页 |
| 1.3 培养基成份 | 第49页 |
| 1.4 质粒载体的转化 | 第49-52页 |
| 1.4.1 质粒载体的构建和鉴定 | 第49-50页 |
| 1.4.2 热击感受态细胞的制备 | 第50页 |
| 1.4.3 质粒DNA的热击转化 | 第50-51页 |
| 1.4.4 质粒DNA的提取 | 第51页 |
| 1.4.5 质粒载体的鉴定 | 第51-52页 |
| 1.5 基因枪介导的遗传转化 | 第52-53页 |
| 1.5.1 微弹制备及基因枪轰击 | 第52-53页 |
| 1.5.2 抗性愈伤组织的筛选及植株再生 | 第53页 |
| 1.6 转基因阳性植株的鉴定 | 第53-56页 |
| 1.6.1 基因组DNA提取(CTAB法) | 第53-55页 |
| 1.6.2 再生植株的PCR检测 | 第55-56页 |
| 1.7 转基因植株的白粉病抗性鉴定 | 第56-57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-64页 |
| 2.1 Hv-CMPG基因转化载体的构建与鉴定 | 第57-58页 |
| 2.2 转基因再生植株的获得 | 第58-60页 |
| 2.2.1 小麦品种扬麦158幼胚愈伤组织的诱导和遗传转化 | 第58页 |
| 2.2.2 抗性愈伤组织的分化和伸长培养 | 第58-59页 |
| 2.2.3 再生植株的生根壮苗 | 第59页 |
| 2.2.4 再生植株的越夏与移栽 | 第59-60页 |
| 2.3 基因转化及阳性转基因植株的筛选 | 第60-61页 |
| 2.4 T_0代转基因植株的白粉病抗性鉴定 | 第61-64页 |
| 3 讨论 | 第64-67页 |
| 全文结论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 附表 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
