摘要 | 第3-9页 |
ABSTRACT | 第9-14页 |
前言 | 第18-25页 |
第一章 重组腺病毒Ad-GFP-C197的构建与表达 | 第25-42页 |
1、实验材料 | 第25-28页 |
1.1 主要设备与仪器 | 第25页 |
1.2 材料与试剂 | 第25-27页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第27-28页 |
2、实验流程 | 第28-29页 |
3、实验方法 | 第29-36页 |
3.1 C197 cDNA的获取 | 第29页 |
3.2 重组腺病毒大质粒PAd-GFP-C197的构建及鉴定 | 第29-32页 |
3.3 重组腺病毒Ad-GFP-C197的包装 | 第32-33页 |
3.4 重组腺病毒Ad-GFP-C197的鉴定 | 第33-35页 |
3.5 重组腺病毒的纯化及滴度测定 | 第35页 |
3.6 C197蛋白的纯化 | 第35-36页 |
4、实验结果 | 第36-41页 |
4.1 双酶切获得目的片段 | 第36-37页 |
4.2 重组腺病毒大质粒PAd-GFP-C197的构建及鉴定 | 第37-39页 |
4.3 重组腺病毒Ad-GFP-C197的鉴定 | 第39-40页 |
4.4 重组腺病毒Ad-GFP-C197的滴度测定 | 第40页 |
4.5 C197蛋白纯化结果 | 第40-41页 |
5、实验结论 | 第41-42页 |
第二章 重组腺病毒Ad-GFP-C197对Hela细胞影响及其机制研究 | 第42-57页 |
1、实验材料 | 第42-44页 |
1.1 主要仪器与设备 | 第42页 |
1.2 材料与试剂 | 第42-43页 |
1.3 主要工作液的配制 | 第43-44页 |
2、实验方法 | 第44-49页 |
2.1 细胞培养 | 第44-45页 |
2.2 重组腺病毒Ad-GFP-C197对Hela细胞增殖的影响 | 第45-46页 |
2.3 重组腺病毒Ad-GFP-C197对Hela细胞凋亡的影响 | 第46-47页 |
2.4 重组腺病毒Ad-GFP-C197体外抑瘤机制研究 | 第47-49页 |
3、实验结果 | 第49-56页 |
3.1 重组腺病毒Ad-GFP-C197抑制Hela细胞增殖 | 第49-53页 |
3.2 重组腺病毒Ad-GFP-C197诱导Hela细胞凋亡 | 第53-54页 |
3.3 Ad-GFP-C197体外作用的分子机制研究 | 第54-56页 |
4、实验结论 | 第56-57页 |
第三章 重组腺病毒Ad-GFP-C197体内抑瘤作用及其机制研究 | 第57-68页 |
1、实验材料 | 第57-59页 |
1.1 实验动物 | 第57页 |
1.2 实验材料与试剂 | 第57-58页 |
1.3 主要仪器 | 第58页 |
1.4 主要工作液配制 | 第58-59页 |
2 实验方法 | 第59-63页 |
2.1 细胞培养 | 第59-60页 |
2.2 裸鼠实体瘤(Hela)的制备方法 | 第60-61页 |
2.3 肿瘤组织细胞凋亡、目的蛋白及靶蛋白表达检测 | 第61-63页 |
3、实验结果 | 第63-67页 |
3.1 重组腺病毒Ad-GFP-C197抑制裸鼠体内肿瘤生长 | 第63-65页 |
3.2 C197蛋白在肿瘤组织中表达 | 第65页 |
3.3 重组腺病毒Ad-GFP-C197促进肿瘤组织的凋亡 | 第65-66页 |
3.4 肿瘤组织中P65和IκBα蛋白表达下调 | 第66-67页 |
4、实验结论 | 第67-68页 |
讨论 | 第68-73页 |
结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-80页 |
中英文略缩词表 | 第80-82页 |
硕士期间发表论文 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |