| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 部分缩略语 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-26页 |
| 第一章 哺乳动物胚胎体外生产技术的研究进展 | 第13-20页 |
| 1.1 卵母细胞体外成熟 | 第13-15页 |
| 1.1.1 卵子的发生过程 | 第13-14页 |
| 1.1.2 卵母细胞体外成熟 | 第14页 |
| 1.1.3 卵母细胞体外成熟的特征 | 第14-15页 |
| 1.2 影响卵母细胞成熟的因素 | 第15-17页 |
| 1.2.1 动物种类 | 第15页 |
| 1.2.2 供体母畜年龄、性能和卵巢状态 | 第15-16页 |
| 1.2.3 卵母细胞的来源 | 第16页 |
| 1.2.4 卵泡大小 | 第16页 |
| 1.2.5 卵母细胞类型 | 第16页 |
| 1.2.6 运输条件 | 第16-17页 |
| 1.2.7 体外培养环境对卵母细胞成熟的影响 | 第17页 |
| 1.2.8 基础培养基 | 第17页 |
| 1.3 哺乳动物体外受精（In vitro fertilization, IVF）的研究 | 第17-18页 |
| 1.3.1 哺乳动物精子体外获能 | 第17-18页 |
| 1.3.2 体外受精 | 第18页 |
| 1.4 影响体外受精的因素 | 第18-20页 |
| 1.4.1 早期胚胎的培养及发育阻断 | 第18-19页 |
| 1.4.2 克服阻断的方法 | 第19-20页 |
| 第二章 锌对机体作用的研究进展 | 第20-26页 |
| 2.1 锌的研究概况 | 第20页 |
| 2.2 锌在机体内的分布形式 | 第20页 |
| 2.3 锌的生物学功能 | 第20-23页 |
| 2.3.1 锌对动物免疫功能的影响 | 第20-21页 |
| 2.3.2 锌对动物繁殖机能的影响 | 第21页 |
| 2.3.3 锌对哺乳动物卵丘细胞的影响 | 第21页 |
| 2.3.4 锌对哺乳动物卵母细胞的影响 | 第21-22页 |
| 2.3.5 锌的抗氧化功能 | 第22-23页 |
| 2.3.6 锌抗细胞凋亡功能 | 第23页 |
| 2.4 锌转运体蛋白家族 | 第23-24页 |
| 2.4.1 ZnT蛋白家族 | 第23-24页 |
| 2.4.2 ZIP蛋白家族 | 第24页 |
| 2.5 本研究的目的及意义 | 第24-26页 |
| 第二部分 试验部分 | 第26-49页 |
| 第三章 锌对牦牛卵母细胞体外成熟及其发育的影响 | 第26-49页 |
| 3.1 试剂与材料 | 第26-29页 |
| 3.1.1 主要仪器 | 第26-27页 |
| 3.1.2 试验动物 | 第27页 |
| 3.1.3 试剂与耗材 | 第27页 |
| 3.1.4 主要试剂配制 | 第27-29页 |
| 3.2 试验方法 | 第29-35页 |
| 3.2.1 试验前试剂准备 | 第29页 |
| 3.2.2 牦牛血液、卵泡液和IVM培养基中锌浓度的检测 | 第29页 |
| 3.2.3 牦牛卵巢的采集 | 第29页 |
| 3.2.4 卵母细胞的抽取 | 第29-30页 |
| 3.2.5 卵母细胞的筛选和体外成熟培养（In vitro maturation, IVM） | 第30页 |
| 3.2.6 锌对牦牛卵母细胞中GSH和ROS水平的影响 | 第30-31页 |
| 3.2.7 锌对牦牛卵母细胞中SOD水平的影响 | 第31页 |
| 3.2.8 体外受精（In vitro fertilization, IVF） | 第31-32页 |
| 3.2.9 qRT-PCR方法检测锌转运体蛋白家族主要基因的表达 | 第32-35页 |
| 3.2.9.1 牦牛卵母细胞RNA的提取 | 第33页 |
| 3.2.9.2 总RNA纯度的检测 | 第33页 |
| 3.2.9.3 总RNA的反转录 | 第33-34页 |
| 3.2.9.4 实时荧光定量分析 | 第34-35页 |
| 3.2.9.5 数据统计分析 | 第35页 |
| 3.3 结果与分析 | 第35-42页 |
| 3.3.1 牦牛锌浓度的检测 | 第35页 |
| 3.3.2 锌对牦牛卵母细胞形态学的影响 | 第35-37页 |
| 3.3.3 锌对牦牛卵母细胞中GSH和ROS水平的影响 | 第37-39页 |
| 3.3.4 锌对牦牛卵母细胞中SOD水平的影响 | 第39页 |
| 3.3.5 在体外成熟液中添加锌对后续受精卵发育的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.6 锌对牦牛锌转运体基因表达的影响 | 第40-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-49页 |
| 3.4.1 不同浓度锌对牦牛卵丘细胞扩展程度的影响 | 第42-43页 |
| 3.4.2 不同浓度锌对牦牛卵母细胞核成熟的影响 | 第43页 |
| 3.4.3 不同浓度锌对牦牛卵母细胞中GSH和ROS水平的影响 | 第43-45页 |
| 3.4.4 不同浓度锌对牦牛卵母细胞中SOD水平的影响 | 第45-46页 |
| 3.4.5 不同浓度锌对牦牛卵母细胞体外受精及其发育能力的影响 | 第46页 |
| 3.4.6 不同浓度锌对牦牛卵母细胞锌转运体主要基因表达的影响 | 第46-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-62页 |
| 附录：研究生阶段发表的论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
