| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第8-11页 |
| 第一部分 TRB3通过Smad信号通路对肺泡II型上皮细胞EMT的影响 | 第11-20页 |
| 1 实验材料 | 第11-14页 |
| 2 主要方法及步骤 | 第14-20页 |
| 2.1 TRB3及TRB3-shRNA腺病毒载体的构建、鉴定与扩增, 以实现TRB3基因的过表达或表达沉默 | 第14页 |
| 2.2 MLE-12 细胞培养 | 第14页 |
| 2.3 腺病毒Ad-TRB3、Ad-GFP、Ad-TRB3-ShRNA最佳感染效率的测定 | 第14页 |
| 2.4 实验细胞分组处理 | 第14-15页 |
| 2.5 CCK-8 法检测各组细胞增殖活性、流式细胞仪检测各组细胞凋亡率 | 第15页 |
| 2.6 荧光定量PCR扩增检测RB3、α-SMA 、CollaImRNA | 第15-18页 |
| 2.7 Western blot检测各组细胞TRB3、p-Smad2、p-Smad3、E-cadherin、Vimentin蛋白的表达 | 第18-19页 |
| 2.8 统计学分析 | 第19-20页 |
| 第二部分 TRB3通过Smad信号通路对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的影响 | 第20-31页 |
| 1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2 主要实验方法及步骤 | 第23-31页 |
| 2.1 Ad-TRB3, Ad-TRB3-shRNA载体的构建、鉴定及扩增 | 第23页 |
| 2.2 小鼠肺纤维化模型的制备及TRB3的表达对肺纤维化的干预作用 | 第23页 |
| 2.3 BALF染色、细胞分类及计数 | 第23-24页 |
| 2.4 HE染色、Masson染色、纤维化评分 | 第24-26页 |
| 2.5 肺组织羟脯氨酸含量测定 | 第26-27页 |
| 2.6 PCR检测Col1aI、α-SMA、TRB3 mRNA | 第27-28页 |
| 2.7 Western blot检测各组细胞TRB3、α-SMA、p-Smad2、p-Smad3、E-cadherin、Vimentin蛋白的表达 | 第28-29页 |
| 2.8 ELISA检测各组Col1a I的含量 | 第29-30页 |
| 2.9 统计学分析 | 第30-31页 |
| 结果 | 第31-65页 |
| 1 肺纤维化模型的建立 | 第31-36页 |
| 2 TRB3在博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠及体外MLE-12 细胞EMT模型中表达 | 第36-39页 |
| 3 Smad信号通路在体内外肺纤维化模型中活化 | 第39-41页 |
| 4 TRB3表达促进了经典的Smad信号通路活化 | 第41-46页 |
| 5 TRB3表达促进了EMT的发生 | 第46-58页 |
| 6 TRB3表达促进了博莱霉素诱导的小鼠发生肺纤维化 | 第58-62页 |
| 7 TRB3表达对MLE-12 细胞增殖活性及早期凋亡率的影响 | 第62-65页 |
| 讨论 | 第65-70页 |
| 1 肺纤维化模型的构建 | 第65-66页 |
| 2 TRB3在肺纤维化中表达 | 第66页 |
| 3 TRB3对Smad信号通路的影响 | 第66-67页 |
| 4 TRB3对EMT及肺纤维化的影响 | 第67-68页 |
| 5 TRB3对细胞生物活性的影响 | 第68-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 附图 | 第74-76页 |
| 综述 TGF-β/Smad信号与上皮-间充质细胞转分化（Epithelial Mesenchymal Transition EMT）及肺纤维化关系的研究 | 第76-86页 |
| 综述参考文献 | 第83-86页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第86-87页 |
| 英文缩略词说明 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
