摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第13-31页 |
1.1 小麦条锈病 | 第13-17页 |
1.1.1 小麦条锈病的危害 | 第13-14页 |
1.1.2 小麦条锈菌的研究现状 | 第14-17页 |
1.2 病原真菌与植物互作过程中糖吸收机制的研究 | 第17-20页 |
1.2.1 吸器 | 第17-19页 |
1.2.2 糖转运 | 第19-20页 |
1.3 蔗糖酶在植物与病原物互作体系中的作用 | 第20-25页 |
1.3.1 植物蔗糖酶的研究进展 | 第21-24页 |
1.3.2 微生物蔗糖酶的研究进展 | 第24-25页 |
1.4 寄主诱导的基因沉默技术 | 第25-28页 |
1.4.1 寄主诱导的基因沉默技术的机制 | 第25-27页 |
1.4.2 寄主诱导的基因沉默技术的应用 | 第27-28页 |
1.5 本研究的目的意义与技术路线 | 第28-31页 |
1.5.1 目的意义 | 第28-29页 |
1.5.2 技术路线 | 第29-31页 |
第二章 小麦条锈菌侵染对小麦叶片可溶性糖含量与光合作用的影响 | 第31-45页 |
2.1 引言 | 第31-32页 |
2.2 试验材料、试剂和仪器 | 第32页 |
2.2.1 试验材料 | 第32页 |
2.2.2 试剂及仪器 | 第32页 |
2.3 试验方法 | 第32-37页 |
2.3.1 样品采集 | 第32-33页 |
2.3.2 可溶性糖的提取及浓缩 | 第33-34页 |
2.3.3 高效液相色谱分析 | 第34页 |
2.3.4 光合速率的测定 | 第34页 |
2.3.5 RNA的提取 | 第34-35页 |
2.3.6 cDNA的合成 | 第35-36页 |
2.3.7 实时荧光定量PCR检测基因表达量 | 第36-37页 |
2.4 实验结果 | 第37-43页 |
2.4.1 被小麦条锈菌侵染的小麦叶片中蔗糖含量变化明显 | 第37-39页 |
2.4.2 在小麦条锈菌与小麦亲和与非亲和互作中蔗糖含量变化趋势 | 第39页 |
2.4.3 离体小麦叶片中蔗糖含量变化的测定 | 第39-40页 |
2.4.4 小麦条锈菌侵染会促进被侵染叶片光合速率升高 | 第40-41页 |
2.4.5 光合作用相关基因表达量的测定 | 第41-43页 |
2.5 讨论 | 第43-45页 |
第三章 小麦条锈菌蔗糖酶在小麦条锈菌糖吸收过程中的作用 | 第45-82页 |
3.1 引言 | 第45-46页 |
3.2 材料、试剂和仪器 | 第46-49页 |
3.2.1 试验材料 | 第46-47页 |
3.2.2 试剂及仪器 | 第47-49页 |
3.3 实验方法 | 第49-66页 |
3.3.1 样品采集 | 第49页 |
3.3.2 小麦条锈菌RNA提取 | 第49-50页 |
3.3.3 cDNA的合成 | 第50页 |
3.3.4 序列分析与比对 | 第50-51页 |
3.3.5 信号肽功能验证 | 第51-52页 |
3.3.6 基因表达量实时荧光定量PCR分析 | 第52-53页 |
3.3.7 酵母突变体互补试验 | 第53-54页 |
3.3.8 小麦条锈菌蔗糖酶的真核表达 | 第54-58页 |
3.3.9 小麦条锈菌蔗糖酶的酶学特性分析 | 第58-61页 |
3.3.10 小麦条锈菌蔗糖酶结构域功能分析 | 第61-62页 |
3.3.11 小麦条锈菌蔗糖酶基因的沉默 | 第62-66页 |
3.4 实验结果 | 第66-79页 |
3.4.1 PsINV基因的克隆与序列分析 | 第66-69页 |
3.4.2 PsINV蛋白中信号肽功能的分析与验证 | 第69-70页 |
3.4.3 PsINV基因在小麦条锈菌与小麦互作过程中表达量分析 | 第70-72页 |
3.4.4 PsINV基因酵母突变体互补 | 第72页 |
3.4.5 PsINV基因的真核表达 | 第72-73页 |
3.4.6 PsINV蛋白的酶学特性 | 第73-74页 |
3.4.7 PsINV基因中不同结构域的功能分析 | 第74-75页 |
3.4.8 沉默PsINV基因对小麦条锈菌侵染小麦叶片最终表型的影响 | 第75-77页 |
3.4.9 沉默PsINV基因对小麦条锈菌在侵染小麦过程中生长发育情况的影响 | 第77-79页 |
3.5 讨论 | 第79-82页 |
第四章 小麦条锈菌己糖转运蛋白在小麦条锈菌糖吸收过程中的作用 | 第82-101页 |
4.1 引言 | 第82-83页 |
4.2 材料、试剂和仪器 | 第83-85页 |
4.2.1 试验材料 | 第83-84页 |
4.2.2 试剂及仪器 | 第84-85页 |
4.3 实验方法 | 第85-90页 |
4.3.1 样品采集 | 第85页 |
4.3.2 小麦条锈菌RNA提取及cDNA合成 | 第85页 |
4.3.3 序列分析与比对 | 第85-86页 |
4.3.4 基因表达量实时荧光定量PCR分析 | 第86页 |
4.3.5 蛋白亚细胞定位分析 | 第86-88页 |
4.3.6 酵母突变体互补试验 | 第88页 |
4.3.7 PsHXT转运底物筛选 | 第88页 |
4.3.8 小麦条锈菌PsHXT基因的沉默 | 第88-90页 |
4.4 实验结果 | 第90-98页 |
4.4.1 PsHXT基因的克隆与序列分析 | 第90-92页 |
4.4.2 PsHXT基因在小麦条锈菌与小麦互作过程中的表达量分析 | 第92-93页 |
4.4.3 PsHXT蛋白的亚细胞定位 | 第93-94页 |
4.4.4 PsHXT基因酵母突变体互补 | 第94-96页 |
4.4.5 沉默PsHXT基因对小麦条锈菌侵染小麦叶片过程的影响 | 第96-98页 |
4.5 讨论 | 第98-101页 |
第五章 全文结论与展望 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-115页 |
附录 | 第115-121页 |
缩略词 | 第121-123页 |
致谢 | 第123-124页 |
作者简介 | 第124-125页 |