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番茄果胶甲酯酶基因Pmeu1抗灰霉病(Botrytis.cinerea)机理研究

致谢第4-5页
摘要第5-6页
Abstract第6-7页
1 文献综述第11-18页
    1.1 植物细胞壁和果胶甲酯酶第11-12页
    1.2 果胶甲酯酶在植物发育中的功能研究第12-14页
    1.3 果胶甲酯酶与防御作用第14-16页
    1.4 果胶甲酯酶的作用机制第16-17页
    1.5 番茄灰霉病症状第17页
    1.6 番茄灰霉病综合防治技术第17-18页
2 引言第18-19页
    2.1 研究的目的和意义第18页
    2.2 工作假说第18页
    2.3 研究内容第18-19页
3 材料与方法第19-25页
    3.1 试验地点第19页
    3.2 试验材料第19页
    3.3 仪器与试剂第19-20页
        3.3.1 主要仪器第19页
        3.3.2 主要试剂第19-20页
    3.4 试验方法第20-25页
        3.4.1 基因组数据库序列来源第20页
        3.4.2 番茄PME和PMEI基因家族的鉴定第20页
        3.4.3 番茄PME基因的染色体物理位置定位和基因复制第20页
        3.4.4 番茄PME蛋白的生理生化性质分析第20页
        3.4.5 番茄果胶甲酯酶基因保守基序分析第20页
        3.4.6 番茄果胶甲酯酶在果实发育的不同时期的热图分析第20页
        3.4.7 番茄果胶甲酯酶在根茎叶花果中的热图分析第20页
        3.4.8 乙烯处理方法第20-21页
        3.4.9 果胶酯化度的测定方法第21页
        3.4.10 果胶酶活性的测定方法第21-22页
        3.4.11 抗病性测定第22页
        3.4.12 番茄叶片乙烯释放量的测定第22页
        3.4.13 植物总RNA的提取和质量检测第22-23页
        3.4.14 cDNA一链的合成第23页
        3.4.15 普通PCR检测第23-24页
        3.4.16 相关基因的q RT-PCR验证第24-25页
4 结果与分析第25-41页
    4.1 果胶甲酯酶基因和番茄果实成熟软化分析第25-36页
        4.1.1 番茄PME和PMEI基因家族的鉴定第25-26页
        4.1.2 番茄PME基因的染色体定位分析第26-27页
        4.1.3 番茄PME蛋白的生理生化性质分析第27-31页
        4.1.4 番茄果胶甲酯酶基因保守基序分析第31-33页
        4.1.5 番茄果胶甲酯酶基因在根、芽、花、叶和果实中的表达分析第33-34页
        4.1.6 番茄果胶甲酯酶基因在果实中的表达分析第34-35页
        4.1.7 乙烯处理后番茄果胶甲酯酶基因的表达变化第35-36页
    4.2 Botrytis cinerea侵染处理对番茄果胶甲酯酶基因的调控机理第36-41页
        4.2.1 Botrytis cinerea孢子的形态观察第36-37页
        4.2.2 野生型(WT)与反义表达番茄植株(PE1as)Botrytis cinerea侵染后表型分析第37页
        4.2.3Botrytis cinerea侵染之后,果胶甲酯酶基因Pmeu1的表达变化第37-38页
        4.2.4 Botrytis cinerea侵染处理对番茄叶片乙烯释放量的影响第38-39页
        4.2.5 番茄叶片中果胶酯化度的分析第39-40页
        4.2.6 免疫荧光分析第40-41页
5 讨论第41-44页
    5.1 番茄果胶甲酯酶基因对果实成熟软化的影响第41-42页
    5.2 番茄果胶甲酯酶基因Pmeu1抗灰霉病机理探讨第42-44页
6 全文结论第44-45页
7 参考文献第45-49页

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