致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 文献综述 | 第11-18页 |
1.1 植物细胞壁和果胶甲酯酶 | 第11-12页 |
1.2 果胶甲酯酶在植物发育中的功能研究 | 第12-14页 |
1.3 果胶甲酯酶与防御作用 | 第14-16页 |
1.4 果胶甲酯酶的作用机制 | 第16-17页 |
1.5 番茄灰霉病症状 | 第17页 |
1.6 番茄灰霉病综合防治技术 | 第17-18页 |
2 引言 | 第18-19页 |
2.1 研究的目的和意义 | 第18页 |
2.2 工作假说 | 第18页 |
2.3 研究内容 | 第18-19页 |
3 材料与方法 | 第19-25页 |
3.1 试验地点 | 第19页 |
3.2 试验材料 | 第19页 |
3.3 仪器与试剂 | 第19-20页 |
3.3.1 主要仪器 | 第19页 |
3.3.2 主要试剂 | 第19-20页 |
3.4 试验方法 | 第20-25页 |
3.4.1 基因组数据库序列来源 | 第20页 |
3.4.2 番茄PME和PMEI基因家族的鉴定 | 第20页 |
3.4.3 番茄PME基因的染色体物理位置定位和基因复制 | 第20页 |
3.4.4 番茄PME蛋白的生理生化性质分析 | 第20页 |
3.4.5 番茄果胶甲酯酶基因保守基序分析 | 第20页 |
3.4.6 番茄果胶甲酯酶在果实发育的不同时期的热图分析 | 第20页 |
3.4.7 番茄果胶甲酯酶在根茎叶花果中的热图分析 | 第20页 |
3.4.8 乙烯处理方法 | 第20-21页 |
3.4.9 果胶酯化度的测定方法 | 第21页 |
3.4.10 果胶酶活性的测定方法 | 第21-22页 |
3.4.11 抗病性测定 | 第22页 |
3.4.12 番茄叶片乙烯释放量的测定 | 第22页 |
3.4.13 植物总RNA的提取和质量检测 | 第22-23页 |
3.4.14 cDNA一链的合成 | 第23页 |
3.4.15 普通PCR检测 | 第23-24页 |
3.4.16 相关基因的q RT-PCR验证 | 第24-25页 |
4 结果与分析 | 第25-41页 |
4.1 果胶甲酯酶基因和番茄果实成熟软化分析 | 第25-36页 |
4.1.1 番茄PME和PMEI基因家族的鉴定 | 第25-26页 |
4.1.2 番茄PME基因的染色体定位分析 | 第26-27页 |
4.1.3 番茄PME蛋白的生理生化性质分析 | 第27-31页 |
4.1.4 番茄果胶甲酯酶基因保守基序分析 | 第31-33页 |
4.1.5 番茄果胶甲酯酶基因在根、芽、花、叶和果实中的表达分析 | 第33-34页 |
4.1.6 番茄果胶甲酯酶基因在果实中的表达分析 | 第34-35页 |
4.1.7 乙烯处理后番茄果胶甲酯酶基因的表达变化 | 第35-36页 |
4.2 Botrytis cinerea侵染处理对番茄果胶甲酯酶基因的调控机理 | 第36-41页 |
4.2.1 Botrytis cinerea孢子的形态观察 | 第36-37页 |
4.2.2 野生型(WT)与反义表达番茄植株(PE1as)Botrytis cinerea侵染后表型分析 | 第37页 |
4.2.3Botrytis cinerea侵染之后,果胶甲酯酶基因Pmeu1的表达变化 | 第37-38页 |
4.2.4 Botrytis cinerea侵染处理对番茄叶片乙烯释放量的影响 | 第38-39页 |
4.2.5 番茄叶片中果胶酯化度的分析 | 第39-40页 |
4.2.6 免疫荧光分析 | 第40-41页 |
5 讨论 | 第41-44页 |
5.1 番茄果胶甲酯酶基因对果实成熟软化的影响 | 第41-42页 |
5.2 番茄果胶甲酯酶基因Pmeu1抗灰霉病机理探讨 | 第42-44页 |
6 全文结论 | 第44-45页 |
7 参考文献 | 第45-49页 |