| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-44页 |
| 前言 | 第17页 |
| 1 大麦黄矮病毒的研究进展 | 第17-27页 |
| 1.1 寄主范围、传播介体及传播方式 | 第18页 |
| 1.2 病害症状和分布 | 第18-20页 |
| 1.3 大麦黄矮病毒的株系划分 | 第20-21页 |
| 1.4 大麦黄矮病毒的分子生物学特征 | 第21-24页 |
| 1.4.1 病毒的基因组结构 | 第21-23页 |
| 1.4.2 病毒基因组编码的蛋白功能 | 第23-24页 |
| 1.5 大麦黄矮病毒的检测技术 | 第24-26页 |
| 1.5.1 根据症状诊断 | 第24页 |
| 1.5.2 利用病毒传播介体特异性 | 第24页 |
| 1.5.3 电镜观察 | 第24-25页 |
| 1.5.4 血清学方法 | 第25页 |
| 1.5.5 分子生物学方法 | 第25-26页 |
| 1.6 防治策略 | 第26-27页 |
| 1.6.1 鉴定选育抗(耐)病品种 | 第26页 |
| 1.6.2 化学防治 | 第26页 |
| 1.6.3 农业防治 | 第26-27页 |
| 2 小麦黄花叶病毒的研究进展 | 第27-35页 |
| 2.1 发生分布与危害 | 第27-28页 |
| 2.2 症状特点 | 第28-29页 |
| 2.3 发病规律 | 第29-30页 |
| 2.3.1 病原及传播介体 | 第29-30页 |
| 2.3.2 侵染循环 | 第30页 |
| 2.4 小麦黄花叶病毒的分子生物学特征 | 第30-33页 |
| 2.4.1 病毒粒子及其基因组结构 | 第30-32页 |
| 2.4.2 病毒基因组编码的蛋白及其生物学功能 | 第32-33页 |
| 2.5 小麦黄花叶病毒的检测技术 | 第33-34页 |
| 2.5.1 生物学方法 | 第33页 |
| 2.5.2 电镜观察 | 第33页 |
| 2.5.3 血清学方法 | 第33-34页 |
| 2.5.4 分子生物学方法 | 第34页 |
| 2.6 防治策略 | 第34-35页 |
| 2.6.1 选育推广耐、抗病品种 | 第35页 |
| 2.6.2 农业防治措施 | 第35页 |
| 3 单克隆抗体技术及其在植物病毒学中的应用 | 第35-44页 |
| 3.1 抗体的结构及其特性 | 第36-38页 |
| 3.1.1 抗体的基本结构 | 第36-37页 |
| 3.1.2 抗体的精细结构 | 第37-38页 |
| 3.2 单克隆抗体杂交瘤技术 | 第38-41页 |
| 3.2.1 杂交瘤技术基本原理 | 第38-40页 |
| 3.2.2 单克隆抗体杂交瘤技术基本流程 | 第40-41页 |
| 3.3 单克隆抗体在植物病毒学中的应用 | 第41-44页 |
| 第二章 大麦黄矮病毒GAV株系单克隆抗体的制备和应用 | 第44-72页 |
| 1 材料与方法 | 第44-59页 |
| 1.1 病毒材料、培养基和抗体 | 第44-45页 |
| 1.2 大麦黄矮病毒GAV的提纯 | 第45-46页 |
| 1.3 单克隆抗体的制备 | 第46-49页 |
| 1.3.1 小鼠免疫 | 第46页 |
| 1.3.2 细胞融合、培养、筛选 | 第46页 |
| 1.3.3 杂交瘤细胞的单克隆化及扩增 | 第46-47页 |
| 1.3.4 杂交瘤细胞株的冻存和复苏 | 第47页 |
| 1.3.5 腹水抗体制备及纯化 | 第47-48页 |
| 1.3.6 腹水抗体效价的测定 | 第48页 |
| 1.3.7 单克隆抗体类型及亚类鉴定 | 第48-49页 |
| 1.4 BYDV GAV单抗的Western blot分析 | 第49-52页 |
| 1.4.1 SDS-PAGE | 第49-50页 |
| 1.4.2 半干式电转移 | 第50页 |
| 1.4.3 Western blot | 第50-52页 |
| 1.5 血清学方法的建立及单抗的特性分析 | 第52-55页 |
| 1.5.1 ACP-ELISA方法的建立及应用 | 第52-54页 |
| 1.5.2 dot-ELISA方法的建立及应用 | 第54-55页 |
| 1.6 检测BYDV GAV的RT-PCR方法 | 第55-59页 |
| 1.6.1 Trizol法提取总RNA | 第55-56页 |
| 1.6.2 RT-PCR及普通PCR反应 | 第56-59页 |
| 2 实验结果及分析 | 第59-71页 |
| 2.1 大麦黄矮病毒GAV的提纯及抗原制备 | 第59-60页 |
| 2.2 杂交瘤细胞的融合、筛选和克隆 | 第60页 |
| 2.3 腹水抗体制备、效价测定及抗体亚类鉴定 | 第60-61页 |
| 2.4 BYDV GAV单抗的Western blot分析 | 第61页 |
| 2.5 ACP-ELISA方法的建立及其应用 | 第61-65页 |
| 2.5.1 检测小麦中BYDV GAV的ACP-ELISA方法的建立 | 第61-62页 |
| 2.5.2 ACP-ELISA方法分析抗BYDV GAV单抗的特异性 | 第62-63页 |
| 2.5.3 ACP-ELISA方法分析抗BYDV GAV单抗的灵敏度 | 第63-65页 |
| 2.5.4 ACP-ELISA方法检测田间小麦样品中BYDV GAV的应用 | 第65页 |
| 2.6 dot-ELISA方法的建立及其应用 | 第65-71页 |
| 2.6.1 检测小麦和麦蚜中BYDV GAV的dot-ELISA方法的建立 | 第65页 |
| 2.6.2 dot-ELISA方法分析抗BYDV GAV单抗的特异性 | 第65-66页 |
| 2.6.3 dot-ELISA方法分析抗BYDV GAV单抗的灵敏度 | 第66-70页 |
| 2.6.4 dot-ELISA方法检测田间样品中BYDV GAV的应用 | 第70-71页 |
| 3 讨论 | 第71-72页 |
| 第三章 小麦黄花叶病毒单克隆抗体的制备及其检测应用 | 第72-84页 |
| 1 材料与方法 | 第72-76页 |
| 1.1 病毒材料、培养基和抗体 | 第72-73页 |
| 1.2 小麦黄黄花叶病毒的提纯 | 第73页 |
| 1.3 杂交瘤细胞的制备 | 第73-74页 |
| 1.4 腹水制备和抗体纯化 | 第74页 |
| 1.5 抗体类型及亚类鉴定和腹水效价测定 | 第74页 |
| 1.6 WYMV单抗的Western blot分析 | 第74页 |
| 1.7 单抗特性的分析及检测WYMV血清学方法的建立 | 第74-75页 |
| 1.7.1 检测植物病叶中WYMV的血清学方法的建立 | 第74-75页 |
| 1.7.2 ACP-ELISA方法分析抗WYMV单抗的特异性 | 第75页 |
| 1.7.3 ACP-ELISA方法分析抗WYMV单抗的灵敏度 | 第75页 |
| 1.7.4 检测WYMV的dot-ELISA方法的建立及其特异性、灵敏度分析 | 第75页 |
| 1.8 建立的ACP-ELISA和dot-EL1SA血清学方法的田间应用 | 第75页 |
| 1.9 检测WYMV的RT-PCR方法 | 第75-76页 |
| 2 实验结果与分析 | 第76-82页 |
| 2.1 小麦黄花叶病毒的提纯 | 第76页 |
| 2.2 细胞的融合、杂交瘤的筛选和克隆 | 第76-77页 |
| 2.3 腹水抗体制备、效价测定及抗体亚类鉴定 | 第77页 |
| 2.4 单抗的Western blot分析 | 第77-78页 |
| 2.5 ACP-ELISA的建立及应用 | 第78-80页 |
| 2.5.1 ACP-ELISA的建立 | 第78-79页 |
| 2.5.2 ACP-ELISA方法的田间应用 | 第79-80页 |
| 2.6 dot-ELISA的建立及其应用 | 第80-82页 |
| 2.6.1 dot-ELISA的建立 | 第80-81页 |
| 2.6.2 dot-ELISA的田间样品检测 | 第81-82页 |
| 3 讨论 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-97页 |
| 附录A 本论文中所用病毒缩写及中英文对照 | 第97-98页 |
| 附录B 常用生化及分子生物学试剂与仪器 | 第98-99页 |
| 附录C 常用缓冲液及培养基配方 | 第99-103页 |
| 在学期间所取得的科研成果 | 第103页 |
