| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 本文所用缩略词及中文对照 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-16页 |
| 1.1 棉花黄萎病 | 第11-12页 |
| 1.2 植物抗病基因（R 基因）研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3 VIGS 技术及其应用 | 第13-14页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第14-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-29页 |
| 2.1 试验材料 | 第16页 |
| 2.1.1 供试植物材料 | 第16页 |
| 2.1.2 黄萎病菌 | 第16页 |
| 2.1.3 实验所用生化试剂 | 第16页 |
| 2.1.4 实验所用载体和菌株 | 第16页 |
| 2.2 试验方法 | 第16-29页 |
| 2.2.1 cDNA 文库中抗病基因的筛选 | 第16-17页 |
| 2.2.2 抗病基因的实时荧光定量表达分析 | 第17-19页 |
| 2.2.3 GbRvd 的克隆 | 第19-21页 |
| 2.2.4 GbRvd 生物信息学分析 | 第21页 |
| 2.2.5 GbRvd 真核超表达载体的构建 | 第21-23页 |
| 2.2.6 GbRvd 真核表达载体转化农杆菌 | 第23-24页 |
| 2.2.7 Floral dip 法转化拟南芥 | 第24-25页 |
| 2.2.8 拟南芥阳性植株的筛选和分子检测 | 第25-26页 |
| 2.2.9 在 Pima90-53 中的沉默 GbRvd | 第26-28页 |
| 2.2.10 接种病菌后 GbRvd 沉默植株的抗病性鉴定和信号转导相关基因的表达分析 | 第28-29页 |
| 3 结果分析 | 第29-45页 |
| 3.1 棉苗接菌后的 RNA 提取 | 第29-30页 |
| 3.2 利用 qPCR 分析基因在抗感棉花品种中的表达差异 | 第30-31页 |
| 3.3 GbRvd 的克隆与生物信息学分析 | 第31-35页 |
| 3.3.1 GbRvd 的克隆及序列分析 | 第31-32页 |
| 3.3.2 GbRvd 编码蛋白的生物信息学分析 | 第32-35页 |
| 3.4 黄萎病菌胁迫下 GbRvd 在 Pima90-53 中的时空表达分析 | 第35页 |
| 3.5 利用 VIGS 技术对 GbRvd 进行的抗病功能研究 | 第35-41页 |
| 3.5.1 GbRvd VIGS 载体 pYL156-GbRvd 的构建和农杆菌的转化 | 第35-37页 |
| 3.5.2 GbRvd 在 Pima90-53 中的沉默效果的检测 | 第37页 |
| 3.5.3 GbRvd 在 Pima90-53 中沉默后的抗病性鉴定 | 第37-41页 |
| 3.5.4 GbRvd 沉默植株中 EDS1、PR4、PR5 的表达分 | 第41页 |
| 3.6 GbRvd 真核表达载体的构建及农杆菌的遗传转化 | 第41-45页 |
| 3.6.1 GbRvd 真核表达载体 pCAMBIA-35S-MCS-NOS-NPTII-GbRvd 构建和农杆菌转化 | 第41-43页 |
| 3.6.2 GbRvd 基因在拟南芥上的遗传转化 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 4.1 通过 real time PCR 筛选 GbRvd | 第45页 |
| 4.2 GbRvd 的功能预测 | 第45-46页 |
| 4.3 VIGS 在棉花抗病研究上的应用 | 第46页 |
| 4.4 GbRvd 参与激素信号途径的探究 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附录A | 第54-56页 |
| 附录B | 第56-59页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第59-60页 |
| 作者简历 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
