| 目录 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-21页 |
| ABSTRACT | 第21页 |
| 缩写 | 第36-39页 |
| 论文正文 | 第39-102页 |
| 第一章 前言 | 第39-45页 |
| 第二章 材料和方法 | 第45-60页 |
| 1 材料 | 第45-48页 |
| 1.1 仪器 | 第45页 |
| 1.2 抑制性巨噬细胞的培养液配方(500毫升) | 第45-46页 |
| 1.3 试剂 | 第46-47页 |
| 1.4 动物 | 第47页 |
| 1.5 主要消耗性材料 | 第47-48页 |
| 2 实验方法 | 第48-59页 |
| 2.1 培养皿的准备 | 第48页 |
| 2.2 腹腔巨噬细胞的获取 | 第48页 |
| 2.3 单个核细胞的获取 | 第48-50页 |
| 2.3.1 骨髓单个核细胞的获取 | 第48-49页 |
| 2.3.2 血液单个核细胞的获取 | 第49页 |
| 2.3.3 脾脏单个核细胞的获取 | 第49-50页 |
| 2.4 单个核细胞培养成巨噬细胞 | 第50页 |
| 2.5 两种SMφs的表面标志的检测(免疫组化) | 第50-51页 |
| 2.6 SMφs对受体淋巴细胞的抑制作用 | 第51页 |
| 2.7 两种Mφs培养上清液中细胞因子的测定 | 第51-52页 |
| 2.8 SMφs诱导同种异体淋巴细胞的凋亡(DNA laddering kit) | 第52页 |
| 2.9 SMφs外周血和门静脉内注射 | 第52-53页 |
| 2.9.1 SMφs外周血注射 | 第52-53页 |
| 2.9.2 SMφs门静脉内注射 | 第53页 |
| 2.10 大鼠异体心脏腹腔移植 | 第53-54页 |
| 2.10.1 供体处理 | 第53页 |
| 2.10.2 受体心脏移植 | 第53-54页 |
| 2.10.3 移植后的结果观察方法 | 第54页 |
| 2.11 耐受大鼠的皮肤移植(检测耐受是否是特异性) | 第54-55页 |
| 2.12 耐受大鼠淋巴细胞对供体抗原的反应 | 第55-56页 |
| 2.13 血液中CD4+CD25+淋巴细胞的表面标志的检测(FACS) | 第56页 |
| 2.14 标本常规苏木精-伊红染色及免疫组化测定NK、Mφ、CD4、CD8、FasL、Mn4、I1.69、CD25在移植心脏内的分布 | 第56-57页 |
| 2.14.1 常规苏木精-伊红染色 | 第56-57页 |
| 2.14.2 冰冻组织的免疫组化染色 | 第57页 |
| 2.15 血清中各种细胞因子的测定(ELISA法测定大鼠IL-2、IL-4、IL-10、INF-γ、TGF-β) | 第57-58页 |
| 2.16 RT-PCR测定移植物中各种细胞因子的mRNA水平的表达 | 第58页 |
| 2.17 耐受心脏的再移植 | 第58-59页 |
| 3 统计方法 | 第59-60页 |
| 第三章 结果 | 第60-85页 |
| 第一部分 SMφs的免疫特性的研究 | 第60-70页 |
| 1 培养的SMφs形态及增生的观察 | 第60页 |
| 2 SMφs表型的测定 | 第60-63页 |
| 3 SMφs与移植耐受有关的表面抗原测定 | 第63-66页 |
| 4 SMφs分别与受体及第三组淋巴细胞的MLR | 第66-67页 |
| 5 两种培养细胞上清液中各种细胞因子的测定 | 第67-69页 |
| 6 SMφs诱导同种异体淋巴细胞的凋亡 | 第69-70页 |
| 第二部分 SMφs诱导Lewis→DA心脏移植的模型建立和机理研究 | 第70-85页 |
| 1 模型建立 | 第70-74页 |
| 1.1 SMφs对腹腔内同种异体移植心脏的影响 | 第70-72页 |
| 1.2 本模型移植耐受的特异性研究 | 第72-74页 |
| 1.2.1 耐受受体DA的淋巴细胞对供体抗原的反应 | 第72-73页 |
| 1.2.2 耐受大鼠皮肤移植检测耐受特异性 | 第73-74页 |
| 2 机理研究 | 第74-85页 |
| 2.1 NOS、IDO的抑制剂及FasL的抗体对SMφs诱导移植耐受的影响 | 第74-75页 |
| 2.2 外周血CD25在CD4+T细胞中的表达 | 第75-76页 |
| 2.3 外周血清中各种细胞因子的测定(ELISA方法测定IL-2、IL-4、IL-10、INF-γ、TGF-β1) | 第76-79页 |
| 2.4 RT-PCR法检测移植物中细胞因子mRNA的表达 | 第79-80页 |
| 2.5 同种异体移植物的免疫组织化学变化 | 第80-81页 |
| 2.6 耐受心脏的再移植 | 第81-85页 |
| 第四章 讨论 | 第85-95页 |
| 1 SMφs诱导供体特异性心脏移植耐受的模型建立 | 第86-88页 |
| 1.1 耐受的形成具有时间和剂量依赖性 | 第86-88页 |
| 1.1.1 移植耐受的成功与细胞的培养时间有关 | 第87页 |
| 1.1.2 移植耐受的成功与Mφs的数量密切相关 | 第87页 |
| 1.1.3 注射细胞后经过一定的时间进行心脏移植才能获得移植耐受 | 第87页 |
| 1.1.4 不同来源的Mφs诱导耐受的能力有差异 | 第87-88页 |
| 1.2 该模型中耐受的形成是特异性的 | 第88页 |
| 1.2.1 心脏移植 | 第88页 |
| 1.2.2 混合淋巴细胞反应 | 第88页 |
| 1.2.3 皮肤移植 | 第88页 |
| 2 SMφs诱导移植耐受的可能机理 | 第88-95页 |
| 2.1 SMφs通过产生NOS、IDO抑制淋巴细胞增生而诱导移植耐受? | 第88-89页 |
| 2.2 SMφs细胞表面分子对移植耐受的影响 | 第89-91页 |
| 2.3 CD4+CD25+调节性T细胞在本实验中的作用 | 第91-92页 |
| 2.4 血清及移植物中各种细胞因子在本模型中作用 | 第92-93页 |
| 2.5 局部环境对移植物的影响 | 第93-95页 |
| 第五章 结论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-102页 |
| 综述 CD4+CD25+调节性T细胞 | 第102-112页 |
| 致谢 | 第112页 |
