摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 引言 | 第9-16页 |
1.1 葡萄霜霉病的危害与分布 | 第9-12页 |
1.1.1 葡萄霜霉病的发生与症状 | 第9-10页 |
1.1.2 葡萄霜霉病菌简述 | 第10-12页 |
1.2 分子生物学的研究和应用 | 第12-14页 |
1.2.1 常用分子生物学方法介绍 | 第13-14页 |
1.2.2 国内外研究现状 | 第14页 |
1.3 本研究的意义 | 第14-16页 |
2 材料和方法 | 第16-26页 |
2.1 供试材料 | 第16-17页 |
2.1.1 主要试剂 | 第16页 |
2.1.2 供试培养基及试剂配制 | 第16-17页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第17页 |
2.2 葡萄霜霉病菌的采集 | 第17-20页 |
2.2.1 供试的葡萄霜霉菌材料及来源 | 第17-19页 |
2.2.2 葡萄霜霉病菌培养体系的优化 | 第19页 |
2.2.3 葡萄霜霉病菌单孢分离 | 第19-20页 |
2.3 葡萄霜霉病菌的分子测定 | 第20-24页 |
2.3.1 病菌基因组 DNA 提取 | 第20-21页 |
2.3.2 DNA 检测 | 第21页 |
2.3.3 筛选适合遗传分化研究的葡萄霜霉菌引物 | 第21页 |
2.3.4 葡萄霜霉菌 PCR 扩增 | 第21-22页 |
2.3.5 PCR 产物纯化 | 第22-23页 |
2.3.6 PCR 产物与 pMD18-T 载体的连接 | 第23页 |
2.3.7 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23页 |
2.3.8 连接产物转化感受态细胞 | 第23-24页 |
2.3.9 PCR 验证阳性克隆 | 第24页 |
2.3.10 样品测序 | 第24页 |
2.4 数据统计分析 | 第24-26页 |
2.4.1 序列整理 | 第24-25页 |
2.4.2 葡萄霜霉菌基因核苷酸多态性分析 | 第25页 |
2.4.3 遗传发育树分析 | 第25-26页 |
3 结果与分析 | 第26-34页 |
3.1 建立单孢分离、扩繁体系 | 第26-27页 |
3.1.1 培养体系优化 | 第26页 |
3.1.2 单孢分离培养 | 第26-27页 |
3.2 葡萄霜霉病菌的分子评价 | 第27-29页 |
3.2.1 葡萄霜霉病菌基因组 DNA 检测 | 第27-28页 |
3.2.2 筛选适合遗传分化的研究引物 | 第28页 |
3.2.3 单克隆检测 | 第28-29页 |
3.3 遗传分化分析 | 第29-34页 |
3.3.1 P.viticola 基因序列的同源性 | 第29-30页 |
3.3.2 P.viticola 基因序列多态性分析 | 第30-32页 |
3.3.3 遗传发育树分析 | 第32-34页 |
4 讨论 | 第34-37页 |
4.1 建立葡萄霜霉病菌单孢分离体系要素 | 第34页 |
4.2 葡萄霜霉病种群的遗传分化 | 第34-37页 |
4.2.1 多基因型技术在遗传分化研究中的可靠性和可行性 | 第35页 |
4.2.2 系统发育树与遗传分化的关系 | 第35-36页 |
4.2.3 寄主扩张和农业化栽培与遗传分化的关系 | 第36-37页 |
5 结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-43页 |
在读期间发表的学术论文 | 第43-44页 |
作者简历 | 第44-45页 |