| 主要缩略词 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 1 材料 | 第13-17页 |
| ·细胞和质粒 | 第13-14页 |
| ·主要试剂和引物 | 第14-15页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·部分试剂的配置 | 第16-17页 |
| 2 方法 | 第17-40页 |
| ·获得WWOX,P73a基因 | 第17-20页 |
| ·引物设计 | 第18页 |
| ·聚合酶链反应(PCR) | 第18-19页 |
| ·鉴定PCR产物 | 第19-20页 |
| ·WWOX-PEGM-T和P73a-PEGM-T质粒的构建 | 第20-27页 |
| ·PCR产物的纯化与回收 | 第20-21页 |
| ·WWOX、P73a基因片段与PEGM-T easy载体的连接 | 第21-22页 |
| ·连接产物的转化 | 第22-25页 |
| ·TA克隆的酶切鉴定 | 第25-27页 |
| ·WWOX、P73a基因片段的亚克隆 | 第27-30页 |
| ·亚克隆原理 | 第27页 |
| ·载体片段与WWOX、P73a基因片段的获得 | 第27-28页 |
| ·慢病毒载体与目的基因片段连接 | 第28页 |
| ·重组亚克隆的鉴定 | 第28-30页 |
| ·重组慢病毒的包装、浓缩及滴度测定 | 第30-33页 |
| ·WWOX-PCDH、P73a-PCDH分别转染293T细胞包装并浓缩慢病毒颗粒 | 第30-32页 |
| ·病毒滴度测定 | 第32-33页 |
| ·慢病毒介导的人卵巢癌细胞(PEO1)WWOX、P73a的表达 | 第33-40页 |
| ·介导细胞系的选择 | 第33-34页 |
| ·慢病毒介导的人卵巢癌细胞(PEO1)WWOX、P73a的表达 | 第34-35页 |
| ·检测感染效率 | 第35页 |
| ·慢病毒介导感染PEO1细胞后WWOX、P73a mRNA表达测定 | 第35-37页 |
| ·慢病毒介导感染PEO1细胞后其WWOX、P73a蛋白表达测定 | 第37-40页 |
| 3 结果 | 第40-49页 |
| ·WWOX及P73a基因片段的扩增 | 第40-41页 |
| ·TA克隆质粒酶切鉴定结果 | 第41页 |
| ·慢病毒重组质粒酶切鉴定结果 | 第41-42页 |
| ·慢病毒重组质粒WWOX-PCDH、P73a-PCDH PCR测序及比对结果 | 第42-46页 |
| ·四质粒包装系统转染293T细胞GFP表达及病毒滴度测定 | 第46-47页 |
| ·WWOX-PCDH转染293T细胞结果 | 第46-47页 |
| ·慢病毒滴度测定结果 | 第47页 |
| ·重组慢病毒介导感染PEO1细胞后GFP的表达与感染效率 | 第47-48页 |
| ·鉴定慢病毒颗粒Lenti WWOX与Lenti P73a感染卵巢癌PEO1细胞后表达 | 第48-49页 |
| ·感染慢病毒颗粒后各组PEO1细胞mRNA表达结果 | 第48页 |
| ·感染慢病毒颗粒后各组PEO1细胞Western Blotting表达情况 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 综述 | 第52-82页 |
| 参考文献 | 第82-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
