| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 植物转录因子研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2 植物bHLH转录因子研究进展 | 第13-19页 |
| 1.2.1 bHLH转录因子的结构 | 第13-14页 |
| 1.2.2 bHLH转录因子的分类 | 第14-15页 |
| 1.2.3 bHLH转录因子的功能 | 第15-19页 |
| 1.3 火龙果分子生物学研究进展 | 第19-21页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 火龙果HubHLH1-like基因的克隆、序列分析及亚细胞定位 | 第22-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第23页 |
| 2.1.4 引物序列 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-32页 |
| 2.2.1 植物总RNA提取 | 第24页 |
| 2.2.2 第一链cDNA的合成及检测 | 第24-25页 |
| 2.2.3 合成RACE-Ready cDNA | 第25-26页 |
| 2.2.4 RACE-PCR扩增 | 第26-27页 |
| 2.2.5 RACE产物纯化 | 第27页 |
| 2.2.6 PCR产物连接与转化 | 第27-28页 |
| 2.2.7 cDNA全长序列的获得 | 第28-29页 |
| 2.2.8 HubHLH1-like基因生物信息学分析 | 第29页 |
| 2.2.9 HubHLH1-like亚细胞定位 | 第29-32页 |
| 2.3 结果与分析 | 第32-44页 |
| 2.3.1 总RNA提取及反转录检测 | 第32页 |
| 2.3.2 HubHLH1-like基因全长克隆 | 第32-33页 |
| 2.3.3 HubHLH1-like基因cDNA全长及ORF的获得 | 第33-34页 |
| 2.3.4 HubHLH1-like的生物信息学分析 | 第34-42页 |
| 2.3.5 HubHLH1-like亚细胞定位结果 | 第42-44页 |
| 2.4 讨论 | 第44-49页 |
| 2.4.1 HubHLH1-like基因的克隆分析 | 第44-46页 |
| 2.4.2 HubHLH1-like亚细胞定位分析 | 第46-49页 |
| 第三章 HubHLH1-like的表达调控与功能分析 | 第49-74页 |
| 3.1 实验材料 | 第49-51页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第49页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第49-50页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第50页 |
| 3.1.4 载体和菌株 | 第50页 |
| 3.1.5 实验所用培养基 | 第50页 |
| 3.1.6 引物序列 | 第50-51页 |
| 3.2 实验方法 | 第51-58页 |
| 3.2.1 HubHLH1-like基因的实时定量分析 | 第51-52页 |
| 3.2.2 添加酶切位点设计引物 | 第52-53页 |
| 3.2.3 目的片段的T载体连接与转化培养 | 第53-55页 |
| 3.2.4 植物表达载体的构建 | 第55-56页 |
| 3.2.5 农杆菌感受态的制备 | 第56-57页 |
| 3.2.6 冻融法转化农杆菌 | 第57页 |
| 3.2.7 农杆菌的培养及活化 | 第57-58页 |
| 3.2.8 叶盘法转化烟草 | 第58页 |
| 3.2.9 转基因植株的分子检测 | 第58页 |
| 3.3 结果与分析 | 第58-68页 |
| 3.3.1 逆境胁迫下HubHLH1-like实时荧光定量PCR检测 | 第58-61页 |
| 3.3.2 植物过表达载体pCAMBIA1301-HubHLH1-like的获得 | 第61-65页 |
| 3.3.3 HubHLH1-like转基因植株的获得 | 第65页 |
| 3.3.4 HubHLH1-like基因过表达烟草植株的筛选与检测 | 第65-66页 |
| 3.3.5 转基因植株PCR检测及qPCR检测 | 第66-68页 |
| 3.4 讨论 | 第68-74页 |
| 3.4.1 基因的表达方法分析 | 第68-69页 |
| 3.4.2 HubHLH1-like基因表达分析 | 第69-71页 |
| 3.4.3 表达载体构建策略 | 第71-72页 |
| 3.4.4 烟草遗传转化与检测 | 第72-74页 |
| 第四章 结论与展望 | 第74-76页 |
| 4.1 主要结论 | 第74页 |
| 4.2 创新点 | 第74-75页 |
| 4.3 后续工作展望 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 附录 | 第85-86页 |
