| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1.1 光敏分子 | 第12-14页 |
| 1.1.1 偶氮苯 | 第13页 |
| 1.1.2 芪类化合物 | 第13-14页 |
| 1.1.3 螺吡喃 | 第14页 |
| 1.1.4 二芳基乙烯 | 第14页 |
| 1.1.5 俘精酸酐 | 第14页 |
| 1.2 设计偶氮苯分子开关 | 第14-17页 |
| 1.2.1 在光异构化时增加端到端的距离变化 | 第15页 |
| 1.2.2 修饰光开关的波长 | 第15-16页 |
| 1.2.3 修饰光开关的热松弛速率 | 第16-17页 |
| 1.3 偶氮苯衍生物光控生物分子 | 第17-23页 |
| 1.3.1 光控核酸 | 第17-19页 |
| 1.3.2 光控脂质 | 第19页 |
| 1.3.3 光控肽和蛋白质 | 第19-23页 |
| 1.4 本课题的研究意义及研究内容 | 第23-25页 |
| 第2章 光控开关的合成与表征 | 第25-37页 |
| 2.1 前言 | 第25页 |
| 2.2 仪器、试剂和耗材 | 第25-26页 |
| 2.2.1 仪器 | 第25-26页 |
| 2.2.2 试剂和耗材 | 第26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-28页 |
| 2.3.1 BSBCA的合成 | 第26-28页 |
| 2.3.2 BSBCA的紫外-可见吸收光谱测定 | 第28页 |
| 2.3.3 BSBCA随蓝光和紫外光照射时间变化 | 第28页 |
| 2.3.4 BSBCA的暗恢复分析 | 第28页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第28-36页 |
| 2.4.1 合成产物的质谱鉴定 | 第28-30页 |
| 2.4.2 合成产物的核磁氢谱鉴定 | 第30-33页 |
| 2.4.3 合成产物的核磁碳谱鉴定 | 第33-35页 |
| 2.4.4 BSBCA的紫外可见吸收光谱分析 | 第35页 |
| 2.4.5 BSBCA随蓝光和紫外光照射时间变化 | 第35-36页 |
| 2.4.6 顺式构型的BSBCA的暗恢复分析 | 第36页 |
| 2.5 小结 | 第36-37页 |
| 第3章 LipK107的定点突变及表达纯化 | 第37-48页 |
| 3.1 前言 | 第37页 |
| 3.2 仪器、试剂和耗材 | 第37-39页 |
| 3.2.1 仪器 | 第37-38页 |
| 3.2.2 试剂和耗材 | 第38-39页 |
| 3.3 菌株和质粒 | 第39页 |
| 3.4 培养基和缓冲液 | 第39-40页 |
| 3.4.1 培养基配方 | 第39页 |
| 3.4.2 缓冲液配方 | 第39-40页 |
| 3.5 实验方法 | 第40-45页 |
| 3.5.1 LipK107突变位点设计以及定点突变 | 第40-43页 |
| 3.5.2 Lip K107突变后表达菌株的构建 | 第43-44页 |
| 3.5.3 Lip K107突变酶的纯化 | 第44-45页 |
| 3.6 结果与讨论 | 第45-47页 |
| 3.6.1 Lip K107的定点突变 | 第45页 |
| 3.6.2 Lip K107及突变酶的诱导表达 | 第45-46页 |
| 3.6.3 Lip K107及突变酶的纯化 | 第46-47页 |
| 3.7 小结 | 第47-48页 |
| 第4章 最佳光控效果突变酶的筛选以及修饰酶的表征 | 第48-60页 |
| 4.1 前言 | 第48页 |
| 4.2 仪器、试剂和耗材 | 第48-49页 |
| 4.2.1 仪器 | 第48-49页 |
| 4.2.2 试剂和耗材 | 第49页 |
| 4.2.3 缓冲液配方 | 第49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49-53页 |
| 4.3.1 BSBCA与i-i+11突变酶的定点反应 | 第49-50页 |
| 4.3.2 修饰酶水解活力测定 | 第50-51页 |
| 4.3.3 筛选最佳光控效果的突变酶 | 第51页 |
| 4.3.4 C127C138-BSBCA的分子量分析 | 第51-52页 |
| 4.3.5 BSBCA-C127C138的胰酶酶切后的桥连分析 | 第52页 |
| 4.3.6 BSBCA-C127C138的UV-VIS光谱分析 | 第52页 |
| 4.3.7 反式构型的C127C138-BSBCA随蓝光和紫外光照射时间变化 | 第52页 |
| 4.3.8 反式构型的BSBCA-C127C138的热松弛分析 | 第52-53页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第53-59页 |
| 4.4.1 突变酶、原酶以及修饰酶的相对酶活力 | 第53页 |
| 4.4.2 突变酶的光控酶活效果比较 | 第53-55页 |
| 4.4.3 BSBCA-C127C138的分子量分析 | 第55-56页 |
| 4.4.4 BSBCA-C127C138的胰酶酶切后的桥连分析 | 第56-57页 |
| 4.4.5 BSBCA-C127C138的UV-VIS光谱分析 | 第57-58页 |
| 4.4.6 反式构型的C127C138-BSBCA随蓝光和紫外光照射时间变化 | 第58-59页 |
| 4.4.7 反式构型的BSBCA-C127C138的热松弛分析 | 第59页 |
| 4.5 小结 | 第59-60页 |
| 第5章 可逆光控脂肪酶的活性评价 | 第60-65页 |
| 5.1 前言 | 第60页 |
| 5.2 仪器、试剂和耗材 | 第60-61页 |
| 5.2.1 仪器 | 第60页 |
| 5.2.2 试剂和耗材 | 第60-61页 |
| 5.3 实验方法 | 第61-62页 |
| 5.3.1 光控BSBCA-C127C138的构象分析 | 第61页 |
| 5.3.2 反式构型的BSBCA-C127C138随蓝光照射的酶活变化 | 第61页 |
| 5.3.3 反式构型的BSBCA-C127C138在黑暗中的酶活恢复变化 | 第61页 |
| 5.3.4 BSBCA-C127C138在紫外光-蓝光交替照射的变化 | 第61页 |
| 5.3.5 BSBCA-C127C138在紫外光-黑暗交替照射的变化 | 第61-62页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第62-64页 |
| 5.4.1 光控BSBCA-C127C138的构象分析 | 第62页 |
| 5.4.2 顺式构型的BSBCA-C127C138随蓝光照射的酶活变化 | 第62-63页 |
| 5.4.3 顺式构型的BSBCA-C127C138在黑暗中的酶活恢复变化 | 第63页 |
| 5.4.4 BSBCA-C127C138在紫外光-蓝光交替照射的变化 | 第63-64页 |
| 5.4.5 BSBCA-C127C138在紫外光-黑暗交替照射的变化 | 第64页 |
| 5.5 小结 | 第64-65页 |
| 第6章 总结与展望 | 第65-67页 |
| 6.1 结论 | 第65-66页 |
| 6.2 展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
