中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
序言 | 第10-12页 |
1 文献综述 | 第12-25页 |
1.1 兴奋剂及兴奋剂的检测 | 第12-21页 |
1.1.1 现代奥运会的发展及兴奋剂问题的出现 | 第12-13页 |
1.1.2 兴奋剂问题 | 第13-16页 |
1.1.3 基因兴奋剂 | 第16-20页 |
1.1.4 兴奋剂的检测 | 第20-21页 |
1.2 胰岛素样生长因子(IGF)概述 | 第21-23页 |
1.2.1 IGF-Ⅰ | 第21-22页 |
1.2.2 IGF-Ⅰ的生理作用 | 第22-23页 |
1.2.3 基因兴奋剂IGF-Ⅰ | 第23页 |
1.3 实时荧光定量PCR技术 | 第23-24页 |
1.4 总结 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-37页 |
2.1 实验动物及分组 | 第25页 |
2.2 携带人IGF-Ⅰ基因pTR-IGF-Ⅰ-GFP质粒的构建 | 第25-28页 |
2.3 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒的包装、纯化及滴度测定 | 第28-32页 |
2.3.1 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒的包装 | 第28-29页 |
2.3.2 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒的纯化 | 第29页 |
2.3.3 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒蛋白外壳的鉴定 | 第29-30页 |
2.3.4 Western-blot检测rAAV介导的IGF-Ⅰ表达 | 第30页 |
2.3.5 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒滴度的测定 | 第30-32页 |
2.4 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒肌肉注射 | 第32页 |
2.5 实验动物的取材及测试指标 | 第32页 |
2.5.1 血液相关指标的取材 | 第32页 |
2.5.2 肌肉相关指标的取材 | 第32页 |
2.6 ITC模版的建立:引物-探针的设计 | 第32-34页 |
2.7 Real time PCR(探针法)体系及条件 | 第34-35页 |
2.7.1 Real time PCR仪器检测限度测定 | 第34页 |
2.7.2 样品DNA检测体系及反应条件 | 第34-35页 |
2.8 实验所需主要仪器及试剂 | 第35-36页 |
2.8.1 实验主要仪器 | 第35-36页 |
2.8.2 实验主要试剂 | 第36页 |
2.9 数据统计处理 | 第36-37页 |
3 实验结果 | 第37-43页 |
3.1 pTR-IGF-Ⅰ-GFP质粒构建鉴定结果 | 第37页 |
3.2 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒包装及鉴定结果 | 第37-38页 |
3.3 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒滴度测定结果 | 第38-39页 |
3.4 Real time PCR仪检测精度测定结果 | 第39-40页 |
3.5 实验结果特异性、可信性及重复性检测结果 | 第40-41页 |
3.6 不同取材时间、不同取材组织Real time PCR实验结果 | 第41-42页 |
3.7 不同取材量Real time PCR实验结果 | 第42-43页 |
4 分析与讨论 | 第43-49页 |
4.1 腺相关病毒(AAV)作为基因导入体内载体的可行性 | 第43-45页 |
4.2 实验结果的特异性、可信性及重复性 | 第45-46页 |
4.3 不同取材时间、不同取材组织对实验检测结果的影响 | 第46-47页 |
4.4 不同取材量对试验检测结果的影响 | 第47-48页 |
4.5 本实验的创新点及实验不足之处 | 第48-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
6 参考文献 | 第50-56页 |
7 攻读硕士学位期间公开发表论文 | 第56-57页 |
8 附录 | 第57-58页 |
9 致谢 | 第58-59页 |