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实时荧光定量PCR检测内、外源IGF-Ⅰ表达的实验研究

中文摘要第4-6页
abstract第6-7页
序言第10-12页
1 文献综述第12-25页
    1.1 兴奋剂及兴奋剂的检测第12-21页
        1.1.1 现代奥运会的发展及兴奋剂问题的出现第12-13页
        1.1.2 兴奋剂问题第13-16页
        1.1.3 基因兴奋剂第16-20页
        1.1.4 兴奋剂的检测第20-21页
    1.2 胰岛素样生长因子(IGF)概述第21-23页
        1.2.1 IGF-Ⅰ第21-22页
        1.2.2 IGF-Ⅰ的生理作用第22-23页
        1.2.3 基因兴奋剂IGF-Ⅰ第23页
    1.3 实时荧光定量PCR技术第23-24页
    1.4 总结第24-25页
2 材料与方法第25-37页
    2.1 实验动物及分组第25页
    2.2 携带人IGF-Ⅰ基因pTR-IGF-Ⅰ-GFP质粒的构建第25-28页
    2.3 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒的包装、纯化及滴度测定第28-32页
        2.3.1 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒的包装第28-29页
        2.3.2 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒的纯化第29页
        2.3.3 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒蛋白外壳的鉴定第29-30页
        2.3.4 Western-blot检测rAAV介导的IGF-Ⅰ表达第30页
        2.3.5 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒滴度的测定第30-32页
    2.4 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒肌肉注射第32页
    2.5 实验动物的取材及测试指标第32页
        2.5.1 血液相关指标的取材第32页
        2.5.2 肌肉相关指标的取材第32页
    2.6 ITC模版的建立:引物-探针的设计第32-34页
    2.7 Real time PCR(探针法)体系及条件第34-35页
        2.7.1 Real time PCR仪器检测限度测定第34页
        2.7.2 样品DNA检测体系及反应条件第34-35页
    2.8 实验所需主要仪器及试剂第35-36页
        2.8.1 实验主要仪器第35-36页
        2.8.2 实验主要试剂第36页
    2.9 数据统计处理第36-37页
3 实验结果第37-43页
    3.1 pTR-IGF-Ⅰ-GFP质粒构建鉴定结果第37页
    3.2 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒包装及鉴定结果第37-38页
    3.3 rAAV2-IGF-Ⅰ重组腺相关病毒滴度测定结果第38-39页
    3.4 Real time PCR仪检测精度测定结果第39-40页
    3.5 实验结果特异性、可信性及重复性检测结果第40-41页
    3.6 不同取材时间、不同取材组织Real time PCR实验结果第41-42页
    3.7 不同取材量Real time PCR实验结果第42-43页
4 分析与讨论第43-49页
    4.1 腺相关病毒(AAV)作为基因导入体内载体的可行性第43-45页
    4.2 实验结果的特异性、可信性及重复性第45-46页
    4.3 不同取材时间、不同取材组织对实验检测结果的影响第46-47页
    4.4 不同取材量对试验检测结果的影响第47-48页
    4.5 本实验的创新点及实验不足之处第48-49页
5 结论第49-50页
6 参考文献第50-56页
7 攻读硕士学位期间公开发表论文第56-57页
8 附录第57-58页
9 致谢第58-59页

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