| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词对照表 | 第14-16页 |
| 第1章 绪论 | 第16-26页 |
| 1.1 植物转录因子简介 | 第16-18页 |
| 1.2 OFPs转录因子的发现、结构及其功能 | 第18-20页 |
| 1.2.1 OFPs转录因子的发现 | 第18-19页 |
| 1.2.2 OFPs转录因子的结构 | 第19页 |
| 1.2.3 OFPs转录因子的功能 | 第19-20页 |
| 1.3 OFPs转录因子与植物激素的关系 | 第20-23页 |
| 1.3.1 OFPs转录因子与赤霉素的关系 | 第20-21页 |
| 1.3.2 OFPs转录因子与油菜素内酯的关系 | 第21-22页 |
| 1.3.3 OFPs转录因子与乙烯的关系 | 第22-23页 |
| 1.4 水稻OsOFP22转录因子的研究现状 | 第23页 |
| 1.5 Crispr/Cas9系统的介绍 | 第23-24页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第24-26页 |
| 第2章 构建Crispr/Cas9载体 | 第26-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 菌株材料 | 第26页 |
| 2.1.2 植物材料 | 第26页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第26页 |
| 2.1.4 实验药品及试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.5 引物 | 第27-28页 |
| 2.1.6 基因Locs号 | 第28页 |
| 2.1.7 软件 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-39页 |
| 2.2.1 设计sgRNA | 第29页 |
| 2.2.2 提取植物基因组DNA | 第29-30页 |
| 2.2.3 琼脂糖凝胶制作及核酸电泳 | 第30-31页 |
| 2.2.4 扩增目的片段 | 第31-33页 |
| 2.2.5 纯化目的片段 | 第33页 |
| 2.2.6 体外验证靶点效率 | 第33-35页 |
| 2.2.7 载体构建转化大肠杆菌及测序 | 第35-36页 |
| 2.2.8 制备电击法农杆菌感受态 | 第36-37页 |
| 2.2.9 电击法转化农杆菌 | 第37-38页 |
| 2.2.10 鉴定农杆菌阳性克隆 | 第38-39页 |
| 2.3 结果与分析 | 第39-45页 |
| 2.3.1 设计基因的靶点RNA | 第39-40页 |
| 2.3.2 Kitaake基因组DNA提取 | 第40页 |
| 2.3.3 目的基因PCR产物 | 第40-41页 |
| 2.3.4 体外检测靶点效率 | 第41-42页 |
| 2.3.5 Crispr/Cas9载体构建 | 第42-43页 |
| 2.3.6 鉴定大肠杆菌阳性克隆 | 第43-44页 |
| 2.3.7 鉴定农杆菌阳性克隆 | 第44-45页 |
| 2.4 结论与讨论 | 第45-46页 |
| 2.4.1 结论 | 第45页 |
| 2.4.2 讨论 | 第45-46页 |
| 第3章 遗传转化、阳性苗鉴定及表型初步分析 | 第46-67页 |
| 3.1 实验材料 | 第46-53页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第46页 |
| 3.1.2 菌株 | 第46页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第46页 |
| 3.1.4 实验药品 | 第46-47页 |
| 3.1.5 溶液的配制 | 第47-53页 |
| 3.1.6 引物 | 第53页 |
| 3.2 实验方法 | 第53-60页 |
| 3.2.1 遗传转化水稻愈伤 | 第53-55页 |
| 3.2.2 潮霉素筛选水稻转基因种子 | 第55-56页 |
| 3.2.3 提取转基因和野生型水稻DNA | 第56页 |
| 3.2.4 提取水稻RNA及反转录 | 第56-58页 |
| 3.2.5 实时定量荧光PCR | 第58页 |
| 3.2.6 扩增插入基因组的片段 | 第58-59页 |
| 3.2.7 油菜素内酯类化合物处理BL6 | 第59-60页 |
| 3.3 结果与分析 | 第60-66页 |
| 3.3.1 遗传转化水稻愈伤过程 | 第60-61页 |
| 3.3.2 水稻DNA提取结果 | 第61页 |
| 3.3.3 PCR扩增插入水稻基因组的Crispr/Cas9载体片段 | 第61-62页 |
| 3.3.4 BL5、BL6和野生型的总RNA提取 | 第62页 |
| 3.3.5 BL5、BL6中OsOFPs转录水平的变化 | 第62-63页 |
| 3.3.6 BL5、BL6 T1代植株生长 | 第63-65页 |
| 3.3.7 BL处理引起BL6幼苗叶片倾角变大 | 第65-66页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第66-67页 |
| 3.4.1 结论 | 第66页 |
| 3.4.2 讨论 | 第66-67页 |
| 第4章 OsOFP22转录因子转录活性的确定 | 第67-75页 |
| 4.1 实验材料 | 第67-69页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第67页 |
| 4.1.2 菌株与载体 | 第67-68页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第68页 |
| 4.1.4 实验药品及试剂 | 第68页 |
| 4.1.5 溶液的配制 | 第68-69页 |
| 4.2 实验方法 | 第69-72页 |
| 4.2.1 扩繁DH5α阳性克隆及质粒提取 | 第69-70页 |
| 4.2.2 制作琼脂糖凝胶及核酸电泳 | 第70页 |
| 4.2.3 拟南芥点种和移苗 | 第70-71页 |
| 4.2.4 游离拟南芥原生质体及转化 | 第71-72页 |
| 4.2.5 测定LUC和GUS值 | 第72页 |
| 4.3 结果与分析 | 第72-74页 |
| 4.3.1 质粒电泳结果 | 第72-73页 |
| 4.3.2 GUS相对活性 | 第73-74页 |
| 4.4 结论与讨论 | 第74-75页 |
| 4.4.1 结论 | 第74页 |
| 4.4.2 讨论 | 第74-75页 |
| 第5章 OsOFP22转录因子调节的下游基因鉴定 | 第75-83页 |
| 5.1 实验材料 | 第75-78页 |
| 5.1.1 推断的下游基因的Qpcr引物 | 第75-77页 |
| 5.1.2 推断的下游基因的Lcos号 | 第77-78页 |
| 5.1.3 植物材料 | 第78页 |
| 5.1.4 实验仪器 | 第78页 |
| 5.1.5 实验药品 | 第78页 |
| 5.1.6 溶液的配制 | 第78页 |
| 5.2 实验方法 | 第78-79页 |
| 5.2.1 水稻催芽及提取总RNA | 第78页 |
| 5.2.2 实时荧光定量PCR及数据分析 | 第78-79页 |
| 5.3 结果与分析 | 第79-82页 |
| 5.3.1 OsOFP22过表达、BL6和野生型水稻总RNA结果 | 第79页 |
| 5.3.2 推断的下游基因在OsOFP22过表达和BL6幼苗中的相对表达量 | 第79-82页 |
| 5.4 结论与讨论 | 第82-83页 |
| 5.4.1 结论 | 第82页 |
| 5.4.2 讨论 | 第82-83页 |
| 第6章 结论与展望 | 第83-85页 |
| 6.1 结论 | 第83页 |
| 6.2 展望 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-95页 |
| 作者简介 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
