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柑橘遗传图谱构建及类胡萝卜素代谢调控研究

摘要第7-10页
Abstract第10-13页
缩略词表第14-16页
第一章 前言第16-34页
    1. 课题的提出第16-17页
    2. 前人研究进展第17-32页
        2.1 植物类胡萝卜素研究进展第17-28页
            2.1.1 类胡萝卜素概述第17-18页
            2.1.2 植物类胡萝卜素的生物合成途径第18-21页
            2.1.3 植物类胡萝卜素合成的主要酶及基因第21-23页
            2.1.4 植物类胡萝卜素的代谢和调控第23-28页
        2.2 类胡萝卜素代谢调控研究的方法第28-30页
            2.2.1 利用遗传群体进行研究第28页
            2.2.2 利用色泽突变体进行研究第28-29页
            2.2.3 利用转基因材料进行研究第29-30页
        2.3 柑橘类胡萝卜素代谢及调控的研究进展第30-32页
    3. 本研究的目的和内容第32-34页
第二章 柚杂交群体的创建及其高密度遗传图谱的构建第34-54页
    1. 引言第34-35页
    2. 材料与方法第35-40页
        2.1 实验材料第35页
        2.2 实验方法第35-40页
            2.2.1 花粉活性的检测第35-36页
            2.2.2 杂交授粉第36页
            2.2.3 杂种苗的播种及移栽第36页
            2.2.4 DNA的提取第36-37页
            2.2.5 杂种鉴定第37页
            2.2.6 RAD文库的构建及测序第37-38页
            2.2.7 数据筛选及序列比对第38-39页
            2.2.8 SNP标记分离检测第39页
            2.2.9 作图群体的SSR标记分析第39页
            2.2.10 分子遗传图谱的构建第39-40页
    3. 结果与分析第40-50页
        3.1 花粉育性的检测及杂种的获得第40页
        3.2 遗传群体后代的杂种鉴定第40-41页
        3.3 RAD-Seq分析第41-42页
        3.4 测序数据处理及SNP标记多态性分析第42-44页
        3.5 F_1代作图群体的SSR位点分析第44-45页
        3.6 柚高密度遗传图谱的构建及分析第45-48页
        3.7 与前人报道的柚遗传图谱的比较第48-50页
    4. 讨论第50-54页
        4.1 柑橘遗传图谱构建中群体、分子标记及其检测方法的选择第50-51页
        4.2 柚高密度遗传图谱构建第51-52页
        4.3 与前人报道的柚遗传图谱的比较第52-54页
第三章 琯溪蜜柚果皮橙色突变体性状形成机理的初探第54-72页
    1. 引言第54-55页
    2. 材料与方法第55-59页
        2.1 实验材料第55页
        2.2 实验方法第55-59页
            2.2.1 类胡萝卜素的HPLC分析第55-56页
            2.2.2 RNA的提取第56页
            2.2.3 Real time RT-PCR分析第56-57页
            2.2.4 转录组分析第57-58页
            2.2.5 可溶性糖和氨基酸的测定第58-59页
    3. 结果与分析第59-69页
        3.1 柚果皮橙色突变体的类胡萝卜素含量分析第59-60页
        3.2 柚果皮橙色突变体类胡萝卜素合成基因的表达分析第60页
        3.3 转录组测序分析第60-66页
            3.3.1 测序产量统计第60-61页
            3.3.2 RNA-seq测序数据质量评估第61-62页
            3.3.3 基因组比对统计第62-63页
            3.3.4 差异表达基因分析第63-64页
            3.3.5 差异表达基因的GO分析第64-66页
            3.3.6 差异表达的基因所涉及的代谢途径第66页
        3.4 利用qRT-PCR验证RNA-seq结果第66-67页
        3.5 橙色果皮突变体果皮中可溶性糖和氨基酸含量的测定第67-68页
        3.6 利用两对β-胡萝卜素突变体材料筛选候选基因第68-69页
    4. 讨论第69-72页
        4.1 橙色果皮突变体材料积累β-胡萝卜素机理的初探第69-70页
        4.2 橙色果皮突变体材料与橙色果肉突变体材料间的异同第70-71页
        4.3 与β-胡萝卜素调控相关的候选基因第71-72页
第四章 转CsLCYb基因调控β-胡萝卜素代谢的研究第72-91页
    1. 引言第72-73页
    2. 材料与方法第73-78页
        2.1 实验材料第73页
        2.2 研究方法第73-78页
            2.2.1 CsLCYb转基因番茄的分子检测第73-74页
            2.2.2 CsLCYb转基因番茄果实RNA的提取第74-75页
            2.2.3 CsLCYb转基因番茄果实的表达分析第75-76页
            2.2.4 CsLCYb转基因番茄果实类胡萝卜素的测定和分析第76页
            2.2.5 CsLCYb转基因番茄果实ABA含量的测定和分析第76-77页
            2.2.6 CsLCYb转基因番茄果实的透射电子显微镜观察第77页
            2.2.7 CsLCYb转基因番茄果实的芯片分析第77-78页
            2.2.8 CsLCYb转基因番茄果实的可溶性糖含量分析第78页
    3. 结果与分析第78-87页
        3.1 单拷贝转基因植株后代纯系的筛选第78-79页
        3.2 CsLCYb转基因番茄果实的类胡萝卜素分析第79-81页
        3.3 CsLCYb转基因番茄果实类胡萝卜素合成相关基因的表达分析第81-82页
        3.4 CsLCYb转基因番茄果实ABA含量分析第82页
        3.5 CsLCYb转基因番茄果实的透射电镜观察第82-83页
        3.6 CsLCYb转基因番茄果实的芯片分析第83-87页
        3.7 CsLCYb转基因番茄果实的可溶性糖含量分析第87页
    4. 讨论第87-91页
        4.1 超量表达CsLCYb基因对类胡萝卜素α-支路的代谢调控第87-88页
        4.2 超量表达CsLCYb基因对总类胡萝卜素含量的影响第88-89页
        4.3 超量表达CsLCYb基因对其它代谢途径的影响第89-91页
第五章 总讨论与未来研究展望第91-97页
参考文献第97-117页
附录Ⅰ RNA-seq鉴定到的橙色果皮突变体与其野生型间差异表达的基因第117-132页
附录Ⅱ RNA-seq鉴定到的橙色果肉突变体与其野生型间差异表达的基因第132-150页
附录Ⅲ 基因芯片鉴定到的CsLCYb番茄果实与其野生型间差异表达的基因第150-154页
附录Ⅳ 博士期间发表的论文第154-155页
致谢第155-156页

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