摘要 | 第10-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
1 引言 | 第16-38页 |
1.1 双单倍体鱼类的研究进展 | 第16-25页 |
1.1.1 双单倍体鱼类的诱导方法 | 第16-21页 |
1.1.2 双单倍体鱼类的生物学特性 | 第21-22页 |
1.1.3 双单倍体和克隆鱼类的应用研究进展 | 第22-25页 |
1.2 鱼类卵子发生机制的研究进展 | 第25-36页 |
1.2.1 PGCs的特征、起源和迁移 | 第25-26页 |
1.2.2 卵原细胞期 | 第26-27页 |
1.2.3 卵母细胞生长 | 第27-30页 |
1.2.4 卵母细胞的成熟和水合 | 第30-34页 |
1.2.5 排卵 | 第34-35页 |
1.2.6 卵泡闭锁 | 第35页 |
1.2.7 成熟的卵 | 第35-36页 |
1.3 研究背景和意义 | 第36-38页 |
2 材料与方法 | 第38-54页 |
2.1 牙鲆诱导双单倍体成功率的比较研究 | 第38-41页 |
2.1.1 试验材料 | 第38页 |
2.1.2 基因组DNA的提取 | 第38-39页 |
2.1.3 微卫星引物 | 第39-41页 |
2.1.4 PCR反应及电泳检测 | 第41页 |
2.1.5 数据分析 | 第41页 |
2.2 双单倍体牙鲆纯合不育个体的激素水平变化研究 | 第41-44页 |
2.2.1 试验材料 | 第41-42页 |
2.2.2 血液采集 | 第42页 |
2.2.3 组织切片 | 第42页 |
2.2.4 激素水平测定 | 第42-44页 |
2.2.5 数据统计与分析 | 第44页 |
2.3 双单倍体牙鲆纯合不育的蛋白质组学研究 | 第44-49页 |
2.3.1 试验材料 | 第44页 |
2.3.2 试剂配置 | 第44-45页 |
2.3.3 蛋白样品制备 | 第45页 |
2.3.4 蛋白样品定量 | 第45-46页 |
2.3.5 双向凝胶电泳 | 第46-47页 |
2.3.6 染色 | 第47-48页 |
2.3.7 扫描 | 第48页 |
2.3.8 酶解 | 第48页 |
2.3.9 质谱上样 | 第48页 |
2.3.10 数据检索 | 第48-49页 |
2.4 双单倍体牙鲆纯合不育的转录组学研究 | 第49-54页 |
2.4.1 试验材料 | 第49页 |
2.4.2 RNA提取 | 第49页 |
2.4.3 c DNA文库的构建 | 第49-50页 |
2.4.4 RNA测序、组装和数据处理 | 第50-51页 |
2.4.5 CDS预测、SSR和SNP分析 | 第51-52页 |
2.4.6 荧光定量PCR | 第52-54页 |
3 结果与分析 | 第54-74页 |
3.1 牙鲆诱导双单倍体成功率的比较研究 | 第54-58页 |
3.1.1 亲本纯合度检验 | 第54-55页 |
3.1.2 DH的纯合个体比例 | 第55页 |
3.1.3 不同亲鱼的诱导率 | 第55-57页 |
3.1.4 相关性分析 | 第57-58页 |
3.2 双单倍体牙鲆纯合不育的激素水平变化研究 | 第58-62页 |
3.2.1 可育和不育牙鲆的卵巢组织学观察 | 第58-59页 |
3.2.2 不育牙鲆和对照组牙鲆血清激素含量的比较 | 第59-62页 |
3.3 双单倍体牙鲆纯合不育个体的蛋白质组学研究 | 第62-65页 |
3.3.1 牙鲆纯合不育个体的蛋白质组学图谱比较 | 第62页 |
3.3.2 差异表达蛋白点的质谱鉴定 | 第62-64页 |
3.3.3 一些重点关注差异蛋白的胶图及表达量对比 | 第64-65页 |
3.4 双单倍体牙鲆纯合不育个体的转录组学研究 | 第65-74页 |
3.4.1 Illumina测序和装配结果 | 第65-67页 |
3.4.2 CDS预测和unigenes注释 | 第67页 |
3.4.3 SSR和SNP分析 | 第67页 |
3.4.4 差异表达基因功能分析 | 第67-71页 |
3.4.5 共表达网络 | 第71-73页 |
3.4.6 荧光定量PCR对测序结果的验证 | 第73-74页 |
4 讨论 | 第74-83页 |
4.1 牙鲆诱导DH成功率的比较研究 | 第74-75页 |
4.1.1 不同纯合度亲鱼诱导牙鲆DH效率的比较 | 第74-75页 |
4.1.2 诱导DH时杂合子产生的原因 | 第75页 |
4.2 DH牙鲆纯合不育的激素水平变化研究 | 第75-77页 |
4.2.1 DH牙鲆性腺发育的组织学特征 | 第75-76页 |
4.2.2 DH牙鲆的性腺发育过程中的激素水平变化特征 | 第76-77页 |
4.3 DH牙鲆纯合不育个体的蛋白质组学研究 | 第77-79页 |
4.4 DH牙鲆纯合不育个体的转录组组学研究 | 第79-83页 |
4.4.1 不育牙鲆性腺低表达基因分析 | 第79-81页 |
4.4.2 不育牙鲆性腺高表达基因分析 | 第81-83页 |
5 结论 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-110页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第110-111页 |