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NGF对黏菌素致PC12细胞自噬和凋亡的影响研究

摘要第9-10页
英文摘要第10-11页
1 前言第12-21页
    1.1 黏菌素概述第12-13页
        1.1.1 黏菌素理化性质第12页
        1.1.2 黏菌素的肾毒性第12页
        1.1.3 黏菌素的神经毒性第12-13页
        1.1.4 黏菌素药动学第13页
        1.1.5 黏菌素抗菌机理第13页
    1.2 神经生长因子(NGF)第13-15页
        1.2.1 NGF的概述第13-14页
        1.2.2 NGF信号传递途径第14页
        1.2.3 NGF神经保护作用第14页
        1.2.4 NGF临床应用及展望第14-15页
    1.3 细胞自噬第15-17页
        1.3.1 细胞自噬的概述第15页
        1.3.2 细胞自噬的过程第15-16页
        1.3.3 细胞自噬的两面性第16-17页
        1.3.4 细胞自噬实际应用第17页
    1.4 细胞凋亡第17-19页
        1.4.1 细胞凋亡的概述第17页
        1.4.2 细胞凋亡调控因子第17页
        1.4.3 细胞凋亡的过程第17-18页
        1.4.4 细胞凋亡途径第18-19页
    1.5 课题研究的目的意义第19-21页
2 材料与方法第21-35页
    2.1 试验细胞第21页
    2.2 试验设备第21-22页
    2.3 主要试剂第22-25页
        2.3.1 主要试剂的配制第23页
        2.3.2 其他试剂的配制第23-25页
    2.4 PC12细胞的培养第25-27页
        2.4.1 PC12细胞的复苏第25页
        2.4.2 PC12细胞的传代第25-26页
        2.4.3 PC12细胞的冻存第26页
        2.4.4 细胞计数第26页
        2.4.5 检测细胞活性第26-27页
    2.5 NGF对PC12细胞的保护作用第27-34页
        2.5.1 试验分组第27页
        2.5.2 细胞活性的检查第27页
        2.5.3 Hoechst 33258荧光染色观察细胞活性第27页
        2.5.4 MDC荧光染色观察细胞自噬情况第27页
        2.5.5 免疫荧光染色标记细胞自噬体第27-28页
        2.5.6 细胞透射电镜检测细胞结构第28页
        2.5.7 流式细胞仪检测细胞活性第28-29页
        2.5.8 RT-PCR半定量分析目标基因的表达第29-31页
        2.5.9 Western blot分析PC12中相关蛋白的表达第31-33页
        2.5.10 PC12细胞MMP的测定第33-34页
    2.6 统计学处理第34-35页
3 结果与分析第35-53页
    3.1 细胞活性检测结果第35-36页
    3.2 Hoechst33258荧光染色结果第36-38页
    3.3 MDC染色结果第38-39页
    3.4 免疫荧光染色结果第39-40页
    3.5 细胞透射电镜的结果第40-42页
    3.6 细胞流式仪检测细胞活性的结果第42-43页
    3.7 细胞RT-PCR分析目的基因m RNA的表达结果第43-50页
        3.7.1 PC12细胞总RNA提取与鉴定结果第43-44页
        3.7.2 PCR产物凝胶电泳鉴定结果第44-45页
        3.7.3 RT-PCR检测结果第45-50页
    3.8 线粒体膜电位的检测结果第50-51页
    3.9 细胞蛋白免疫印迹结果第51-53页
4 讨论第53-56页
    4.1 Colistin诱导PC12细胞凋亡和自噬的剂量的确定第53页
    4.2 NGF对细胞凋亡的影响第53页
    4.3 NGF对细胞自噬的影响第53-54页
    4.4 PC12细胞自噬与细胞凋亡的关系第54-56页
5 结论第56-57页
致谢第57-58页
参考文献第58-62页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第62页

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