| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 前言 | 第10-20页 |
| 1 瑟氏泰勒虫简介 | 第10页 |
| 2 流行病学情况 | 第10-12页 |
| 3 瑟氏泰勒虫表面蛋白的研究 | 第12-13页 |
| 4 防治情况 | 第13-14页 |
| 4.1 灭蜱和驱虫 | 第13-14页 |
| 4.2 疫苗情况 | 第14页 |
| 5 毕赤酵母研究进展情况 | 第14-18页 |
| 5.1 毕赤酵母简介 | 第14-15页 |
| 5.2 毕赤酵母的宿主菌 | 第15-16页 |
| 5.3 毕赤酵母表达载体 | 第16-17页 |
| 5.4 毕赤酵母的优势 | 第17-18页 |
| 6 研究目的及意义 | 第18-20页 |
| 材料与方法 | 第20-36页 |
| 1 材料 | 第20-25页 |
| 1.1 血清来源 | 第20页 |
| 1.2 菌种及载体 | 第20页 |
| 1.3 试剂及药品 | 第20页 |
| 1.4 实验设备及仪器 | 第20页 |
| 1.5 实验所用主要溶液的配置 | 第20-25页 |
| 2 方法 | 第25-36页 |
| 2.1 引物的设计与合成 | 第25页 |
| 2.2 提取牛瑟氏泰勒虫基因 | 第25页 |
| 2.3 目的基因的扩增 | 第25-26页 |
| 2.4 目的片段的胶回收 | 第26-27页 |
| 2.5 P33基因与克隆载体pMD-19-T-Simple相连接 | 第27页 |
| 2.6 连接产物的转化 | 第27-28页 |
| 2.7 克隆质粒的提取 | 第28-29页 |
| 2.8 鉴定重组质粒pMD-19-T-p33 | 第29页 |
| 2.9 p33基因片段与真核表达载体相连 | 第29-30页 |
| 2.10 连接后转化 | 第30页 |
| 2.11 获取重组质粒pPICZa A-p33 | 第30页 |
| 2.12 对重组质粒pPICZa A-p33的鉴定 | 第30页 |
| 2.13 重组质粒的线性化 | 第30页 |
| 2.14 制备GS115酵母菌株感受态 | 第30-31页 |
| 2.15 电转化重组质粒 | 第31页 |
| 2.16 筛选重组酵母菌 | 第31-32页 |
| 2.17 运用PCR法对阳性株进行筛选 | 第32页 |
| 2.18 重组酵母的诱导表达 | 第32-33页 |
| 2.19 利用SDS-PAGE法检测蛋白 | 第33-34页 |
| 2.20 对表达产物进行Western blot分析 | 第34-36页 |
| 结果 | 第36-41页 |
| 1 PCR扩增结果 | 第36页 |
| 2 重组质粒酶切鉴定 | 第36-37页 |
| 3 重组质粒pMD-19-T-p33的测序鉴定 | 第37-38页 |
| 4 构建真核表达载体 | 第38-39页 |
| 5 酵母菌株重组子PCR鉴定 | 第39页 |
| 6 诱导产物的SDS-PAGE | 第39-40页 |
| 7 诱导产物的Western-Blot鉴定 | 第40-41页 |
| 讨论 | 第41-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53-54页 |
| 在研期间发表论文 | 第54页 |
