中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-7页 |
1 绪论 | 第11-18页 |
1.1 研究背景 | 第11-16页 |
1.1.1 骨桥蛋白的结构和功能 | 第11-12页 |
1.1.2 OPN的受体 | 第12-13页 |
1.1.3 MSCs和组织损伤修复的关系 | 第13-14页 |
1.1.4 OPN与细胞运动能力 | 第14-15页 |
1.1.5 细胞运动和细胞核的关系 | 第15-16页 |
1.2 本文所关心的内容 | 第16页 |
1.3 研究内容及其意义 | 第16-17页 |
1.3.1 研究内容 | 第16页 |
1.3.2 研究意义 | 第16-17页 |
1.4 技术路线 | 第17-18页 |
2 MSCs的分离、鉴定和培养 | 第18-23页 |
2.1 引言 | 第18页 |
2.2 实验材料 | 第18-19页 |
2.2.1 主要仪器耗材 | 第18页 |
2.2.2 实验试剂与药品 | 第18-19页 |
2.2.3 实验动物 | 第19页 |
2.2.4 主要实验试剂的配制 | 第19页 |
2.3 实验方法 | 第19-20页 |
2.3.1 MSCs原代分离和培养 | 第19页 |
2.3.2 MSCs传代培养 | 第19页 |
2.3.3 MSCs表面抗原分析 | 第19-20页 |
2.4 实验结果 | 第20-21页 |
2.4.1 MSCs的形态学观察 | 第20-21页 |
2.4.2 MSCs表面抗原表达情况 | 第21页 |
2.5 讨论 | 第21-22页 |
2.6 本章小结 | 第22-23页 |
3 OPN通过FAK、ERK1/2 提高MSCs的运动能力 | 第23-38页 |
3.1 引言 | 第23页 |
3.2 实验材料 | 第23-27页 |
3.2.1 仪器耗材 | 第23-24页 |
3.2.2 药品与试剂 | 第24-25页 |
3.2.3 主要试剂配制 | 第25-27页 |
3.3 实验方法 | 第27-30页 |
3.3.1 细胞计数法检测细胞增殖 | 第27页 |
3.3.2 Transwell小室检测MSCs的迁移和侵袭 | 第27-28页 |
3.3.3 明胶酶谱法检测MSCs MMP2和MMP9的活性 | 第28-29页 |
3.3.4 Western blot | 第29-30页 |
3.4 实验结果 | 第30-35页 |
3.4.1 OPN处理不影响MSCs的增殖 | 第30-31页 |
3.4.2 OPN促进MSCs迁移和侵袭 | 第31-32页 |
3.4.3 OPN促进MSCs中FAK、ERK1/2 的磷酸化 | 第32-33页 |
3.4.4 FAK、ERK1/2 磷酸化介导OPN诱导的MSCs迁移和侵袭 | 第33-34页 |
3.4.5 OPN通过FAK、ERK1/2 影响MMP2活力 | 第34-35页 |
3.5 讨论 | 第35-37页 |
3.6 本章小结 | 第37-38页 |
4 OPN通过FAK、ERK1/2 影响MSCs细胞核力学性质 | 第38-48页 |
4.1 引言 | 第38页 |
4.2 实验材料 | 第38-40页 |
4.2.1 主要仪器与耗材 | 第38-39页 |
4.2.2 主要实验药品与试剂 | 第39页 |
4.2.3 主要试剂配制 | 第39-40页 |
4.3 实验方法 | 第40-43页 |
4.3.1 原子力显微镜检测细胞核硬度变化 | 第40-41页 |
4.3.2 RT-PCR | 第41-42页 |
4.3.3 Western blot | 第42-43页 |
4.4 实验结果 | 第43-46页 |
4.4.1 OPN通过FAK、ERK1/2 影响细胞核杨氏模量 | 第43-44页 |
4.4.2 OPN影响MSCs LaminA/C表达 | 第44-45页 |
4.4.3 FAK、ERK1/2 介导OPN对细胞核LaminA/C的下调作用 | 第45-46页 |
4.5 讨论 | 第46-47页 |
4.6 本章小结 | 第47-48页 |
5 结论与展望 | 第48-49页 |
5.1 主要结论 | 第48页 |
5.2 后续研究工作的展望 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
附录A. 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第57页 |