| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 缩略语/符号说明 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-13页 |
| 研究现状、成果 | 第10-11页 |
| 研究目的、方法 | 第11-13页 |
| 1 对象和方法 | 第13-28页 |
| 1.1 研究材料 | 第13-14页 |
| 1.1.1 细胞培养试剂 | 第13页 |
| 1.1.2 PCR试剂 | 第13页 |
| 1.1.3 质粒构建及提取试剂 | 第13页 |
| 1.1.4 Western blotting试剂 | 第13-14页 |
| 1.1.5 实时定量PCR试剂： | 第14页 |
| 1.1.6 细胞转染试剂 | 第14页 |
| 1.1.7 流式细胞术试剂 | 第14页 |
| 1.2 研究仪器 | 第14-15页 |
| 1.3 研究方法 | 第15-28页 |
| 1.3.1 人基因组DNA提取 | 第15页 |
| 1.3.2 PCR克隆CDK6-3'UTR | 第15-16页 |
| 1.3.3 DNA及PCR产物琼脂糖凝胶电泳 | 第16-17页 |
| 1.3.4 DNA切胶回收 | 第17页 |
| 1.3.5 DNA的重组 | 第17-18页 |
| 1.3.6 LB培养基制备 | 第18页 |
| 1.3.7 重组质粒的转化(热休克法) | 第18-19页 |
| 1.3.8 质粒小量提取 | 第19页 |
| 1.3.9 质粒大量提取 | 第19-20页 |
| 1.3.10 脂质体转染系统(24孔板) | 第20-21页 |
| 1.3.11 β-gal检测标准流程（以24孔板为例） | 第21页 |
| 1.3.12 TRIzol法提取总RNA（6 孔板） | 第21-22页 |
| 1.3.13 紫外分光光度法定量DNA和RNA | 第22页 |
| 1.3.14 Taqman microRNA q RT-PCR | 第22-24页 |
| 1.3.15 Western blotting检测信号蛋白表达情况 | 第24-25页 |
| 1.3.16 Brdu/7-AAD流式细胞术检测细胞周期 | 第25-26页 |
| 1.3.17 Annexin Ⅴ/PI流式细胞术检测细胞凋亡 | 第26页 |
| 1.3.18 集落形成实验 | 第26-27页 |
| 1.3.19 统计学方法 | 第27-28页 |
| 2 实验结果 | 第28-35页 |
| 2.1 HK细胞对MCL细胞miR-548m和CDK6表达的影响 | 第28-29页 |
| 2.1.1 HK细胞介导了MCL中miR-548m的下调 | 第28页 |
| 2.1.2 HK细胞介导了MCL中CDK6的上调 | 第28-29页 |
| 2.2 miR-548m靶基因预测筛选与初步验证 | 第29-30页 |
| 2.2.1 生物学信息软件初步筛查mi R-548m作用靶点 | 第29页 |
| 2.2.2 Western Blot初步验证miR-548m靶点CKD6 | 第29-30页 |
| 2.3 CDK6是miR-548m直接作用靶点 | 第30-31页 |
| 2.3.1 构建报告质粒 | 第30页 |
| 2.3.2 荧光素酶报告基因实验验证CDK6是mi R-548m直接靶点 | 第30-31页 |
| 2.4 FDCs 通过 mi R -548m/CDK6 轴调节 MCL 的集落形成 | 第31-32页 |
| 2.4.1 miR-548m抑制HK细胞介导的MCL细胞集落形成 | 第31页 |
| 2.4.2 CDK6促进HK细胞介导的MCL细胞集落形成 | 第31-32页 |
| 2.5 CDK6抑制剂PD 0332991生物学作用的探讨 | 第32-35页 |
| 2.5.1 流式细胞术检测PD 0332991对MCL细胞周期的影响 | 第32-33页 |
| 2.5.2 Western Blot检测PD 0332991对Rb蛋白磷酸化的影响 | 第33-34页 |
| 2.5.3 集落形成实验检测PD 0332991对MCL集落形成的影响 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-40页 |
| 3.1 MCL发病机制尚不完全清楚 | 第35-36页 |
| 3.2 肿瘤基质细胞介导的细胞粘附促进MCL发生发展 | 第36页 |
| 3.3 miR-548m和c-Myc环路在MCL发病中的作用 | 第36-37页 |
| 3.4 CDK在MCL发病中的作用 | 第37-38页 |
| 3.5 CDK6靶向抑制剂PD 0332991在MCL治疗中的意义 | 第38-39页 |
| 3.6 结语 | 第39-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第45-46页 |
| 综述 套细胞淋巴瘤相关microRNA和治疗研究进展 | 第46-61页 |
| 综述参考文献 | 第53-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
