摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
文献综述 | 第9-18页 |
第一章 猪流行性腹泻及病原研究进展 | 第9-18页 |
1.1 猪流行性腹泻病概述 | 第9页 |
1.2 猪流行性腹泻的流行病学研究 | 第9-10页 |
1.3 猪流行性腹泻病毒的分子生物学特征 | 第10-13页 |
1.3.1 猪流行性腹泻病毒病原学 | 第10-11页 |
1.3.2 基因组结构与复制 | 第11-12页 |
1.3.3 猪流行性腹泻病毒主要基因组与编码蛋白 | 第12-13页 |
1.4 猪流行性腹泻病的诊断方法 | 第13-15页 |
1.4.1 免疫电镜技术 | 第13页 |
1.4.2 酶联免疫吸附试验(ELASA) | 第13-14页 |
1.4.3 免疫荧光法 | 第14页 |
1.4.4 RT-PCR | 第14页 |
1.4.5 免疫层析法 | 第14-15页 |
1.4.6 荧光定量PCR | 第15页 |
1.5 猪流行性腹泻病疫苗的研究进展 | 第15-18页 |
1.5.1 组织灭活疫苗 | 第15-16页 |
1.5.2 细胞弱毒苗 | 第16页 |
1.5.3 转基因植物疫苗 | 第16页 |
1.5.4 核酸疫苗 | 第16-17页 |
1.5.5 亚单位疫苗 | 第17-18页 |
实验研究 | 第18-40页 |
第二章 陕西省某规模化猪场猪流行性腹泻病毒的检测 | 第18-23页 |
2.1 材料 | 第18-19页 |
2.1.1 病料 | 第18-19页 |
2.1.1.1 病料来源 | 第18页 |
2.1.1.2 主要仪器设备 | 第18页 |
2.1.1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
2.1.1.4 引物 | 第19页 |
2.2 方法 | 第19-20页 |
2.2.1 腹泻仔猪临床症状观察 | 第19页 |
2.2.2 PEDV RT-PCR检测 | 第19-20页 |
2.3 结果 | 第20-22页 |
2.3.1 该场仔猪发病情况及临床症状 | 第20-21页 |
2.3.2 腹泻仔猪剖检病理变化 | 第21页 |
2.3.3 病料的PEDV RT-PCR检测结果 | 第21-22页 |
2.4 讨论 | 第22页 |
2.5 小结 | 第22-23页 |
第三章 猪流行性腹泻病毒分离株主要毒力基因的克隆及序列分析 | 第23-40页 |
3.1 材料 | 第23-24页 |
3.1.1 主要试剂和细菌 | 第23-24页 |
3.1.2 引物 | 第24页 |
3.2 方法 | 第24-26页 |
3.2.1 病料的处理 | 第24页 |
3.2.2 病毒RNA提取 | 第24-25页 |
3.2.3 病毒cDNA的合成 | 第25页 |
3.2.4 目的DNA片段的回收与纯化 | 第25页 |
3.2.5 PCR产物与pMD 18-T载体连接 | 第25-26页 |
3.2.6 重组质粒载体的转化 | 第26页 |
3.2.7 质粒的小量制备 | 第26页 |
3.2.8 重组质粒的酶切鉴定 | 第26页 |
3.3 结果 | 第26-39页 |
3.3.1 M基因、ORF3基因和S部分基因 | 第26-28页 |
3.3.2 质粒鉴定及测序 | 第28-30页 |
3.3.3 M基因的序列分析 | 第30-33页 |
3.3.4 ORF3基因测序结果的分析 | 第33-36页 |
3.3.5 S基因测序结果分析 | 第36-38页 |
3.3.6 讨论 | 第38-39页 |
小结 | 第39-40页 |
结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
作者简介 | 第46页 |