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某规模化猪场猪流行性腹泻病毒检测及主要毒力基因克隆分析

摘要第5-6页
ABSTRACT第6页
文献综述第9-18页
    第一章 猪流行性腹泻及病原研究进展第9-18页
        1.1 猪流行性腹泻病概述第9页
        1.2 猪流行性腹泻的流行病学研究第9-10页
        1.3 猪流行性腹泻病毒的分子生物学特征第10-13页
            1.3.1 猪流行性腹泻病毒病原学第10-11页
            1.3.2 基因组结构与复制第11-12页
            1.3.3 猪流行性腹泻病毒主要基因组与编码蛋白第12-13页
        1.4 猪流行性腹泻病的诊断方法第13-15页
            1.4.1 免疫电镜技术第13页
            1.4.2 酶联免疫吸附试验(ELASA)第13-14页
            1.4.3 免疫荧光法第14页
            1.4.4 RT-PCR第14页
            1.4.5 免疫层析法第14-15页
            1.4.6 荧光定量PCR第15页
        1.5 猪流行性腹泻病疫苗的研究进展第15-18页
            1.5.1 组织灭活疫苗第15-16页
            1.5.2 细胞弱毒苗第16页
            1.5.3 转基因植物疫苗第16页
            1.5.4 核酸疫苗第16-17页
            1.5.5 亚单位疫苗第17-18页
实验研究第18-40页
    第二章 陕西省某规模化猪场猪流行性腹泻病毒的检测第18-23页
        2.1 材料第18-19页
            2.1.1 病料第18-19页
                2.1.1.1 病料来源第18页
                2.1.1.2 主要仪器设备第18页
                2.1.1.3 主要试剂第18-19页
                2.1.1.4 引物第19页
        2.2 方法第19-20页
            2.2.1 腹泻仔猪临床症状观察第19页
            2.2.2 PEDV RT-PCR检测第19-20页
        2.3 结果第20-22页
            2.3.1 该场仔猪发病情况及临床症状第20-21页
            2.3.2 腹泻仔猪剖检病理变化第21页
            2.3.3 病料的PEDV RT-PCR检测结果第21-22页
        2.4 讨论第22页
        2.5 小结第22-23页
    第三章 猪流行性腹泻病毒分离株主要毒力基因的克隆及序列分析第23-40页
        3.1 材料第23-24页
            3.1.1 主要试剂和细菌第23-24页
            3.1.2 引物第24页
        3.2 方法第24-26页
            3.2.1 病料的处理第24页
            3.2.2 病毒RNA提取第24-25页
            3.2.3 病毒cDNA的合成第25页
            3.2.4 目的DNA片段的回收与纯化第25页
            3.2.5 PCR产物与pMD 18-T载体连接第25-26页
            3.2.6 重组质粒载体的转化第26页
            3.2.7 质粒的小量制备第26页
            3.2.8 重组质粒的酶切鉴定第26页
        3.3 结果第26-39页
            3.3.1 M基因、ORF3基因和S部分基因第26-28页
            3.3.2 质粒鉴定及测序第28-30页
            3.3.3 M基因的序列分析第30-33页
            3.3.4 ORF3基因测序结果的分析第33-36页
            3.3.5 S基因测序结果分析第36-38页
            3.3.6 讨论第38-39页
        小结第39-40页
结论第40-41页
参考文献第41-45页
致谢第45-46页
作者简介第46页

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