| 中文摘要 | 第5-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 绪论 | 第17-33页 |
| 1.1 MICRORNA的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.1.1 microRNA的生成和作用机制 | 第17-18页 |
| 1.1.2 microRNA的生物学特性 | 第18-20页 |
| 1.2 循环核酸的研究进展 | 第20-22页 |
| 1.2.1 循环DNA和循环RNA | 第20-21页 |
| 1.2.2 循环microRNA | 第21-22页 |
| 1.3 MICRORNA检测技术进展 | 第22-25页 |
| 1.3.1 Northern杂交 | 第22页 |
| 1.3.2 基因芯片 | 第22-23页 |
| 1.3.3 反转录聚合酶链反应 | 第23-24页 |
| 1.3.4 高通量测序技术 | 第24-25页 |
| 1.4 微囊泡简介 | 第25-28页 |
| 1.4.1 Exosome的生成过程和来源 | 第26页 |
| 1.4.2 细胞间exosome转运及exosome释放的调节 | 第26页 |
| 1.4.3 Exosome的分离和分析 | 第26-27页 |
| 1.4.4 Exosome的分子组成及其功能 | 第27页 |
| 1.4.5 Exosome是细胞外核酸分子的载体和来源 | 第27-28页 |
| 1.5 妊娠相关疾病的研究进展 | 第28-31页 |
| 1.5.1 妊娠糖尿病简介 | 第28页 |
| 1.5.2 妊娠糖尿病研究现状 | 第28-29页 |
| 1.5.3 先兆子痫介绍 | 第29-31页 |
| 1.6 论文的研究目的与内容 | 第31-33页 |
| 1.6.1 本论文立项依据和研究内容 | 第31-32页 |
| 1.6.2 论文研究的框架结构 | 第32-33页 |
| 第二章 血浆循环微囊泡及其核酸的表征 | 第33-44页 |
| 2.1 前言 | 第33页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第33-37页 |
| 2.2.1 研究材料 | 第33页 |
| 2.2.2 实验器材与主要试剂 | 第33-34页 |
| 2.2.3 研究方法 | 第34-37页 |
| 2.3 实验结果 | 第37-43页 |
| 2.3.1 Exosome分离纯化的结果 | 第37-39页 |
| 2.3.2 血浆exosome DNA的浓度和片段长度 | 第39-40页 |
| 2.3.3 不同温度,不同储存时间对血浆exosome miRNA稳定性的影响 | 第40-43页 |
| 2.4 本章小结 | 第43-44页 |
| 第三章 微量循环MIRNA测序文库制备方法的研究 | 第44-62页 |
| 3.1 引言 | 第44页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第44-50页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第44页 |
| 3.2.2 主要试剂与仪器设备 | 第44-45页 |
| 3.2.3 研究方法 | 第45-50页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第50-60页 |
| 3.3.1 通用接头的定量PCR比较 | 第50-51页 |
| 3.3.2 接头浓度的优化研究 | 第51-52页 |
| 3.3.3 样本浓度线性范围的研究 | 第52页 |
| 3.3.4 不同建库方法miRNA测序结果的相关性比较 | 第52-53页 |
| 3.3.5 血浆与血浆exosome miRNA测序结果的比较 | 第53-60页 |
| 3.4 本章小结 | 第60-62页 |
| 第四章 子痫病人外周血循环MIRNA表达谱的高通量测序分析 | 第62-78页 |
| 4.1 引言 | 第62页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第62-64页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第62-63页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第63-64页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第64-76页 |
| 4.3.1 测序结果总体质量分析 | 第64-69页 |
| 4.3.2 miRNA表达谱与先兆子痫疾病相关性分析 | 第69-76页 |
| 4.4 本章小结 | 第76-78页 |
| 第五章 妊娠糖尿病孕妇血浆EXOSOME中MIRNA的差异表达分析 | 第78-90页 |
| 5.1 引言 | 第78页 |
| 5.2 实验材料与方法 | 第78-81页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第78-80页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第80-81页 |
| 5.3 实验结果 | 第81-84页 |
| 5.3.1 miRNA文库质量检测 | 第81页 |
| 5.3.2 定量PCR结果 | 第81-82页 |
| 5.3.3 妊娠糖尿病Exosome miRNA表达差异及其功能分析 | 第82-84页 |
| 5.4 实验讨论 | 第84-88页 |
| 5.5 本章小结 | 第88-90页 |
| 第六章 基于高通量测序的MIRNA/ISOMIRS的表达分析 | 第90-102页 |
| 6.1 引言 | 第90-92页 |
| 6.2 材料与方法 | 第92-93页 |
| 6.2.1 研究对象选择 | 第92页 |
| 6.2.2 文库制备及测序 | 第92页 |
| 6.2.3 小RNA分析 | 第92页 |
| 6.2.4 基于miRNA gene cluste/family以及isomiRs的分析策略 | 第92-93页 |
| 6.3 实验结果 | 第93-99页 |
| 6.3.1 基于同种异型细胞系的miRNA深度分析 | 第93-98页 |
| 6.3.2 基于子痫组织与血浆间的miRNA深度分析 | 第98-99页 |
| 6.4 实验讨论 | 第99-101页 |
| 6.5 本章小结 | 第101-102页 |
| 第七章 总结与展望 | 第102-106页 |
| 7.1 全文总结 | 第102-105页 |
| 7.2 论文展望与不足 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-112页 |
| 附录 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
