中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第1章 文献综述 | 第10-22页 |
1. MBV研究进展 | 第10-15页 |
1.1 MBV的溯源及命名 | 第10页 |
1.2 MBV的生物学特征 | 第10-12页 |
1.3 MBV的感染状况 | 第12-13页 |
1.4 MBV的检测方法 | 第13-15页 |
1.5 MBV的预防及治疗 | 第15页 |
2. SRV研究进展 | 第15-18页 |
2.1 SRV的溯源 | 第15-16页 |
2.2 SRV的基因组特征 | 第16页 |
2.3 SRV的血清型 | 第16-17页 |
2.4 SRV的感染及传播 | 第17页 |
2.5 SRV的诊断 | 第17页 |
2.6 SRV的治疗和预防 | 第17-18页 |
3. SIV研究进展 | 第18-20页 |
3.1 SIV的分子生物学特性 | 第18页 |
3.2 SIV的致病性 | 第18-19页 |
3.3 SAIDS动物模型的可行性及实用意义 | 第19页 |
3.4 SIV的检测 | 第19-20页 |
4. 结语 | 第20-22页 |
第2章 上海地区实验用猴MBV、SRV、SIV三种病毒的血清抗体调查 | 第22-25页 |
1. 主要材料 | 第22页 |
2. 主要仪器 | 第22页 |
3. 检测结果 | 第22-23页 |
3.1 MBV血清抗体检测结果 | 第22页 |
3.2 SRV血清抗体检测结果 | 第22-23页 |
3.3 SIV血清抗体检测结果 | 第23页 |
4. 讨论 | 第23-25页 |
第3章 目的蛋白的表达、纯化及鉴定 | 第25-36页 |
1. 菌株 | 第25页 |
2. 主要试剂 | 第25页 |
3. 主要仪器 | 第25页 |
4. 实验方法 | 第25-27页 |
4.1 转化 | 第25页 |
4.2 小试培养选择最佳的诱导条件 | 第25-26页 |
4.3 大量诱导 | 第26页 |
4.4 超声破碎菌体 | 第26页 |
4.5 镍琼脂糖亲和层析 | 第26页 |
4.6 SDS-PAGE检测 | 第26页 |
4.7 Western blot检测 | 第26-27页 |
4.8 测定目的蛋白浓度 | 第27页 |
5. 实验结果 | 第27-35页 |
5.1 MBV gD蛋白表达及检测结果 | 第27-29页 |
5.2 SRV重组蛋白表达及检测结果 | 第29-32页 |
5.3 SIV重组蛋白表达及检测结果 | 第32-35页 |
6. 讨论 | 第35-36页 |
第4章 检测MBV、SRV、SIV血清抗体的间接ELISA方法的初步建立 | 第36-56页 |
1. 主要材料及试剂 | 第36页 |
2. 主要仪器设备 | 第36页 |
3. 间接ELISA操作程序 | 第36页 |
4. 间接ELISA方法的初步建立 | 第36-38页 |
4.1 工作条件摸索试验 | 第36-37页 |
4.1.1 抗原最适包被量与血清最适稀释度的确定试验 | 第36页 |
4.1.2 酶标抗体最适工作浓度确定试验 | 第36-37页 |
4.2 工作条件的优化 | 第37页 |
4.2.1 最适包被条件的确定试验 | 第37页 |
4.2.2 血清最适作用时间的确定试验 | 第37页 |
4.2.3 酶标抗体最适作用时间的确定试验 | 第37页 |
4.2.4 最适封闭液确定试验 | 第37页 |
4.2.5 底物最适显色时间确定试验 | 第37页 |
4.3 判定标准试验 | 第37页 |
4.4 方法性能评价 | 第37-38页 |
4.4.1 交叉反应试验 | 第37页 |
4.4.2 竞争性抑制试验 | 第37-38页 |
4.4.3 敏感性试验(最低抗体检出效价试验) | 第38页 |
4.4.4 批内重复试验 | 第38页 |
4.4.5 与全病毒ELISA检测试剂盒检测结果比较试验 | 第38页 |
4.4.6 反应系统保存试验 | 第38页 |
4.5 间接ELISA方法的应用 | 第38页 |
5. 实验结果 | 第38-53页 |
5.1 检测MBV血清抗体的间接ELISA方法的初步建立 | 第38-43页 |
5.2 检测SRV血清抗体的间接ELISA方法的建立 | 第43-48页 |
5.3 检测SIV血清抗体的间接ELISA方法的建立 | 第48-53页 |
6. 讨论 | 第53-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
附录 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第64-65页 |