| 致谢 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 英文缩略词 | 第13-19页 |
| 1 引言 | 第19-24页 |
| 2 仪器与试剂 | 第24-33页 |
| 2.1 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.2 主要试剂 | 第25-28页 |
| 2.3 小鼠 | 第28-29页 |
| 2.4 细胞株 | 第29页 |
| 2.5 试剂配置 | 第29-33页 |
| 3 实验方法 | 第33-51页 |
| 3.1 实验流程图 | 第33页 |
| 3.2 小鼠基因型鉴定 | 第33-35页 |
| 3.3 肺组织固定及支气管肺泡灌洗液的获取 | 第35页 |
| 3.4 肺组织切片及H&E染色 | 第35-36页 |
| 3.5 细胞涂片及瑞氏吉姆萨染色 | 第36页 |
| 3.6 免疫组化染色 | 第36-38页 |
| 3.7 EVG弹性蛋白染色 | 第38-39页 |
| 3.8 细胞培养 | 第39-40页 |
| 3.9 流式细胞技术 | 第40页 |
| 3.10 Trizol法细胞总RNA提取及荧光定量PCR | 第40-42页 |
| 3.11 细胞总蛋白提取及BCA法蛋白浓度测定 | 第42-43页 |
| 3.12 蛋白质免疫印迹实验 | 第43-44页 |
| 3.13 酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第44-45页 |
| 3.14 细胞免疫荧光 | 第45页 |
| 3.15 细胞核蛋白浆蛋白抽提实验 | 第45-46页 |
| 3.16 去内毒素质粒抽提实验 | 第46-47页 |
| 3.17 细胞转染 | 第47-48页 |
| 3.18 细胞感染(慢病毒) | 第48-49页 |
| 3.19 双萤光素酶报告基因检测 | 第49页 |
| 3.20 香烟烟雾暴露模型 | 第49-51页 |
| 4 实验结果 | 第51-87页 |
| 4.1 构建获得巨噬细胞特异性敲除Shp2的小鼠模型 | 第51-52页 |
| 4.2 巨噬细胞缺失Shp2产生年龄相关的自发性肺气肿样损伤 | 第52-54页 |
| 4.3 流式细胞实验表明Shp2主要通过影响肺泡巨噬细胞功能参与肺气肿样损伤的发生 | 第54-58页 |
| 4.4 Shp2缺失的肺泡巨噬细胞呈现泡沫状形态改变 | 第58-59页 |
| 4.5 Shp2敲除不影响BALF中炎症因子的表达 | 第59页 |
| 4.6 Shp2缺失导致巨噬细胞分泌大量MMP-12参与损伤的过程 | 第59-65页 |
| 4.7 巨噬细胞缺失Shp2缓解TGFβ1对于MMP-12的抑制作用 | 第65-70页 |
| 4.8 巨噬细胞Shp2正向调控TGFβ信号通路 | 第70-77页 |
| 4.9 Shp2正向调控SMAD2入核,并依赖其PTP酶活中心发挥作用 | 第77-83页 |
| 4.10 巨噬细胞Shp2的缺失加重香烟烟雾诱导的肺气肿样损伤 | 第83-87页 |
| 5 讨论 | 第87-91页 |
| 6 结论 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-101页 |
| 综述 | 第101-115页 |
| 参考文献 | 第109-115页 |
| 作者简历及在读期间取得的科研成果 | 第115页 |
