摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写对照表 | 第8-12页 |
前言 | 第12-15页 |
第1章 材料 | 第15-18页 |
1.1 实验试剂 | 第15-16页 |
1.2 实验仪器设备 | 第16-17页 |
1.3 主要实验试剂的配制 | 第17-18页 |
1.3.1 PBS缓冲溶液 | 第17页 |
1.3.2 培养基的配制 | 第17页 |
1.3.3 电泳缓冲溶液 | 第17页 |
1.3.4 琼脂糖电泳凝胶 | 第17-18页 |
第2章 实验方法 | 第18-25页 |
2.1 细胞培养 | 第18页 |
2.2 细胞活性测定(MTT assay) | 第18页 |
2.3 GC-2spd细胞染毒 | 第18-19页 |
2.4 流式细胞术检测GC-2spd细胞凋亡 | 第19页 |
2.5 SOD、GSH-Px酶的活性和MDA含量的测定 | 第19页 |
2.6 荧光定量PCR法检测mRNA表达水平 | 第19-21页 |
2.6.1 总RNA提取 | 第19-20页 |
2.6.2 逆转录 | 第20页 |
2.6.3 引物设计与合成 | 第20页 |
2.6.4 实时定量PCR(real time PCR)检测 | 第20-21页 |
2.7 Western blotting测定蛋白的表达 | 第21-24页 |
2.7.1 细胞蛋白提取 | 第21页 |
2.7.2 BCA法测蛋白浓度 | 第21页 |
2.7.3 SDS-PAGE电泳及转膜 | 第21-23页 |
2.7.4 半干转膜法转膜 | 第23页 |
2.7.5 封闭与免疫反应 | 第23-24页 |
2.8 统计学分析 | 第24-25页 |
第3章 实验结果 | 第25-30页 |
3.1 DEHP对GC-2spd细胞活性的影响 | 第25页 |
3.2 DEHP对GC-2spd细胞凋亡的影响 | 第25-26页 |
3.3 GC-2spd细胞中SOD、GSH-Px活力以及MDA含量的变化 | 第26-27页 |
3.4 DEHP对GC-2spd细胞Fas L,caspase-3,caspase-8 mRNA表达水平的影响 | 第27-28页 |
3.5 DEHP对GC-2spd细胞Fas L,caspase-3,caspase-8 蛋白表达水平的影响 | 第28-30页 |
第4章 讨论 | 第30-33页 |
4.1 DEHP可诱导GC-2spd细胞凋亡 | 第30页 |
4.2 DEHP通过氧化应激诱导GC-2spd细胞凋亡 | 第30-31页 |
4.3 DEHP通过Fas/FasL途径诱导GC-2spd细胞凋亡 | 第31-32页 |
4.4 总结 | 第32-33页 |
致谢 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-38页 |
综述 | 第38-49页 |
参考文献 | 第45-49页 |
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49-50页 |
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第50页 |